金針菇菌種質(zhì)量及親緣關(guān)系評(píng)價(jià)研究.pdf

1、金針菇是美味珍稀的食用菌之一，同時(shí)又具有很好的保健價(jià)值，在我國(guó)許多地區(qū)都有栽培。河北省靈壽縣、行唐縣、唐縣等是我省金針菇主產(chǎn)區(qū)，其生產(chǎn)的金針菇暢銷國(guó)內(nèi)外，金針菇產(chǎn)業(yè)的發(fā)展對(duì)促進(jìn)當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展起了重要的推動(dòng)作用。但近幾年，在金針菇生產(chǎn)上出現(xiàn)一些問題，這些問題可歸結(jié)為兩個(gè)方面：一是所用金針菇菌種普遍退化、老化，造成菇農(nóng)栽培風(fēng)險(xiǎn)加大，經(jīng)濟(jì)效益下滑；二是金針菇菌種市場(chǎng)極為混亂。由于目前尚沒有關(guān)于食用菌菌種質(zhì)量評(píng)價(jià)的科學(xué)體系，菌種質(zhì)量和產(chǎn)銷管

2、理薄弱，一定程度上造成了食用菌菌種雜、多、亂現(xiàn)象的發(fā)生，嚴(yán)重?fù)p害了菇農(nóng)利益。為了解決以上問題，本研究選擇了12個(gè)金針菇菌株為材料，對(duì)它們的菌種質(zhì)量及親緣關(guān)系進(jìn)行了評(píng)價(jià)。 主要結(jié)果如下： 1.比較了生產(chǎn)上常用的12個(gè)金針菇菌株菌絲的生長(zhǎng)速度及菌落特征，同時(shí)，對(duì)12個(gè)菌株的胞外酶，包括：CMC纖維素酶、木聚糖酶、漆酶活力進(jìn)行了測(cè)定，以期找出菌絲的生長(zhǎng)速度與胞外酶活力的相關(guān)性，為正確評(píng)價(jià)菌種質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：12

3、個(gè)菌株間生長(zhǎng)速度存在差異，在PDA加富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快的菌株是9號(hào)和12號(hào)菌株；在模擬出菇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快的菌株是8號(hào)、10號(hào)和12號(hào)菌株。纖維素酶及木聚糖酶活力最高的是1號(hào)菌株；漆酶活力最高的是2號(hào)菌株。 2.采用兩種方法研究了12個(gè)金針菇菌株間的親緣關(guān)系。一是采用平板對(duì)峙培養(yǎng)法觀察了12個(gè)菌株間的拮抗關(guān)系，結(jié)果表明：12個(gè)菌株間存在不同程度的拮抗現(xiàn)象，無拮抗或拮抗效果不明顯的菌株組合為：1號(hào)和6號(hào)、2號(hào)和4號(hào)、7號(hào)和10號(hào)、

4、3號(hào)和5號(hào)。二是采用PAGE技術(shù)對(duì)比了12個(gè)菌株的酯酶同工酶圖譜并進(jìn)行了聚類分析，結(jié)果表明：12個(gè)菌株在遺傳距離為D=0.39處明顯地聚成5組，Ⅰ組：1號(hào)和6號(hào)，呈現(xiàn)Ec、Ed、Ei、Ek、El特征帶；Ⅱ組：2號(hào)和4號(hào)，呈現(xiàn)Ec、Ed、Ef～Ei、El特征帶；Ⅲ組：7號(hào)、8號(hào)、9號(hào)和10號(hào)，呈現(xiàn)Ed、Eh、Ei和El特征帶；Ⅳ組：3號(hào)、5號(hào)和11號(hào)，呈現(xiàn)Ea、Ed～Ei、El特征帶；Ⅴ組只有12號(hào)，呈現(xiàn)Ed、Ee、Ei和El特征帶。拮抗

5、關(guān)系法和酯酶同工酶圖譜聚類分析結(jié)果基本一致。此外還發(fā)現(xiàn)，在12個(gè)金針菇菌株的酯酶同工酶圖譜中，譜帶d、i、l為12個(gè)菌株所共有，說明這3條譜帶為金針菇的標(biāo)志性譜帶，其相對(duì)遷移率分別為0.479，0.744，0.905。 3.利用PAGE電泳法顯示金針菇酯酶同工酶圖譜可用于準(zhǔn)確分析不同菌株間的親緣關(guān)系，但考慮到菌種管理部門和菌種生產(chǎn)單位的實(shí)際情況，PAGE電泳法工序復(fù)雜、成本較高，為此我們研究利用醋酸纖維素薄膜電泳技術(shù)代替PAGE

6、電泳顯示金針菇酯酶同工酶圖譜，以期為菌種的良種選育、種性鑒定及菌種管理等工作提供更為簡(jiǎn)潔、快速的方法。結(jié)果顯示：6種不同金針菇菌株醋酸纖維素薄膜電泳共出20條酯酶同工酶帶，其中相對(duì)遷移率不同的共有8條(e1-e8)，e1-e8的相對(duì)遷移率分別為：0.58，0.613，0.645，0.709，0.806，0.839，0.871，0.934。6種金針菇的電泳條帶各不相同，說明它們屬于不同的菌株，但它們之間又有共同的條帶，又證明它們有一定的親

7、緣性，其中1號(hào)和2號(hào)有3條相同的條帶，4號(hào)和5號(hào)條帶相同，3號(hào)與4號(hào)、5號(hào)有2條相同的條帶，6號(hào)與其它5種相同條帶比較少，說明1號(hào)和2號(hào)的親緣關(guān)系較近，4號(hào)和5號(hào)親緣關(guān)系較近，而3號(hào)和4號(hào)、5號(hào)親緣關(guān)系較近，而6號(hào)與其它5種親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。結(jié)果和PAGE電泳法顯示的金針菇酯酶同工酶圖譜基本一致。 4.金針菇是河北省主要食用菌主栽品種之一。為促進(jìn)金針菇生產(chǎn)，保證廣大金針菇種植戶的利益，在我們研究基礎(chǔ)之上，起草制定了河北省金針菇菌種質(zhì)