轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻品系HD3的鑒定分析.pdf

1、水稻(Oryza sativa)是禾本科單子葉的植物，是世界重要的糧食作物。通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將cry1C*基因轉(zhuǎn)入到水稻品種松粳9中，得到轉(zhuǎn)抗蟲基因水稻品種HD3。本研究通過對轉(zhuǎn)抗蟲基因水稻品種HD3進行Basra抗性篩選、PCR檢測、Southern blot檢測、室內(nèi)抗蟲性鑒定、RT-PCR檢測及Bt蛋白定量檢測等鑒定，選擇出了目的基因PCR呈陽性、外源基因是低拷貝整合、Bt基因轉(zhuǎn)錄及翻譯水平較高、抗螟蟲性強的轉(zhuǎn)基因粳稻品系。

2、>　　本研究主要結(jié)果如下:
　　1.通過根瘤農(nóng)桿菌EHA105(pBar-cry1c*)介導(dǎo)轉(zhuǎn)化水稻品種松粳9號，以抗Basta的bar基因及cry1c*基因PCR檢測呈陽性的植株，生長發(fā)育正常為原則，經(jīng)過5代選擇，培育成功了7個轉(zhuǎn)基因水稻HD3品系。
　　2.對轉(zhuǎn)基因水稻品系HD3的Bt基因的RT-PCR檢測結(jié)果顯示，不同品系mRNA表達量不同，葉片最高的是HD3-7，最低的是HD3-3;莖鞘最高的是HD3-7，最低的是H

3、D3-1;幼穗最高的是HD3-7，最低的是HD3-4。
　　3.對轉(zhuǎn)基因水稻品系HD3的Bt蛋白含量進行鑒定，結(jié)果顯示不同品系Bt蛋白含量不同，葉片最高的是HD3-7，最低的是HD3-3;幼穗最高的是HD3-7，最低的是HD3-4;莖鞘最高的是HD3-7，最低的是HD3-1。
　　4.對轉(zhuǎn)基因水稻品系HD3進行Southern blot雜交鑒定，結(jié)果表明HD3-1、HD3-2、HD3-3、HD3-4、HD3-5和HD3-7等