甘藍根腫病生防菌的篩選及防治效果測定.pdf

1、十字花科植物根腫病，是由蕓薹根腫菌(Plasmodiophora brassicae Woron.)侵染引起的一種世界性土傳病害，該病流行蔓延時，可造成十字花科作物產量下降，嚴重時甚至造成絕收。多數十字花科作物因具食用或經濟價值而被各大產地大規(guī)模種植，這在一定程度上也加劇了根腫病在各產地的發(fā)生流行。
　　根腫病目前仍無切實有效的防治方法，部分用于化學防治的藥劑又容易造成環(huán)境污染且成本較高，因此，尋找能夠安全、高效防治根腫病的方法，

2、具有重要意義，生物防治因其來源廣泛、對人畜和環(huán)境安全而備受研究者的青睞。
　　根腫菌屬于專性寄生菌，不能通過傳統(tǒng)篩選生防菌的方法獲得有效菌株，目前的篩選方法多為周期較長的大田篩選或者溫室盆栽篩選。
　　本研究借鑒傳統(tǒng)的篩選方法，以細胞壁成分與根腫菌休眠孢子囊壁主要成分相似的棉花枯萎病菌作為指示病原菌，進行平板篩選，通過水培寄主，以生防菌直接抑制根腫病菌對根毛或對皮層的直接侵入作為評價篩選生防菌的直接依據，同時輔助休眠孢子囊萌

3、發(fā)抑制及活性檢測試驗、產幾丁質酶活性試驗，最終選取兩株防治效果較好的菌株進行溫室盆栽試驗，在評價生防菌株防治效果的同時，驗證該篩選方法的科學性。
　　1.根腫菌生防菌的分離篩選
　　生防菌分離采用土壤稀釋法，從采集的土樣中共分離得到放線菌94株，細菌111株;生防菌的篩選采用平板對峙法，經首次篩選、二次篩選，最終獲得15株抑菌效果較好的菌株，抑菌帶8-17 mm不等，其中菌株SYZ2-6、YYD3-1、GAS1-9、FLD1

4、7-6、FLB2-2能夠產生幾丁質酶。
　　2.休眠孢子囊萌發(fā)抑制及活性檢測
　　休眠孢子囊萌發(fā)采用淺層液體培養(yǎng)法。隨著萌發(fā)時間的增加，不同處理組的累計萌發(fā)率呈上升趨勢;20d后，僅菌株GAS1-9、YYD3-1、FLD17-6、Itb295以及生防菌劑XF-1處理過的休眠孢子囊萌發(fā)率與對照組始終存在顯著性差異，抑制效果明顯。
　　用生防菌無菌發(fā)酵液處理休眠孢子囊。結果表明，經菌株GAS1-9、YYD3-1、FLD17

5、-6、SYZ2-6發(fā)酵液處理的休眠孢子囊失活明顯。
　　檢測4℃存放時間對休眠孢子囊活性的影響，隨著存放時間的延長，休眠孢子囊失活率呈上升趨勢，存放10d以內，失活效果不顯著，存放15d以上，活性下降明顯。
　　3.生防菌控制病原菌侵染根毛
　　甘藍幼苗接種病原菌的同時施用生防菌無菌發(fā)酵液，分別于接種第7d、10d、15d隨機拔取幼苗，統(tǒng)計根毛侵染率。菌株GAS1-9、YYD3-1、SYZ2-6、FLD17-6及生防菌

6、劑XF-1處理的幼苗，根毛侵染率始終較對照組下降明顯，抑制效果顯著。
　　4.溫室盆栽防效測定
　　選取GAS1-9和FLD17-6作為研究對象，溫室盆栽采用菌土法進行接種。
　　試驗共設5個不同的生防菌處理組，接種第60 d，調查各植株根部的腫大情況。盆栽試驗表明，這兩株生防菌施用3次以下時，雖然不能有效降低植株的發(fā)病率，但是可以顯著降低病情指數，當施用次數大于4次時，不僅可以顯著降低植株發(fā)病率，病情指數也有了顯著的