山東省貝類弧菌流行病學(xué)調(diào)查、藥敏試驗(yàn)及毒力基因檢測(cè).pdf

1、近年來，我國(guó)貝類養(yǎng)殖種類和養(yǎng)殖模式越來越多樣化，養(yǎng)殖技術(shù)逐漸成熟，養(yǎng)殖面積不斷擴(kuò)大，貝類產(chǎn)業(yè)已成為我國(guó)水產(chǎn)業(yè)的重要支柱。但是，以弧菌為主要致病菌的微生物對(duì)貝類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)帶來嚴(yán)重危害。夏季的7、8月份是貝類弧菌病的高發(fā)季節(jié)，由弧菌引起的水生動(dòng)物疾病流行面積廣，發(fā)病率高，對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，一直是水產(chǎn)領(lǐng)域研究的一大熱點(diǎn)。
　　本試驗(yàn)對(duì)山東省主要貝類養(yǎng)殖區(qū)的養(yǎng)殖貝類和野生貝類進(jìn)行了弧菌的流行病學(xué)調(diào)查。通過細(xì)菌分離、生化鑒定、1

2、6s-rDNA的克隆以及序列分析比對(duì)等方法，對(duì)分離的弧菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究。掌握了貝類弧菌的流行特點(diǎn)及規(guī)律，為預(yù)防疾病的發(fā)生提供了依據(jù)。自濰坊壽光，威海乳山、文登，青島膠南，日照，濱州無棣，東營(yíng)河口等地區(qū)采集了不同的貝類，包括青蛤、文蛤、扇貝、橢螺、尖螺、竹蟶、織紋螺、四角蛤、牡蠣、沙蛤、藍(lán)蛤、花蛤、毛蚶、魁蚶、扁玉螺、貽貝等。從樣品中分離出27種弧菌，8種其它細(xì)菌，共222株。經(jīng)測(cè)序分析比對(duì)，主要有哈氏弧菌(Vibrio ha

3、rveyi)，溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)，副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、 Vibrio chagasii、Vibrio azureus、需鈉弧菌(Vibrio natriegens)、創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus）、杭州弧菌(Vibrio hangzhouensis）等。結(jié)果顯示，哈氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌的檢出率較高，分別占20％、18%、21%；其他弧菌相

4、對(duì)較少。膠南地區(qū)副溶血弧菌和溶藻弧菌檢出率較高；無棣哈氏弧菌和溶藻弧菌檢出率較高，而副溶血弧菌檢測(cè)率很低；河口、日照、壽光三個(gè)地區(qū)的三種弧菌的檢出率都比較高，均在15%-35%之間。
　　結(jié)果表明，弧菌是導(dǎo)致貝類發(fā)病的主要病原菌之一，對(duì)青蛤、文蛤、毛蚶、竹蟶、沙蛤的危害相對(duì)嚴(yán)重。其中哈氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌分離出的菌株較多；哈氏弧菌主要分離自青蛤、文蛤、竹蟶、沙蛤、毛蚶；副溶血弧菌主要分離自文蛤、竹蟶、沙蛤、花蛤、毛蚶，沙蛤

5、最多。溶藻弧菌在青蛤、文蛤檢出率較高，其次為毛蚶。不同弧菌在不同貝類中的檢出率有很大差異，在不同地區(qū)中的檢出率也存在很大差異。
　　對(duì)分離的哈氏弧菌、副溶血弧菌及溶藻弧菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)?？咕幬锇ǎ喊⒚卓ㄐ?、慶大霉素、萘定酸、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、諾氟沙星、紅霉素、阿奇霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素、頭孢噻吩、頭孢呋辛、氨芐西林、哌拉西林、阿莫西林、氯霉素、復(fù)方新諾明、氟苯尼考，共17種。結(jié)果表明，三種弧菌都對(duì)氨芐西林和阿莫西林的耐藥率較

6、高，對(duì)其他藥物的敏感程度不同，也有耐藥菌出現(xiàn)。
　　本試驗(yàn)對(duì)哈氏弧菌和副溶血弧菌主要毒力基因進(jìn)行檢測(cè)，哈氏弧菌主要毒力基因?yàn)閘uxR、toxR、vhhA、vhhB、vhpA、vhpB、toxS、flaA、pap6；副溶血弧菌主要毒力基因?yàn)閠dh、trh、ureC、vscC2、vcrD2。結(jié)果表明，80%的哈氏弧菌檢測(cè)到luxR、toxR、vhhA、vhhB；副溶血弧菌毒力基因tdh、trh和ureC的檢出率在20%左右。