山東省家禽腫瘤性疾病流行病學(xué)調(diào)查及GIS預(yù)警系統(tǒng)的建立.pdf

1、禽腫瘤性疾病作為世界范圍發(fā)生的疾病，嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展，具有重要的經(jīng)濟(jì)意義。其中危害最嚴(yán)重的主要包括馬立克氏病(Marek'sdisease，MD)、禽白血病(Avian leukaenia，AL)和網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥(Reticuloendotheliosis，RE)。這三種腫瘤性疾病世界各地均有所流行，并且發(fā)生免疫失敗和出現(xiàn)強(qiáng)毒力致病型毒株的報(bào)道不斷增多，造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。所以有效預(yù)防和控制這些疾病將是我們今后研究的重點(diǎn)，也是當(dāng)

2、今巨大的挑戰(zhàn)之一。 本課題將結(jié)合血清學(xué)檢測(cè)、臨床診斷、病理組織學(xué)、免疫組織化學(xué)、PCR檢測(cè)以及腫瘤相關(guān)的環(huán)境因素的調(diào)查研究，對(duì)山東省境內(nèi)家禽腫瘤性疾病的流行現(xiàn)狀做系統(tǒng)調(diào)查，及時(shí)掌握疾病感染所波及的范圍及影響因素，尋找腫瘤的發(fā)生與病毒感染、環(huán)境因素之間的相關(guān)性，并結(jié)合地理信息系統(tǒng)(GIS)，建立一套完整、系統(tǒng)的預(yù)警機(jī)制，從而對(duì)我省家禽腫瘤性疾病做到有效預(yù)防。 血清學(xué)檢測(cè)主要通過(guò)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、ELISA方法對(duì)山東省境內(nèi)AA種

3、雞(4周齡以上)的MD、AL、RE進(jìn)行抗原或抗體檢測(cè)。此外，我們還通過(guò)血凝、血凝抑制試驗(yàn)對(duì)NDV進(jìn)行抗體水平的檢測(cè)，從而研究腫瘤性疾病與這些常規(guī)病之間的關(guān)系，以及抗體消長(zhǎng)規(guī)律對(duì)腫瘤發(fā)生的影響。結(jié)果顯示，MD、AL、RE在山東省境內(nèi)的AA種雞場(chǎng)普遍存在，MD平均抗原陽(yáng)性率為3.38％，而AL、RE平均抗體陽(yáng)性率分別為10.31％、40.36％。血凝、血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示病毒性腫瘤疾病高發(fā)區(qū)域，新城疫抗體普遍較低。這表明感染腫瘤性病毒的

4、雞群體液免疫被廣泛的抑制，對(duì)NDV疫苗的抗體生成能力有所下降。 對(duì)山東省境內(nèi)57份活雞進(jìn)行剖檢取樣，通過(guò)病理組織學(xué)觀察和免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明，發(fā)病雞在肝臟、脾臟、腎臟、腺胃、骨髓等組織內(nèi)存在MDV、ALV-J或REV抗原的陽(yáng)性信號(hào)。所有被檢雞中有38.6％雞只組織呈MDV抗原陽(yáng)性，淋巴細(xì)胞增生灶中，可見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞成團(tuán)或散在存在；有54.39％在骨髓、肝臟和腎臟等內(nèi)臟器官中存在ALV-J抗原的表達(dá)，呈強(qiáng)陽(yáng)性染色；28.07％檢測(cè)

5、病例為REV陽(yáng)性；其中MDV+ALV-J雙重陽(yáng)性率為12.28％；MDV+REV雙重陽(yáng)性率為5.26％；ALV-J+REV雙重陽(yáng)性率為8.77％；MDV+ALV-J+REV三重陽(yáng)性率為3.51％。PCR檢測(cè)結(jié)果表明MDV、ALV-J、REV的陽(yáng)性率分別為43.86％、64.91％、33.33％，MDV+ALV-J雙重陽(yáng)性率為15.79％，MDV+REV雙重陽(yáng)性率為10.53％，ALV-J+REV雙重陽(yáng)性率為12.28％，MDV+ALV-

6、J+REV三重陽(yáng)性率為7.02％。通過(guò)病理組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)腫瘤發(fā)生的部位主要在肝臟，其次依次為脾臟、腺胃、腎。免疫組織化學(xué)檢測(cè)和PCR檢測(cè)結(jié)果從病原學(xué)的角度表明，MDV、ALV-J和REV在我省的流行。利用PCR敏感性、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)可以檢測(cè)出帶毒而未出現(xiàn)臨床癥狀的雞只，確定早期感染；而免疫組化則通過(guò)抗原定位確定病毒在機(jī)體內(nèi)的分布情況以及代謝消長(zhǎng)規(guī)律。實(shí)驗(yàn)顯示免疫組化結(jié)果與病理組織學(xué)符合，肝臟、脾臟抗原陽(yáng)性信號(hào)最多、最強(qiáng)；PCR陽(yáng)性率明顯

7、比免疫組化陽(yáng)性率高，MDV、ALV-J和REV免疫組化和PCR雙陽(yáng)性率分別為33.33％、52.63％、21.05％，免疫組化符合程度依次為76％、81.08％、63.16％。免疫組化和PCR檢測(cè)結(jié)果表明所檢雞只存在早期感染和混合感染現(xiàn)象。 通過(guò)對(duì)家禽所在環(huán)境因素的調(diào)查研究，把病毒感染和其它影響因素相結(jié)合，鑒定禽腫瘤危險(xiǎn)因素之間的相關(guān)性，并根據(jù)群體暴露與生存環(huán)境等因素的相互作用，確定腫瘤危險(xiǎn)度，并建立相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(kù)。通過(guò)對(duì)山東省境

8、內(nèi)20個(gè)種雞場(chǎng)的飼養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行記錄、分析、統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，雞場(chǎng)本身環(huán)境的管理至關(guān)重要，特別要注意疫苗免疫、溫度、濕度、通風(fēng)、密度、等問(wèn)題，調(diào)查發(fā)現(xiàn)腫瘤性疾病的發(fā)生與疫苗的污染有直接或間接關(guān)系，而溫度、濕度過(guò)高或過(guò)低區(qū)域腫瘤陽(yáng)性率均比較高；另外，場(chǎng)址的選擇要結(jié)合所在區(qū)域的地形地貌、氣候，并遠(yuǎn)離可能有污染的地方。 本實(shí)驗(yàn)最終運(yùn)用地理信息系統(tǒng)(GIS)技術(shù)，以山東省基礎(chǔ)地理數(shù)據(jù)庫(kù)為基礎(chǔ)，結(jié)合禽腫瘤性疾病流行病學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)，以軟件工程模式開發(fā)建立了