平滑肌特異性蛋白Smoothelin在糖尿病膀胱病豚鼠膀胱的表達(dá)變異.pdf

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為()課題(組)的研究成果，獲得()課題(組)經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在()實(shí)驗(yàn)室完成。(請?jiān)谝陨侠ㄌ?hào)內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人c㈣：髟筍島／么年嘲

2、如日摘要摘要目的：應(yīng)用鏈脲佐霉素(STz)建立糖尿病豚鼠模型，觀察糖尿病膀胱病(DCP)的病程進(jìn)展，探究平滑肌特異性蛋白Sm00thelin在其發(fā)病機(jī)制中的表達(dá)改變以及意義。方法：50只英國種短毛雌性豚鼠，隨機(jī)選擇42只作為實(shí)驗(yàn)組，8只作為對照組。實(shí)驗(yàn)組單次腹腔注射鏈脲佐菌素(STz)，對照組注射相應(yīng)劑量的枸櫞酸緩沖液。全價(jià)飼養(yǎng)9周和12周，尾靜脈取血通過血糖篩選確定入組豚鼠，中下腹部切開活體暴露膀胱并應(yīng)用尿動(dòng)力儀檢測殘余尿、排尿期最大

3、逼尿肌壓、膀胱容量及順應(yīng)性的變化，以逼尿肌收縮最大壓力下降以及殘余尿／膀胱容量10％作為糖尿病失代償組(DCP組)判斷依據(jù)，確定糖尿病豚鼠病程中的膀胱功能代償及失代償不同表現(xiàn)。利用免疫組織化學(xué)MaXvision法檢測Smoothelin在不同膀胱結(jié)構(gòu)如肌層、粘膜肌層以及血管的表達(dá)強(qiáng)度變化。通過蛋白質(zhì)印跡法以及電泳EcL顯色并應(yīng)用凝膠成像系統(tǒng)對曝光圖片上的蛋白條帶灰度值進(jìn)行采集與分析，目的蛋白Smoothelin表達(dá)量以內(nèi)參Bactin進(jìn)

4、行標(biāo)準(zhǔn)化，對比分析各實(shí)驗(yàn)組間蛋白表達(dá)的差異情況。結(jié)果：經(jīng)尾靜脈血檢測血糖后篩選入組模型20只(隨機(jī)血糖大于168I砌01／L)，糖尿病模型成功率476％(20／42)。與對照組8只比較，觀察糖尿病組豚鼠體重(28030土708)g，較對照組(35150士1007)g顯著下降(P001)，并伴有多尿、體重減輕、活動(dòng)減少等陽性臨床癥狀。經(jīng)尿動(dòng)力學(xué)檢測成功18只(喂養(yǎng)死亡2例)，依據(jù)DCP判斷標(biāo)準(zhǔn)，9周時(shí)的9只糖尿病豚鼠中6只膀胱功能代償，3

5、只功能失代償(333％)；而在12周時(shí)的9只糖尿病豚鼠中，只有1只膀胱功能代償，8只功能失代償(889％)；對照組實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)余6只膀胱功能視為正常對照。DcP組豚鼠殘余尿(072士008m1)，膀胱容量(201士005m1)，順應(yīng)性(O34士004ml／cmH20)與對照組及代償組比較均增加，而最大逼尿肌壓力(646士051cmH20)表現(xiàn)最典型，明顯低于對照組以及代償組，以上差異均存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001)。而在代償組中，殘余尿、膀