鏈狀亞歷山大藻衰亡時(shí)期的生理與分子調(diào)控研究.pdf

1、隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和環(huán)境污染嚴(yán)重，赤潮發(fā)生頻率越來(lái)越高，影響范圍越來(lái)越廣，持續(xù)時(shí)間越來(lái)越長(zhǎng)，危害程度日益增加，赤潮研究已經(jīng)成為了全球研究熱點(diǎn)，尤其是對(duì)赤潮爆發(fā)的研究，而關(guān)于赤潮衰亡的報(bào)道卻相對(duì)較少，關(guān)于赤潮衰亡的分子機(jī)制的研究就更少了。本文研究了鏈狀亞歷山大藻對(duì)數(shù)生長(zhǎng)、衰亡期、高氮磷比、低氮磷比條件下的藻細(xì)胞中可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）、過(guò)氧化氫（H2O2）和還原型谷胱甘肽（GSH）含量、光合速率和呼吸速率

2、、DNA降解、端粒酶活性的變化。結(jié)果表明：在衰亡期、高氮磷比、低氮磷比條件下鏈狀亞歷山大藻可溶性蛋白、GSH含量、光合速率和呼吸速率下降；SOD活性（低氮磷比條件除外）、H2O2、MDA含量上升；端粒酶活性和DNA Ladder隨著藻細(xì)胞生長(zhǎng)而變化，并在衰亡時(shí)期，出現(xiàn)了明顯的DNA Ladder。研究結(jié)果顯示鏈狀亞歷山大藻衰亡過(guò)程的反應(yīng)表現(xiàn)為：蛋白質(zhì)合成受阻或降解，產(chǎn)生大量氧化中間產(chǎn)物（MDA，H2O2等），抗氧化系統(tǒng)被激活，GSH等非

3、酶抗氧化物質(zhì)被大量消耗，SOD等酶抗氧化物被激活；另外表現(xiàn)為光合速率和呼吸速率下降；同時(shí)活性氧自由基（Reactive Oxygen Species，ROS）的積累誘發(fā)了細(xì)胞凋亡，核酸內(nèi)切酶被激活，選擇性降解染色質(zhì) DNA。推測(cè)低氮磷比、高氮磷比條件均可以加快藻細(xì)胞的衰亡的生理過(guò)程，鏈狀亞歷山大藻的赤潮衰亡是一種有序的死亡過(guò)程。
　　同時(shí)本實(shí)驗(yàn)根據(jù)鏈狀亞歷山大藻的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果，選取了兩個(gè)與生長(zhǎng)調(diào)控相關(guān)的基因：泛素（Ub）、端粒酶

4、基因（Telo）；獲得它們的基因序列，與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)Blast比對(duì)，得到同源序列，設(shè)計(jì)引物，提取延遲期、對(duì)數(shù)期及高P、高M(jìn)n誘導(dǎo)下的對(duì)數(shù)期和衰亡期的RNA，采用熒光定量PCR技術(shù)，研究了兩個(gè)基因在不同時(shí)期表達(dá)的情況。結(jié)果顯示泛素基因在衰亡時(shí)期表達(dá)明顯下降，我們推測(cè)赤潮消亡時(shí)，泛素基因表達(dá)量下降，蛋白周期依賴(lài)性蛋白激酶、CDK抑制因子和 cyclins降解受阻，阻礙細(xì)胞分裂，細(xì)胞數(shù)下降；端粒酶基因表達(dá)也在衰亡時(shí)期明顯下降，與之前生理試驗(yàn)