幾種環(huán)境因子對(duì)馬氏珠母貝幼蟲和稚貝生長(zhǎng)、存活和RNA-DNA比值的影響.pdf

1、本研究以馬氏珠母貝幼蟲和稚貝為研究對(duì)象，在實(shí)驗(yàn)室條件下考察環(huán)境因子(溫度、鹽度、藻濃度和養(yǎng)殖密度)對(duì)其生長(zhǎng)、存活和RNA/DNA比值的影響，運(yùn)用中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及響應(yīng)曲面法分析方法，分別考察環(huán)境因子的一次效應(yīng)，二次效應(yīng)以及因子之間的互作效應(yīng)，并建立了回歸方程模型，對(duì)模型優(yōu)化獲得幼蟲和稚貝最佳生長(zhǎng)和存活條件，旨在為馬氏珠母貝優(yōu)質(zhì)貝苗的培養(yǎng)提供可參考的方法，為促進(jìn)馬氏珠母貝養(yǎng)殖技術(shù)優(yōu)化發(fā)展提供理論基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1、溫度

2、和鹽度對(duì)馬氏珠母貝幼蟲生長(zhǎng)和存活聯(lián)合作用的影響。用殼長(zhǎng)100-110μm的馬氏珠母貝幼蟲作為實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)溫度(T)設(shè)置范圍為18-34℃，鹽度(S)范圍為22-36，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)11組，重復(fù)一次。研究結(jié)果表明，溫度和鹽度是影響馬氏珠母貝幼蟲生長(zhǎng)和存活的重要環(huán)境因子，其中溫度的影響效應(yīng)大于鹽度；溫度和鹽度的一次效應(yīng)和二次效應(yīng)均對(duì)瞬時(shí)生長(zhǎng)率(Instantaneous growth rate，IGR)、累積生長(zhǎng)率(Accumulative g

3、rowth rate，AGR)及存活率(Survival rate，SR)的影響顯著(P<0.05)；溫度和鹽度的交互作用對(duì)IGR、AGR和SR的影響不顯著(P>0.05)。建立了溫度鹽度對(duì)馬氏珠母貝幼蟲生長(zhǎng)和存活的模型方程：
　　IGR=-97.9573+3.1161T+4.2431S+0.0057T×S-0.0568T2-0.0746S2(R2=0.9635；Adj.R2=0.9521；Pred.R2=0.9264，P<0.0

4、1)AGR=-107.54+3.1148T+4.9435S-0.0036T×S-0.0536T2-0.0828S2(R2=0.9735；Adj.R2=0.9652；Pred.R2=0.9456，P<0.01)SR=-968.951+18.6333T+54.0982S+0.0438T×S-0.3472T2-0.9458S2(R2=0.9844；Adj.R2=0.9795；Pred.R2=0.9670，P<0.01)檢驗(yàn)表明模型極顯著，擬合

5、度高，可用于預(yù)測(cè)馬氏珠母貝幼蟲生長(zhǎng)和存活狀況。對(duì)模型進(jìn)行同時(shí)優(yōu)化，得出最適溫度、鹽度組合為28℃/29，在此最優(yōu)因子組合時(shí)，瞬時(shí)生長(zhǎng)率最高達(dá)到9.84％/d，累積增長(zhǎng)率最高達(dá)到8.49μm/d，存活率最高達(dá)到89.79％，滿意度函數(shù)值為99.9％。
　　2、以平均殼高為650μm的稚貝為實(shí)驗(yàn)材料，研究溫度(18-34℃)，藻濃度(5×103-100×103cell/mL)和養(yǎng)殖密度(0.5-10ind./mL)三個(gè)環(huán)境因子的聯(lián)合作

6、用對(duì)馬氏珠母貝稚貝生長(zhǎng)的影響。研究結(jié)果顯示，溫度和藻濃度的一次效應(yīng)對(duì)瞬時(shí)生長(zhǎng)率影響顯著(P<0.05)，養(yǎng)殖密度的一次效應(yīng)對(duì)瞬時(shí)生長(zhǎng)率影響極顯著(P<0.01)，三因子的二次效應(yīng)對(duì)瞬時(shí)生長(zhǎng)率的影響均極顯著(P<0.01)；溫度和藻濃度間、溫度和養(yǎng)殖密度間、藻濃度和養(yǎng)殖密度間的互作效應(yīng)對(duì)瞬時(shí)生長(zhǎng)率影響都不顯著(P>0.05)。溫度、藻濃度和養(yǎng)殖密度的一次效應(yīng)和二次效應(yīng)均對(duì)累積生長(zhǎng)率影響顯著(P<0.05)；溫度和藻濃度間的互作效應(yīng)對(duì)累積生

7、長(zhǎng)率不顯著(P>0.05)，溫度和養(yǎng)殖密度間，藻濃度和養(yǎng)殖密度間的互作效應(yīng)對(duì)累積生長(zhǎng)率極顯著(P<0.01)；建立了溫度、藻濃度和養(yǎng)殖密度對(duì)馬氏珠母貝稚貝殼高生長(zhǎng)關(guān)系的模型：
　　IGR=-4.6372+0.5581T+0.0337C+0.0328D-0.0002T×C+0.0004T×D-0.0001C× D-0.0104T2-0.0003C2+0.0084D2(R2=0.9944；Adj.R2=0.9845；Pred.R2=0

8、.9375，P<0.01)AGR=-69.3194+7.6780T+0.2912C-0.6264D+0.0005T×C-0.0455T×D+0.0098C×D-0.1414T2-0.0023C2+0.0511D2(R2=0.9974；Adj.R2=0.9928；Pred.R2=0.9588，P<0.01)檢驗(yàn)表明模型極顯著，擬合度高，可用于預(yù)測(cè)馬氏珠母貝稚貝生長(zhǎng)狀況，對(duì)模型進(jìn)行同時(shí)優(yōu)化，得出最適的溫度、藻濃度和養(yǎng)殖密度組合為27.4℃/

9、69.39×103cell/mL/1.03ind./mL，此時(shí)殼高的瞬時(shí)生長(zhǎng)率和累積生長(zhǎng)率達(dá)到最大值，分別為3.43％/d、42.55μm/d，滿意度函數(shù)值為100％。
　　3、研究溫度、藻濃度和養(yǎng)殖密度對(duì)馬氏珠母貝稚貝RNA/DNA比值的影響以及RNA/DNA比值與生長(zhǎng)的關(guān)系。結(jié)果顯示：RNA/DNA比值與三個(gè)環(huán)境因子密切相關(guān)；溫度的一次效應(yīng)顯著(P<0.05)，二次效應(yīng)極顯著(P<0.01)；藻濃度的一次效應(yīng)和二次效應(yīng)均極顯著

10、(P<0.01)；養(yǎng)殖密度的一次效應(yīng)極顯著(P<0.01)，二次效應(yīng)不顯著(P>0.05)；溫度與藻濃度間、溫度和養(yǎng)殖密度間的互作效應(yīng)顯著(P<0.05)，藻濃度和養(yǎng)殖密度間的互作效應(yīng)極顯著(P<0.01)；建立了RNA/DNA比值與溫度、藻濃度和養(yǎng)殖密度關(guān)系的模型，可用此模型來(lái)評(píng)價(jià)環(huán)境狀況：
　　RNA/DNA=-6.8755+0.7666T+0.0336C-0.0477D-0.00002T×C-0.0024T×D+0.0008

11、C×D-0.01421T2-0.0002C2+0.0012D2(R2=0.9986；Adj.R2=0.9961；Pred.R2=0.9821，P<0.01)馬氏珠母貝稚貝RNA/DNA比值與瞬時(shí)生長(zhǎng)率和累積生長(zhǎng)率線性相關(guān)，并建立了相應(yīng)的模型：
　　IGR=0.09698+0.8087RNA/DNA(R2=0.8803；Adj.R2=0.8710；Pred.R2=0.9382，P<0.01)AGR=-6.3626+11.5301RN