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文檔簡介
1、本文以轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻汕優(yōu)63Bt及其對照汕優(yōu)63為材料,通過田間和室內(nèi)試驗研究了轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻對大螟(Sesamia inferens Walker)的生物學(xué)及主要酶系的影響。主要結(jié)果如下:
1.連續(xù)3年的田間試驗結(jié)果表明,轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻對田間的白穗率有很好的控制效果,能將白穗率降至較低水平,與對照差異顯著(p<0.05)。在田間為害定局后對螟蟲數(shù)量的調(diào)查中
2、發(fā)現(xiàn),不論是轉(zhuǎn)基因水稻田間還是非轉(zhuǎn)基因水稻田間,大螟的數(shù)量都占絕對優(yōu)勢,所占比例遠(yuǎn)大于其他鉆蛀性螟蟲。
2.采用活體生測的方法測定了轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻對大螟幼蟲的取食、生長以及存活的影響。結(jié)果表明,以轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻為食的大螟3齡和5齡幼蟲的累計取食量和相對攝食率與對照相比都顯著的減少。取食轉(zhuǎn)Bt水稻后,大螟3齡和5齡幼蟲體重均出現(xiàn)負(fù)增長。隨著取食轉(zhuǎn)基因水稻時間的延長,大螟幼蟲的死亡率
3、不斷增加,到試驗結(jié)束時,大螟3齡幼蟲的校正死亡率可以達(dá)到100%,5齡幼蟲的校正死亡率達(dá)到85%。
3.采用活體取食生測的方法,研究了轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻對大螟3齡和5齡幼蟲的致死和亞致死作用,當(dāng)大螟3齡和5齡幼蟲持續(xù)以轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻為食時,隨取食時間的延長,幼蟲的死亡率逐漸增加。但是當(dāng)大螟3齡和5齡幼蟲取食亞致死量的轉(zhuǎn)基因水稻后改以對照飼喂時,死亡率達(dá)到一定值后不再持續(xù)增加,存活的幼
4、蟲可以順利進(jìn)入下一齡期,但是幼蟲的發(fā)育歷期較對照時間長。亞致死處理后的部分個體能夠化蛹,與對照相比,幼蟲的化蛹率顯著降低,蛹重減輕,蛹長變短,但是對其化蛹個體的羽化率影響不大,低齡幼蟲羽化后的產(chǎn)卵量受到影響有所減少,但是對高齡幼蟲羽化后的產(chǎn)卵量沒有顯著影響。
4.用轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻莖稈飼喂大螟3齡和5齡幼蟲,采用酶活力測定方法研究了轉(zhuǎn)Bt水稻對大螟幼蟲體內(nèi)三種保護(hù)酶(SOD、CAT和POD)活性的影響。
5、結(jié)果表明,大螟3齡幼蟲在取食24h后SOD活力與對照相比提高了43.44%,48h后降至最低值;在取食24h后POD值達(dá)到最大值,與對照相比,其酶活力值升高了29.22%,最終在取食48h后酶活力達(dá)到最小值,并顯著低于對照;在取食轉(zhuǎn)基因水稻4h后,CAT活力值升高了30.33%,在取食48h后,與對照相比,酶活力降低了27.01%;5齡幼蟲取食4h后SOD活力顯著高于對照水平,36h后達(dá)到最低值,與對照相比,活力值下降了31.62%;在
6、取食8h后POD活力值達(dá)到最高值,與對照相比,升高了73.2%,36h后酶活力值達(dá)到最低值;在取食之初4hCAT活力達(dá)到最大值,與對照相比,其值升高了75.73%,在取食48h后,其活力值與對照相比減少了7.55%。3齡幼蟲與5齡相比,對Bt的抗性水平較低,自身防衛(wèi)能力較差。在取食初期,試蟲體內(nèi)保護(hù)酶活力升高,以抵御Bt毒蛋白對蟲體的傷害作用,隨著取食時間的延長,保護(hù)酶活力迅速降低,從而干擾蟲體正常的代謝機制,導(dǎo)致蟲體出現(xiàn)中毒癥狀,致使
7、昆蟲死亡。
5.采用酶活力測定方法研究了轉(zhuǎn)crylAb/crylAc水稻對大螟幼蟲體內(nèi)兩種解毒酶乙酰膽堿酯酶(AChE)和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)活性的影響。研究結(jié)果表明,大螟3齡和5齡幼蟲在取食轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻后,體內(nèi)AChE以及GSTs活力受到Bt毒蛋白的影響均有所下降。但是5齡幼蟲相對于3齡幼蟲解毒酶活力下降的幅度較小,在取食48h后,3齡幼蟲體內(nèi)AChE活力值與對照相比降低了64.64%
8、,GSTs活力值與對照相比下降了17.45%;5齡幼蟲體內(nèi)AChE活力值下降了42.53%,GSTs活力在處理最后與對照達(dá)到相當(dāng)水平。
6.采用酶活力測定方法研究了大螟幼蟲取食轉(zhuǎn)crylAb/crylAc水稻后體內(nèi)胰蛋白酶活力變化。結(jié)果表明,盡管個別處理組的胰蛋白酶活性高于對照組,但是3齡和5齡幼蟲在取食轉(zhuǎn)crylAb/crylAc基因水稻后體內(nèi)胰蛋白酶活力值總體低于對照水平。大螟3齡幼蟲在取食轉(zhuǎn)Bt水稻后酶活力總體呈下降
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