Bt(Cry1Ab-Cry1Ac)抗蟲棉的抗蟲性鑒定及新Bt(Cry1C-)基因在棉花上的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、據(jù)國際農(nóng)業(yè)生物技術應用服務組織(ISAAA)統(tǒng)計，從1996年到2015年的20年間，全球轉(zhuǎn)基因作物累計種植面積達到20億公頃，其中，轉(zhuǎn)基因棉花累計種植面積達3億公頃。轉(zhuǎn)基因作物為農(nóng)戶及消費者帶來的利益不言而喻。轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉的應用及推廣有效地解決了棉鈴蟲害對棉花生產(chǎn)的影響。隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)其存在幾個問題:一方面，Bt基因在棉花體內(nèi)的表達存在時空差異;另一方面，目前抗蟲棉花品種選育普遍采用的方法是利用獲得轉(zhuǎn)基因應用安全證書的品

2、種作供體，與非轉(zhuǎn)基因棉花雜交，轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉品種間Bt蛋白表達量差異較大，尤其是其雜交后代Bt蛋白的表達量差異很大，對棉花的抗蟲育種造成很大困難;第三，抗蟲基因單一，現(xiàn)有的抗蟲基因主要用于防治鱗翅目的棉鈴蟲（Helicoverpaarmigera）和棉紅鈴蟲（Pectinophora gossypiella），使得棉田其他害蟲如甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）、斜紋夜蛾（Prodenia litura）、玉米螟（Pyra

3、usta nubilalis）等對棉花的危害逐漸加重，其中，甜菜夜蛾于2001年被列入重要害蟲的潛在爆發(fā)名單。
　　本研究測定了不同抗蟲棉花品種、不同遺傳背景棉花品種雜交F1代及不同熟性棉花品種雜交F1代棉花Bt蛋白表達量的差異，探究Bt基因在棉花中的表達及遺傳規(guī)律，為抗蟲棉的育種工作提供理論依據(jù);在保證Bt（Cry1Ab/Cry1Ac）基因繼續(xù)發(fā)揮作用的同時，嘗試將Cry1C*基因轉(zhuǎn)入棉花，研究其對棉花害蟲的控制效果，保證抗蟲棉

4、花的健康發(fā)展。主要結論如下:
　　1)連續(xù)兩年對6個不同抗蟲棉花品種不同組織器官中Cry1Ab/Cry1Ac蛋白含量進行測定及室內(nèi)生物測定，結果表明:不同棉花品種間Cry1Ab/Cry1Ac蛋白含量及棉鈴蟲幼蟲校正死亡率均存在顯著差異，其中岡383和魯6269兩個棉花品種Cry1Ab/Cry1Ac蛋白含量和棉鈴蟲幼蟲校正死亡率均較其他幾個品種高，Cry1Ab/Cry1Ac蛋白在不同品種組織中的表達規(guī)律大體相同:苗期葉片＞蕾期葉片＞

5、鈴期葉片＞蕾期小蕾＞鈴期小鈴;
　　2)不同遺傳背景棉花雜交F1代之間Cry1Ab/Cry1Ac蛋白含量差異不顯著，但與抗蟲親本相比，F(xiàn)1代顯著低于抗蟲親本;二代、三代棉鈴蟲幼蟲校正死亡率在不同雜交組合間存在顯著差異，說明遺傳背景對棉花的抗蟲性有影響。
　　3)不同熟性棉花品種雜交F1代之間Cry1Ab/Cry1Ac蛋白含量差異不顯著，但F1代Cry1Ab/Cry1Ac蛋白含量顯著低于抗蟲親本魯6269;棉花熟性與各組織中C