神經(jīng)生長因子及其受體在蛋雞等級卵泡和輸卵管上的表達(dá)研究.pdf

1、禽蛋生產(chǎn)是當(dāng)今畜牧業(yè)高效產(chǎn)業(yè)之一，與人們的生活息息相關(guān)。家禽為卵生動物，性成熟時(shí)沒有發(fā)情周期、發(fā)情行為、妊娠期和哺乳期，適宜條件下其卵泡可連續(xù)發(fā)育、排卵和受精，排卵后不形成黃體。這些特點(diǎn)使家禽常作為良好的試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，在卵泡發(fā)育生物學(xué)的研究中廣泛應(yīng)用。本試驗(yàn)以不同產(chǎn)蛋期蛋雞為研究對象，以免疫組織化學(xué)法和熒光定量PCR技術(shù)研究NGF及其受體在不同產(chǎn)蛋期卵巢、等級前卵泡、優(yōu)勢卵泡和輸卵管上的表達(dá)定位及其mRNA表達(dá)水平。
　　 1.NG

2、F及其受體在不同產(chǎn)蛋期蛋雞等級卵泡上的表達(dá)研究
　　 為了研究NGF及其受體在不同產(chǎn)蛋期蛋雞卵巢和等級卵泡上的表達(dá)情況，本試驗(yàn)以83、230、330、450和550日齡五個(gè)時(shí)期的蛋雞作為試驗(yàn)動物，通過免疫組織化學(xué)方法和熒光定量PCR技術(shù)研究NGF及其受體在不同產(chǎn)蛋期卵巢和等級卵泡上的表達(dá)定位及其mRNA表達(dá)水平。免疫組織化學(xué)結(jié)果表明:NGF及其受體在83日齡性未成熟蛋雞卵巢上沒有表達(dá);除了450日齡產(chǎn)蛋后期等級前卵泡的顆粒細(xì)胞，

3、NGF和p75在各產(chǎn)蛋期等級前卵泡的膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞上均有表達(dá);TrkA在各產(chǎn)蛋期的等級前卵泡膜細(xì)胞、230日齡產(chǎn)蛋高峰期等級前卵泡顆粒細(xì)胞、450日齡產(chǎn)蛋后期SWF和550日齡產(chǎn)蛋末期SWF和SYF的顆粒細(xì)胞上表達(dá)。熒光定量PCR結(jié)果顯示:NGF及其受體mRNA在各時(shí)期卵巢和各級卵泡上均有表達(dá)，其中230日齡產(chǎn)蛋高峰期SYF上NGF及其受體TrkA和p75的基因表達(dá)量都顯著高于130日齡產(chǎn)蛋前期、450日齡產(chǎn)蛋后期和550日齡產(chǎn)蛋末期

4、，同時(shí)230日齡產(chǎn)蛋高峰期優(yōu)勢卵泡中NGF及其受體TrkA和p75 mRNA表達(dá)水平整體高于其他三個(gè)產(chǎn)蛋期。此外相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，血清中雌激素和孕激素水平與NGF和TrkA在SYF上的表達(dá)強(qiáng)度成正相關(guān)。綜上所述，NGF及其受體在產(chǎn)蛋期蛋雞等級前卵泡和優(yōu)勢卵泡上都存在不同程度的表達(dá)，產(chǎn)蛋高峰期的表達(dá)量顯著高于其他各時(shí)期，而且NGF和TrkA在各產(chǎn)蛋期SYF上的表達(dá)量變化規(guī)律與血清中雌激素和孕激素水平變化規(guī)律成正相關(guān)，推測NGF及其受體可能協(xié)

5、同雌激素和孕激素在蛋雞等級卵泡的生長，發(fā)育和排卵過程中起重要作用。
　　 2.NGF及其受體在不同產(chǎn)蛋期蛋雞輸卵管上的表達(dá)研究
　　 為了研究NGF及其受體在不同產(chǎn)蛋期蛋雞輸卵管上的表達(dá)情況，本試驗(yàn)以83、230、330、450和550日齡五個(gè)時(shí)期的蛋雞作為試驗(yàn)動物，通過免疫組織化學(xué)方法和熒光定量PCR技術(shù)研究NGF及其受體在不同產(chǎn)蛋期蛋雞輸卵管上的表達(dá)定位及其mRNA表達(dá)水平。結(jié)果表明:NGF及其受體在83日齡的蛋雞輸

6、卵管上未發(fā)現(xiàn)有陽性表達(dá);而在230、330、450和550日齡蛋雞輸卵管漏斗部，膨大部和峽部的黏膜上皮細(xì)胞上均有不同程度的表達(dá)，表達(dá)強(qiáng)度隨著日齡的增加而呈現(xiàn)“由弱到強(qiáng)再變?nèi)酢钡淖兓厔?NGF及其受體mRNA在各產(chǎn)蛋期輸卵管漏斗部，膨大部和峽部上均有表達(dá)，其中230日齡產(chǎn)蛋高峰期峽部NGF和p75基因表達(dá)量顯著高于130日齡產(chǎn)蛋前期和450日齡產(chǎn)蛋后期峽部，但同時(shí)期膨大部和峽部TrkA表達(dá)量卻顯著低于130日齡產(chǎn)蛋初期和450日齡產(chǎn)蛋后

7、期膨大部和峽部。上述結(jié)果表明，NGF在不同產(chǎn)蛋期蛋雞輸卵管上都有表達(dá)，且產(chǎn)蛋高峰期的表達(dá)量顯著高于其他各時(shí)期，說明NGF的表達(dá)量與蛋雞的生殖狀況和產(chǎn)蛋性能相關(guān)，推測NGF可能參與調(diào)控蛋雞輸卵管的生長發(fā)育和產(chǎn)蛋過程。
　　 總之，禽類卵泡發(fā)育和產(chǎn)蛋過程是一個(gè)復(fù)雜的生理過程，多個(gè)因素在該過程中起作用。本研究結(jié)果表明，NGF可能協(xié)同雌激素和孕激素參與調(diào)節(jié)等級前卵泡、優(yōu)勢卵泡和輸卵管的生長發(fā)育。然而，NGF在其中的具體調(diào)節(jié)機(jī)制還需要進(jìn)一