濁點(diǎn)萃取-高效液相色譜法分析牛奶中的磺胺類抗生素.pdf

1、畜牧業(yè)是國(guó)民經(jīng)濟(jì)的基礎(chǔ)產(chǎn)業(yè)之一，具有良好的發(fā)展前景和較大的增值潛力。但是隨著畜牧業(yè)的穩(wěn)步發(fā)展，動(dòng)物性食品中的獸藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象屢見不鮮，日益對(duì)人體健康和環(huán)境衛(wèi)生構(gòu)成威脅，同時(shí)也影響國(guó)家的對(duì)外經(jīng)濟(jì)貿(mào)易。近幾年各國(guó)政府相繼建立并不斷完善對(duì)動(dòng)物性食品中的獸藥殘留檢測(cè)的體系，最大殘留限量也大大降低，限量標(biāo)準(zhǔn)也日趨嚴(yán)格。因此對(duì)動(dòng)物性食品中獸藥多殘留分析提出了高效、經(jīng)濟(jì)、快速、準(zhǔn)確的要求。
　　 磺胺類藥物是畜牧業(yè)中應(yīng)用廣泛的抗微生物藥劑，但

2、其殘留威脅到人類健康和環(huán)境安全，目前各國(guó)對(duì)其殘留限量制定了嚴(yán)格的要求。已有大量文獻(xiàn)報(bào)道磺胺類獸藥的分析檢測(cè)，但是這些分析報(bào)道中所用到的前處理技術(shù)大都操作時(shí)間長(zhǎng)，有機(jī)溶劑使用量大，對(duì)人體和環(huán)境同樣存在著一定危險(xiǎn)。濁點(diǎn)萃取技術(shù)作為一種環(huán)保、高效、經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)方法，能夠滿足上述綠色環(huán)保、高效經(jīng)濟(jì)的要求。本文介紹了濁點(diǎn)萃取技術(shù)的原理及其發(fā)展，并對(duì)牛奶中磺胺類藥物的提取、富集和高效液相色譜檢測(cè)條件進(jìn)行了研究，建立了濁點(diǎn)萃取-高效液相色譜法分析檢測(cè)牛

3、奶中磺胺類藥物的理想方法。主要研究結(jié)果如下：
　　 （I）建立了濁點(diǎn)萃取技術(shù)對(duì)牛奶中的磺胺類目標(biāo)物進(jìn)行富集分離，實(shí)驗(yàn)過程中優(yōu)化了破乳方法和濁點(diǎn)萃取方法。確定了冰乙酸的用量為0.14 mL及無水硫酸鈉添加量為0.95 g，離心參數(shù)為5 ℃、10000 rpm（9917.355 g）條件下離心10 min的最優(yōu)破乳因素；
　　 確定了以60 g/L Triton X-100 水溶液為萃取劑，濃氨水的體積為65 μL，正丁醇、

4、無水硫酸鈉的添加量為0.4 mL和0.243G，平衡溫度和時(shí)間為50 ℃和30 min的濁點(diǎn)萃取因素。利用此技術(shù)在0.05、0.1、0.2 mg/L 三個(gè)水平上對(duì)供試牛奶進(jìn)行添加回收率實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：7種磺胺類目標(biāo)物在優(yōu)化條件下的回收率為67％ ～ 105.7％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.93％～ 8.31％，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，符合藥物殘留檢測(cè)的要求。
　　 （ii）建立了高效液相色譜法分析磺胺類藥物，優(yōu)化了流動(dòng)相條件和色譜條件

5、。在選定的色譜條件下，以乙腈（A）和0.01 mol/L 乙酸銨緩沖液（B）的混合液為流動(dòng)相，經(jīng)Inertsil ODS-3（150 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱，于260 nm 下按照優(yōu)化的梯度洗脫程序?qū)ζ叻N磺胺類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行色譜分析。在0.05 ～ 2 mg/L 范圍內(nèi)，七種磺胺類物質(zhì)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.9999；LOD值為2.23 μg/kg ～ 9.79 μg/kg，均低于國(guó)家規(guī)定最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)和日本肯