蝴蝶蘭種質(zhì)資源鑒定與評價.pdf

1、蝴蝶蘭(Phalaenopsis aphrodita HG Reichenbach)是蘭科(Orchidaceae)蝴蝶蘭屬(Phalaenopsis Blume)植物。是當(dāng)今世界上最受歡迎的蘭花品種之一。對現(xiàn)有蝴蝶蘭種質(zhì)資源進(jìn)行鑒定,了解其遺傳多樣性和親緣關(guān)系,為今后的育種提供參考依據(jù)。本研究從形態(tài)學(xué)、SRAP分子標(biāo)記兩個方面進(jìn)行親緣關(guān)系分析,結(jié)果如下:
　　 1.參照《蝴蝶蘭種質(zhì)資源描述規(guī)范》對蝴蝶蘭屬58份資源的49個性狀

2、進(jìn)行了觀測。結(jié)果表明,資源間各數(shù)量性狀均存在較大差異,資源間具有豐富的遺傳多樣性。利用觀測數(shù)據(jù)對種質(zhì)資源進(jìn)行樹狀聚類分析,當(dāng)遺傳相似系數(shù)為0.62時,可將58份品種分為八大類群。
　　 2.通過實驗建立了適合蝴蝶蘭基因組的SRAP反應(yīng)體系及擴(kuò)增程序。25μL的反應(yīng)體系中Mg2+濃度為2.0 mmol/L、Taq酶1.0 U、DNA模板40 ng、上下游引物0.8 mmol/L。PCR擴(kuò)增程序為:94℃預(yù)變性5 min;94℃變性

3、1 min,35℃復(fù)性1 min,72℃延伸1 min,5個循環(huán);94℃變性1 min,50℃復(fù)性1 min,72℃延伸1 min,35循環(huán):72℃延伸10 min;4℃保存產(chǎn)物。
　　 3.從100對SRAP引物中篩選出30對多態(tài)引物,30對引物在58份資源中共擴(kuò)增出465條帶,用篩選出的這30對有效引物對58個供試材料進(jìn)行SRAP擴(kuò)增,共獲得465條DNA譜帶,每條引物的擴(kuò)增帶數(shù)在8～20條之間,平均每條引物擴(kuò)增的DNA條帶