小麥與山羊草原生質(zhì)體融合及外源物質(zhì)對(duì)小麥的影響.pdf

1、小麥(Triticum aestivu)是一種重要的糧食作物。為了適應(yīng)多種非生物和生物脅迫對(duì)小麥產(chǎn)量的影響,多種多樣的新品種應(yīng)運(yùn)而生。增加小麥的遺傳變異的方法之一是體細(xì)胞雜交。它可以從其他的種或?qū)僖胄碌奶匦?。山羊草是小麥遠(yuǎn)緣族植物,它有一些可能對(duì)小麥有益的性狀,特別是在抗病方面引起注意的農(nóng)藝學(xué)特性。由于屬間是雜交不相容的,獲得這些屬間雜種的唯一途徑是原生質(zhì)體融合和細(xì)胞雜交。本試驗(yàn)以小麥幼胚和山羊草的葉片為研究材料,選用了三種染料:用中

2、性紅,FDA和羅丹明B分別對(duì)其酶解出的原生質(zhì)體進(jìn)行染色,并分別觀察1×106、5×106、1×107、5×107個(gè)／mL四個(gè)密度下原生質(zhì)體染色后的融合率,最終確定最佳的處理組合。應(yīng)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法研究了不同種類及濃度的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的PEG融合方法誘導(dǎo)屬間原生質(zhì)體的融合,測(cè)定不同水平的融合率,以得到最佳融合條件組合。結(jié)果表明:
　　 FDA染色小麥的胚,羅丹明B染色山羊草的葉片,最適酶解時(shí)間為4h,最融合適密度為1×107個(gè)／mL

3、。最佳融合液為:PEG6000體積分?jǐn)?shù)(w／v)為25％,0.50M的蔗糖,pH值為5.8。最佳洗液為5.5mM CaCl2。
　　 5-氮雜胞苷(5-azaC)是一種DNA甲基化抑制劑,已廣泛用于DNA去甲基化引起的植物表觀遺傳研究中,一些與甲基化水平低的相關(guān)穩(wěn)定遺傳的有益表觀性狀有其潛在的育種價(jià)值。CPPU是細(xì)胞分裂素類的一種非常重要的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì),具有促進(jìn)細(xì)胞分裂、細(xì)胞擴(kuò)大、延緩植物衰老等作用。目前CPPU已廣泛應(yīng)用于

4、果樹、瓜類蔬菜生產(chǎn),但在小麥生產(chǎn)上應(yīng)用的研究較少。為了探討5-azaC和CPPU對(duì)不同時(shí)期小麥的影響,通過種子處理和葉面噴施的方式,并利用高效液相色譜等多種分析手段,全面研究了不同處理對(duì)衰老指標(biāo)、小麥產(chǎn)量的影響,并從DNA甲基化的角度,進(jìn)一步對(duì)5-azaC和CPPU提高小麥產(chǎn)量的機(jī)理作出了研究,主要研究結(jié)果如下:
　　 小麥種子經(jīng)低濃度(5-500μM)5-azaC處理后,降低了DNA甲基化水平,均能誘導(dǎo)paksaylabgg、

5、Taichung29和Taichung29*6／CarstensV三種小麥開花。1000μM的5-azaC處理使小麥幼苗在20d后死亡。
　　 在開花期葉面噴施5-azaC后,能延緩衰老,使旗葉的DNA甲基化水平降低,提高了莖葉對(duì)籽粒的貢獻(xiàn)率,使小麥籽粒中的蛋白質(zhì)含量和面筋含量略有增加。
　　 CPPU可延緩旗葉的衰老,使旗葉的DNA甲基化水平降低,增加了單莖穗重,促進(jìn)了有機(jī)物質(zhì)向庫的轉(zhuǎn)運(yùn),使小麥籽粒中的蛋白質(zhì)含量和面筋