褐飛虱高毒力真菌篩選及固相發(fā)酵培養(yǎng)基組分優(yōu)化.pdf_第1頁
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1、褐飛虱(Nilaparvata lugens St(?)l)是危害我國(guó)及東南亞地區(qū)水稻生產(chǎn)的重要害蟲。在化學(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期濫用、褐飛虱產(chǎn)生抗藥性的嚴(yán)峻形勢(shì)下,探索褐飛虱的生物防治新途徑顯得尤為必要。本論文以昆蟲病原真菌為研究對(duì)象,在篩選出褐飛虱高毒力真菌的基礎(chǔ)上,研究了真菌侵染褐飛虱的時(shí)間-劑量-死亡率模型、與常用農(nóng)藥的生物學(xué)相容性,并對(duì)真菌的固相發(fā)酵培養(yǎng)基組分進(jìn)行了優(yōu)化,以求為防治褐飛虱的真菌殺蟲劑規(guī)?;a(chǎn)奠定基礎(chǔ)。獲得的主要結(jié)果如下:<

2、br>   1不同真菌菌株對(duì)褐飛虱毒力
   選擇了包括球孢白僵菌、布氏白僵菌、金龜子綠僵菌、黃綠綠僵菌在內(nèi)的12株菌株對(duì)褐飛虱進(jìn)行毒力測(cè)定,結(jié)果表明,不同菌株之間對(duì)褐飛虱的毒力效果差異顯著。其中以金龜子綠僵菌Ma22菌株對(duì)褐飛虱的毒力最高,5d累計(jì)死亡率為23.76%,9d累計(jì)死亡率為65.42%,均極顯著高于其它處理及對(duì)照。
   由生測(cè)數(shù)據(jù)計(jì)算得到各處理的回歸方程及致死中時(shí),在所有處理中,以Ma22菌株的致病速度

3、最快,LT50為5.64d;快于其它處理組(9.22~16.66d)。結(jié)合試蟲死亡率和LT50,可認(rèn)為在所有供試真菌中,Ma22菌株對(duì)褐飛虱的毒力最高。
   2 Ma22菌株侵染褐飛虱的時(shí)間-劑量-死亡率模型
   應(yīng)用時(shí)間-劑量-死亡率模型評(píng)價(jià)Ma22菌株對(duì)褐飛虱的侵染力效果。褐飛虱感染Ma22菌株后,死蟲最早出現(xiàn)在處理后第3d,死亡高峰出現(xiàn)在5~6d。顯著性t測(cè)驗(yàn)表明Ma22菌株的劑量效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)極顯著。

4、   褐飛虱接種Ma22菌株后第3d到第8d的LC50估計(jì)值在5.04×1010~2.24×105個(gè)孢子/ml之間。隨著真菌孢子濃度的增加,真菌對(duì)褐飛虱的LT50值減小。在孢子濃度為1×106和1×107個(gè)/ml時(shí),LT50估計(jì)值分別為5.38d和4.52d。
   3 Ma22菌株與常用農(nóng)藥的生物學(xué)相容性
   以孢子萌發(fā)率和菌絲抑制率為評(píng)價(jià)指標(biāo),考察8種常用農(nóng)藥在亞致死濃度下與Ma22菌株的相容性。結(jié)果表明,殺菌劑

5、對(duì)真菌的抑制作用較強(qiáng),對(duì)孢子萌發(fā)的抑制率均大于95%,對(duì)菌絲的抑制率均大于70%;殺蟲劑與真菌的相容性,以噻嗪酮、毒死蜱和吡蟲啉較好,而阿維菌素和Bt與真菌的相容性較差。
   選取噻嗪酮、吡蟲啉和毒死蜱與Ma22孢子混貯,進(jìn)行長(zhǎng)期相容性檢測(cè)。結(jié)果表明,在4℃和25℃條件下,30d內(nèi)短期混貯,3種農(nóng)藥對(duì)真菌孢子的影響較小,而長(zhǎng)期混貯(50~100d),農(nóng)藥對(duì)真菌孢子的殺傷作用較大。綜合短期與長(zhǎng)期相容性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),可認(rèn)為噻嗪酮與Ma

6、22菌株的相容性最佳。
   4 Ma22菌株固相發(fā)酵培養(yǎng)基組分優(yōu)化
   選擇大米(X1)、稻殼(X2)和黃粉蟲糞(X3)共3個(gè)參試因子,采用二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)方法,建立固相發(fā)酵培養(yǎng)基各組分與Ma22菌株孢子產(chǎn)量之間的數(shù)學(xué)回歸模型。經(jīng)由計(jì)算機(jī)模擬,得到3個(gè)因子對(duì)產(chǎn)孢量的單因子效應(yīng)和雙因子互作效應(yīng)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)尋優(yōu),得到固相發(fā)酵培養(yǎng)基組分的最佳水平編碼值:X(X1,X2,X3)=X(1.682,1.682,0),即大米用量為

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