湖北省水稻白葉枯菌致病小種鑒定及其遺傳多樣性分析.pdf

1、篩選和種植抗病品種是當(dāng)前生產(chǎn)上抵抗水稻白葉枯病最經(jīng)濟(jì)有效的方法，而白葉枯菌普遍存在的毒力分化和致病性的不斷變異卻給育種工作的開展帶來了很大的麻煩。因此，進(jìn)行病原菌致病小種和遺傳多樣性的研究，對了解不同區(qū)域白葉枯菌的毒力分化、群體結(jié)構(gòu)，以及抗病品種的合理布局、輪換和相互間的交流，都具有十分重要的意義，可以為深層次育種策略的制定以及品種抗性的持續(xù)改良提供重要的前瞻性信息。
　　 1.本試驗從采自湖北省7個地區(qū)38個縣（市）的白葉枯標(biāo)

2、樣上共分離得到263個白葉枯菌株，利用含不同單抗基因的6個水稻近等基因系材料IRBB5(Xa5)、IRBB13(Xa13)、IRBB3(Xa3)、IRBB14(Xa14)、IRBB2(Xa2)和IR24(Xa18)作為鑒別寄主對其致病小種進(jìn)行了鑒定。結(jié)果顯示，湖北省水稻白葉枯菌的優(yōu)勢致病小種為R4，其次是R5、R3，未發(fā)現(xiàn)R7、R8兩種小種的菌株。不同區(qū)域白葉枯菌致病小種的構(gòu)成具有明顯差異，武漢地區(qū)的優(yōu)勢小種為R4，孝感和宜昌地區(qū)的優(yōu)勢

3、小種均為R4、R5、R9，黃岡地區(qū)的優(yōu)勢小種為R3、R4，荊州地區(qū)的優(yōu)勢小種為R5，咸寧地區(qū)的優(yōu)勢小種為R3、R5，襄樊地區(qū)的優(yōu)勢小種為R2、R4。同時，小種類型與水稻屬性有一定的相關(guān)性，中稻上小種類型最豐富，早稻上的白葉枯菌毒力較弱，而毒力最強(qiáng)的R9小種只在中稻上出現(xiàn)。另外，試驗對分離自同一田塊不同發(fā)病株及同一病葉不同部位的白葉枯菌株的小種構(gòu)成進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)其毒力均存在明顯的分化，且其毒力分化無規(guī)律性，呈完全隨機(jī)狀態(tài)。
　　

4、 2.在小種鑒定的基礎(chǔ)上，采用Rep-PCR和IS-PCR技術(shù)對263個白葉枯菌株的遺傳多樣性進(jìn)行了分析。用6個專化引物ERIC、BOX、REP、J3、IS1112、IS1113對263個菌株的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，6個引物分別呈現(xiàn)26、18、9、24、21、28種譜型。以彼此間帶位相似率達(dá)70％為界，用UPGMA聚類分析法，可將263個病原菌分為11簇(ERIC)、3簇(BOX)、5簇(J3)、7簇(IS1112)、6簇(I

5、S1113)。可見，最適宜湖北省白葉枯菌遺傳多樣性分析的引物為ERIC，其次是IS1112和IS1113。遺傳分群與菌株的地理來源有一定的關(guān)系，地理來源相近的菌株一般遺傳距離也相近，但也存在部分地理來源相近而遺傳距離較遠(yuǎn)的菌株。小種鑒定結(jié)果和遺傳多樣性分析結(jié)果間尚未發(fā)現(xiàn)有明顯的相關(guān)性。
　　 3.試驗對來自宜昌地區(qū)的56個白葉枯菌株的繁殖速率、培養(yǎng)物顏色和黏度進(jìn)行了測定，結(jié)果顯示，這56個菌株在繁殖速率上存在顯著差異，即使分離自

6、同一田塊內(nèi)的菌株間及同一葉片上的菌株間在繁殖速率上也存在差異。大部分菌株在培養(yǎng)48h后繁殖速率達(dá)到峰值，YC1、YC31、YC35、YC38、YC45、YC51、YC56這7個菌株繁殖速率較其他菌株較快，在培養(yǎng)24h后OD00即達(dá)到峰值，而YC5、YC14、YC19、YC36、YC40、YC49這6個菌株繁殖速率較其他菌株較慢，在培養(yǎng)72h后OD600還未達(dá)峰值。未發(fā)現(xiàn)菌株的繁殖速率與其致病型有顯著的相關(guān)性。同時，這56個菌株的菌苔顏色