蟠桃果形基因發(fā)掘及生理機(jī)制探討.pdf

1、桃（PrunuspersicaL. Batsch）起源于中國，其果形分為圓形（即圓形桃）和扁平形（即蟠桃）二種類型。蟠桃形狀獨(dú)特、食用方便、風(fēng)味甘甜而受到消費(fèi)者青睞，尤其是其扁平的果形特點(diǎn)是其它果樹作物所不具備的，同時(shí)，蟠桃基因具有遺傳多效性，可增加果實(shí)含糖量，成為品質(zhì)育種的重要方式，而且目前仍缺乏十分可靠的分子標(biāo)記可用于蟠桃育種，更不明確蟠桃果形形成的生理及分子機(jī)制。因此，本研究旨在初步探討蟠桃果形形成的生理機(jī)制，進(jìn)一步探索蟠桃果形的

2、調(diào)控基因，開發(fā)分子標(biāo)記，提高蟠桃育種效率，進(jìn)而可以闡明蟠桃獨(dú)特果形的形成機(jī)制。
　　本試驗(yàn)通過測(cè)定不同果形果實(shí)內(nèi)源激素含量差異，初步分析可能導(dǎo)致果形差異的生理因素。同時(shí)，在已有研究基礎(chǔ)之上，針對(duì)果形關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果以及由此確定的果形候選基因區(qū)段，深入分析基因序列以及基因相對(duì)表達(dá)量，旨在逐步發(fā)掘控制蟠桃果形的關(guān)鍵基因。通過以上試驗(yàn)，本研究初步探討了蟠桃果形形成的生理機(jī)制，明確控制蟠桃果形的可能的關(guān)鍵基因，獲得的主要結(jié)果如下：
　

3、　1.不同果形果實(shí)中果皮內(nèi)源激素含量測(cè)定:通過測(cè)定不同果形果實(shí)發(fā)育期及果實(shí)不同部位內(nèi)源激素含量，探討4種植物內(nèi)源激素對(duì)果形差異形成的影響。果實(shí)不同部位激素測(cè)定顯示，圓桃IAA、GA4含量顯著高于蟠桃，且3份圓桃GA4含量在果實(shí)頂部顯著高于中部，ZR與GA3的含量在圓桃、蟠桃基本無差異；較其它激素而言，IAA在果實(shí)整個(gè)發(fā)育期含量最高。本試驗(yàn)結(jié)果初步表明，IAA、GA4對(duì)蟠桃、圓桃果實(shí)發(fā)育及果形形成具有非常重要的影響。
　　2.與果形

4、緊密連鎖的SNP的確定：本試驗(yàn)基于果形關(guān)聯(lián)分析得到的SNP位于基因組上的位置 Chr6：25060196（ Prunus_persica_v1.0），進(jìn)行果形基因的進(jìn)一步探索，利用二代測(cè)序手段，對(duì)106份桃品種（其中15份蟠桃、91份圓桃）進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果顯示所有的蟠桃雜合體（Ss）品種均表現(xiàn)為 A/T、蟠桃純合體（SS）品種表現(xiàn)為 T/T、圓桃（ss）品種均表現(xiàn)為 A/A，其中蟠桃的純合體（SS）T/T為果實(shí)發(fā)育早期敗育類型，最終得到一

5、個(gè)與果形緊密連鎖的關(guān)鍵SNP位點(diǎn)。
　　3.果形分子標(biāo)記的開發(fā)：利用所獲得的與果形緊密連鎖的SNP標(biāo)記，根據(jù)AS-PCR原理，設(shè)計(jì)適合該SNP的AS-PCR分子標(biāo)記。本試驗(yàn)開發(fā)的果形AS-PCR分子標(biāo)記，通過普通PCR與瓊脂糖凝膠電泳即可準(zhǔn)確的鑒定出蟠桃、圓桃果實(shí)類型。利用‘大久?！c‘油蟠桃1-3’雜交群體，共計(jì)84份種質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記的準(zhǔn)確性驗(yàn)證，驗(yàn)證準(zhǔn)確率為100％，可進(jìn)一步用于分子標(biāo)記輔助選擇。
　　4.利用果實(shí)成熟期以及