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
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文檔簡介
1、蘿卜(Raphanus sativus L.)是中國一種重要蔬菜作物,種質(zhì)資源豐富。多倍體育種能夠提高作物產(chǎn)量與品質(zhì);游離小孢子培養(yǎng)能夠在短時間內(nèi)獲得純合植株,縮短育種時間。但是目前蘿卜多倍體種質(zhì)高效的誘導(dǎo)體系尚未建立,特別是采用氟樂靈誘導(dǎo)蘿卜多倍體研究還未見報道;蘿卜游離小孢子培養(yǎng)胚狀體與再生植株頻率比較低。
本研究采用秋水仙素和氟樂靈兩種試劑誘導(dǎo)同源四倍體植株,并比較不同的倍性鑒定方法;通過小孢子培養(yǎng)篩選出具有成胚能力
2、的基因型,探討影響蘿卜小孢子培養(yǎng)中胚狀體產(chǎn)生的因素,以期為蘿卜四倍體與單倍體植株高效誘導(dǎo)和種質(zhì)創(chuàng)新提供技術(shù)支撐。蘿卜四倍體誘導(dǎo)技術(shù)體系研究中,以本實(shí)驗(yàn)室保存的6個蘿卜基因型為材料,用秋水仙素和氟樂靈兩種藥劑誘導(dǎo)同源四倍體植株。研究結(jié)果表明,采用生長點(diǎn)滴定法,以0.1%的秋水仙素處理,在6個基因型中都獲得了四倍體植株,Nau-xht與Nau-zhqh誘導(dǎo)率最高(16.67%)。采用0.2 mmol/L和1 mmol/L氟樂靈除草劑處理,N
3、au-dy(1)3與Nau-xbch都獲得四倍體,誘變率為40%,誘導(dǎo)效果比秋水仙素誘導(dǎo)的效果明顯增加。四倍體植株氣孔大小、保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)葉綠體數(shù)目、花器官大小、花粉粒縱橫徑都與二倍體植株存在顯著差異,表現(xiàn)出“巨大性”。研究表明將形態(tài)學(xué)鑒定、氣孔鑒定和染色體計(jì)數(shù)鑒定結(jié)合起來可以準(zhǔn)確確定變異株的倍性。
本研究在蘿卜同源四倍體種質(zhì)創(chuàng)新與鑒定方面,采用0.1%秋水仙素滴定11個蘿卜基因型幼苗生長點(diǎn),均得到四倍體植株,誘導(dǎo)率最高為33
4、.33%,最低為16.67%,并通過植株形態(tài)鑒定、氣孔特征鑒定、花粉粒鑒定和染色體計(jì)數(shù)法鑒定出了蘿卜四倍體植株。在蘿卜小孢子培養(yǎng)研究中,以本實(shí)驗(yàn)室96個蘿卜基因型為材料,篩選具有成胚能力的基因型,并對花蕾長度與小孢子發(fā)育時期的關(guān)系、及培養(yǎng)基中添加不同濃度的2,4-D,6-BA等影響游離小孢子培養(yǎng)的因素進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明:有7個基因型形成了胚狀體,基因型是決定胚狀體發(fā)生的決定因素;其中材料“09-4265”形成了再生植株;花蕾長度為3
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