抑制素基因工程疫苗的研究與應(yīng)用.pdf

1、甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文抑制素基因工程疫苗的研究與應(yīng)用姓名：郭憲申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：趙興緒201006013 ．串聯(lián)抑制素基因疫苗對綿羊生殖激素的影響根據(jù)基因免疫技術(shù)，以成功制備的串聯(lián)抑制素重組質(zhì)粒p c D N A - D P P I S S - D I N H 和p e D N A - D P P I S S - D I N H - s C 3 d 3 為免疫原，對6 0 只綿羊進(jìn)行基因免疫試驗，應(yīng)用酶聯(lián)免疫

2、法( E L I S A ) 檢測抗抑制素抗體、放射免疫法( R 認(rèn)) 測定處理后不同時期血清中激素水平。結(jié)果表明：重組質(zhì)粒p c D N A - D P P I S S - D I N H 和p c D N A - D P P I S S - D I N H - s C 3 d 3 免疫綿羊后，各實(shí)驗組P ／N 值均顯著高于對照組( 尸 O ．0 5 ) ，第3 次加強(qiáng)免疫后E 2 、P 含量均顯著高于對照組( 尸< O ．0

3、5 ) 。這些結(jié)果表明，串聯(lián)抑制素基因免疫綿羊可促進(jìn)F S H 分泌，進(jìn)而影響綿羊卵泡發(fā)育和誘導(dǎo)綿羊產(chǎn)雙羔。4 ．串聯(lián)抑制素基因免疫誘導(dǎo)綿羊?qū)\生的研究為了研究串聯(lián)抑制素基因免疫對綿羊?qū)\生的影響，以制備的串聯(lián)抑制素基因疫苗p c D N A - D P P I S S - D I N H 和p c D N A - D P P I S S - D 1 N H - s C 3 d 3 為免疫原，對1 2 0 只綿羊進(jìn)行免疫試驗。結(jié)果表明：0

4、．6m g p e D N A - D P P I S S - D I N H 和0 ．8 m g p e D N A - D P P I S S - D I N H - s C 3 d 3免疫綿羊后，雙羔率分別為2 2 ．2 ％和3 0 ．O ％，均與對照組間差異顯著( 尸< 0 ．0 5 ) ，并且分子佐劑s C 3 d 能增加綿羊?qū)Υ?lián)抑制素基因免疫的反應(yīng)性。串聯(lián)抑制素重組質(zhì)粒成功誘導(dǎo)綿羊?qū)\生的研究，為抑制素基因疫苗的研制提

5、供了理論依據(jù)和技術(shù)支撐。5 ．串聯(lián)抑制素基因免疫的安全性研究用高于正常實(shí)驗組5 倍、1 0 倍( 重組質(zhì)粒p c D N A - D P P I S S - D I N H 1 ．5m g 、3 ．0 r a g ；p e D N A - D P P I S S - D I N H - s C 3 d 3 2 ．0m g 、4 ．0r a g ) 的免疫劑量對8 只綿羊進(jìn)行基因免疫試驗，旨在確定串聯(lián)抑制素基因免疫綿羊的安全性。結(jié)果表明：

6、串聯(lián)抑制素基因疫苗p c D N A - D P P I S S - D 1 - N H 和p c D N A - D P P I S S - D I N H - s C 3 d 3 免疫綿羊后，實(shí)驗羊的精神、食欲、運(yùn)動等均無異常，體溫、脈搏、呼吸均無明顯變化，沒有觀察到基因免疫的任何毒副作用與不良反應(yīng)。由此得出結(jié)論，串聯(lián)抑制素基因疫苗p c D N A - D P P I S S - D I N H 和p c D N A - D P