轉(zhuǎn)SCK-CrylAc基因稻谷對(duì)米蛾生長發(fā)育及解毒功能的影響.pdf

1、本研究以重要儲(chǔ)糧害蟲米蛾(Corcyra cephalonica Stainton)為對(duì)象，研究了轉(zhuǎn)SCK/CrylAc 基因稻谷對(duì)米蛾生長發(fā)育的影響；CrylAc毒蛋白在米蛾不同蟲態(tài)中的積累傳遞動(dòng)態(tài)以及轉(zhuǎn)SCK/CrylAc基因稻谷對(duì)米蛾重要解毒酶和抗氧化系統(tǒng)的影響。獲得了以下主要研究結(jié)果：
　　 1、轉(zhuǎn)SCK/CrylAc基因稻谷對(duì)米蛾表現(xiàn)出極高的抗性。在CrylAc毒蛋白含量為1.375μg/g時(shí)，對(duì)米蛾1齡、2齡、3齡幼

2、蟲的致死率達(dá)到100％。經(jīng)CrylAc稻谷飼喂的米蛾幼蟲，羽化出的成蟲干重顯著低于對(duì)照，成蟲性比(雌/雄)也與對(duì)照達(dá)到顯著差異。
　　 2、采用ELISA方法檢測(cè)了米蛾幼蟲取食轉(zhuǎn)基因稻谷后，CrylAc毒蛋白在幼蟲體內(nèi)的積累降解動(dòng)態(tài)及在不同蟲態(tài)中的傳遞動(dòng)態(tài)。結(jié)果表明：幼蟲體內(nèi)的CrylAc毒蛋白含量隨著取食轉(zhuǎn)SCK/CrylAc基因稻谷時(shí)間的延長而增加。幼蟲取食該轉(zhuǎn)基因稻谷36小時(shí)后移至非轉(zhuǎn)基因?qū)φ盏竟壬侠^續(xù)取食，幼蟲體內(nèi)的Cr

3、ylAc毒蛋白隨著取食時(shí)間的延長而逐漸下降。取食過轉(zhuǎn)基因稻谷的米蛾幼蟲發(fā)育的蛹、成蟲和卵中沒有檢測(cè)出CrylAc毒蛋白。
　　 3、米蛾幼蟲取食轉(zhuǎn)SCK/CrylAc基因稻谷24h-72h，其幼蟲體內(nèi)的α-乙酸萘酯酶、堿性磷酸酯酶的活力顯著低于對(duì)照；酸性磷酸酯酶活力在12h、48h和72h時(shí)也顯著低于對(duì)照；而羧酸酯酶和乙酰膽堿酯酶的活力顯著高于對(duì)照。谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的活性除飼喂24h外，其他處理與對(duì)照相比變化不大。此外還研究

4、了處理72h后米蛾幼蟲體內(nèi)酯酶同工酶譜的變化：同功酶電泳表明有四條酯酶酶帶，四種酯酶Est1、Est2、Est3、Est4的活性均受到不同程度的抑制，酯酶Est4的抑制效果最明顯。表明這些解毒酶和酯酶同工酶直接參與了CrylAc毒蛋白的代謝作用。
　　 4、米蛾幼蟲取食轉(zhuǎn)SCK/CrylAc基因稻谷后，在12h、36h時(shí)的總抗氧化能力顯著低于對(duì)照(P＜0.05)，在48h和72h時(shí)與對(duì)照達(dá)到極顯著差異(P＜0.01)；超氧化物歧

5、化酶(SOD)活力隨著取食時(shí)間的延長逐漸升高，在24h、48h、60h分別與對(duì)照形成極顯著差異，在72h后低于對(duì)照，并達(dá)到極顯著差異；過氧化物酶(POD)活力隨著取食時(shí)間的延長逐漸升高，在48h、72h分別與對(duì)照形成極顯著差異；過氧化氫酶(CAT)活力有所降低，在12h、24h、36h、72h時(shí)均極顯著低于對(duì)照；丙二醛(MDA)含量顯著升高；抗超氧陰離子自由基活力顯著增加，在36h、60h時(shí)顯著高于對(duì)照，在48h、72h時(shí)極顯著高于對(duì)照