低溫及生長(zhǎng)素處理下牡丹花芽生長(zhǎng)素抑制蛋白基因的表達(dá)差異分析.pdf

1、牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）是原產(chǎn)我國(guó)的特有名貴花卉，我國(guó)的傳統(tǒng)十大名花之一，自古以來(lái)就被尊為“國(guó)色天香”、“花中之王”，是美好、幸福、吉祥、富貴的象征，深受世界各國(guó)人民的喜愛(ài)。但是，牡丹自然花期較短(約10 d)，且每年只開(kāi)花一次，集中在4～5月份。春節(jié)催花是牡丹產(chǎn)業(yè)主要內(nèi)容之一，由于不能正確掌握牡丹休眠解除機(jī)理，生產(chǎn)中催花不良甚至催花失敗的現(xiàn)象常有發(fā)生。目前已有關(guān)于牡丹休眠解除過(guò)程中生理生化的研究報(bào)道

2、，而關(guān)于休眠解除的分子機(jī)制的研究很少。現(xiàn)已證明，生長(zhǎng)素抑制蛋白基因(auxin-repressed protein，PsARP)在花芽?jī)?nèi)休眠解除過(guò)程及調(diào)控花芽的生長(zhǎng)發(fā)育中起著重要作用。
　　 本研究選用山東菏澤牡丹基地4年生牡丹品種‘魯荷紅’（Paeonia suffruticosa Andr.‘Lu He Hong’）的健壯植株，以不同低溫和生長(zhǎng)素濃度處理花芽，以酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定內(nèi)源生長(zhǎng)素含量，以CTAB法提取其RNA，采用

3、實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR和傳統(tǒng)的半定量RT-PCR、Northern blot技術(shù)分析了PsARP在花芽?jī)?nèi)休眠解除不同時(shí)期的表達(dá)模式變化及與生長(zhǎng)素的關(guān)系，研究生長(zhǎng)素抑制蛋白基因在花芽?jī)?nèi)休眠解除過(guò)程中的作用，對(duì)深入理解低溫解除休眠的調(diào)控機(jī)制具有重要的理論意義和實(shí)用價(jià)值。
　　 主要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 1、未感受低溫的牡丹花芽外施不同濃度生長(zhǎng)素，不能解除休眠;感受部分低溫的牡丹花芽，低濃度生長(zhǎng)素處理提高了現(xiàn)蕾率;感受完全

4、低溫的牡丹花芽，高濃度生長(zhǎng)素降低了現(xiàn)蕾率。
　　 2、牡丹內(nèi)源生長(zhǎng)素含量隨著感受低溫的增加逐漸下降，說(shuō)明低溫抑制內(nèi)源生長(zhǎng)素的合成，牡丹的休眠解除需要較低的生長(zhǎng)素含量。在牡丹休眠的三個(gè)不同階段，高濃度的生長(zhǎng)素處理顯著增加了內(nèi)源生長(zhǎng)素的含量，外施生長(zhǎng)素處理感受部分低溫的牡丹花芽，作用明顯，低濃度的生長(zhǎng)素對(duì)牡丹休眠的解除有輔助作用;未感受低溫牡丹由于沒(méi)有解除體眠，內(nèi)源生長(zhǎng)素含量在短時(shí)間內(nèi)升高后又下降到處理前水平;感受充分低溫的牡丹休眠

5、完全解除，此時(shí)外施高濃度的生長(zhǎng)素顯著提高了內(nèi)源生長(zhǎng)素的含量，提高開(kāi)花質(zhì)量。
　　 3、PsARP基因表達(dá)隨著感受低溫的增加逐漸上升，說(shuō)明低溫促進(jìn)了該基因的合成，在未感受低溫的牡丹花芽中，低濃度的生長(zhǎng)素處理促進(jìn)了該基因的表達(dá)，高濃度處理對(duì)該基因表達(dá)影響較小;感受部分低溫的牡丹花芽沒(méi)有解除休眠，ARP基因表達(dá)隨進(jìn)入溫室天數(shù)的增加而增加，說(shuō)明牡丹的休眠解除中需要大量的ARP基因的參與，低濃度生長(zhǎng)素處理對(duì)休眠解除有一定輔助作用;感受足量