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文檔簡介
1、水貂作為一種珍貴的毛皮動物,皮張是其經(jīng)濟價值的主要體現(xiàn)。本文通過分析成纖維細胞生長因子5(FGF5)基因在不同品種水貂體內mRNA表達暈的差異及水貂體組織中FGF5的分布情況,從而揭示FGF5基因對水貂被毛長度影響的分子機理。
試驗主要內容如下:
1.不同品種水貂被毛長度的測量分析試驗,隨機選取金州黑色標準水貂和美國短毛黑色水貂60只,公、母各半。采集水貂背中、頸部十字、腹部兩側4個點的針、絨毛進行數(shù)據(jù)分析,
2、比較品種間毛長的差異。
結果表明,水貂針、絨毛在4個取樣部位,兩個品種公貂均較各自品種母貂被毛長,差異極顯著(P<0.01)。4個取樣部位的針毛在同性別水貂比較中,金州黑色標準水貂均較美國短毛黑色水貂針毛長,差異極顯著(P<0.01)。腹側部絨毛比較,美國短毛黑色公貂較其它組別水貂絨毛長,差異極顯著性(P<0.01);金州黑色標準公貂較美國短毛黑色母貂絨毛長,差異極顯著(P<0.01);其它情況差異均不顯著(P>0.05)
3、。
2.FGF5基因在不同品種水貂體組織mRNA表達量的差異分析,隨機將金州黑色標準公貂、金州黑色標準母貂、美國短毛黑色公貂和美國短毛黑色母貂,分為4組,每組隨機取3個生物學個體,對水貂體內FGF5基因表達的mRNA進行熒光定量PCR分析。
結果表明,水貂大腦組織與皮膚組織中FGF5基因mRNA均有表達。同性別同品種水貂,腦組織中的表達量要高于皮膚組織,差異極顯著(P<0.01);水貂FGF5基因mRNA的表
4、達量在皮膚組織和大腦組織中呈負相關;同性別不同品種水貂之間比較,美國短毛黑色水貂FGF5基因mRNA表達量要高于金州黑色標準水貂。
3.FGF5在水貂體組織中的定性與定位分析,取水貂皮膚和大腦組織進行石蠟切片及冰凍切片,觀察毛囊結構及其發(fā)育。冰凍切片中,以兔抗FGF5基因為單克隆一抗;辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔為二抗,應用SP法進行免疫組織化學試驗,并以Cy3棕紅色熒光標記物和。FITC綠色熒光標記物的二抗,進行間接免疫
5、熒光試驗。
結果表明,在光學及熒光顯微鏡下,FGF5在兩品種水貂腦組織和皮膚組織中均有表達;且同一品種水貂腦組織FGF5的含量要高于皮膚組織。FGF5的含量與FGF5基因mRNA的表達量始終趨勢相同。
結論,水貂針、絨毛長度與FGF5基因mRNA的表達量呈相反的趨勢。同性別同品種水貂,皮膚組織與大腦組織中FGF5基因mRNA的表達量呈負相關;FGF5基因mRNA的表達量與FGF5含量始終趨勢相同,說明FGF5
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