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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
了解不同濃度胰島素對(duì)擬胚體(embryoid body,EB)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育相關(guān)基因時(shí)序性表達(dá)的影響。
方法:
采用小鼠EB為研究對(duì)象,體外培養(yǎng)模擬胚胎早期發(fā)育,以60pM及6nM胰島素進(jìn)行干預(yù),并分別于培養(yǎng)的第1、3、5、7、9、11天收集EB細(xì)胞;利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)基因Sox2、Fgf5、Pax6、Arx的時(shí)序性表達(dá)。
結(jié)果:
1.從形態(tài)學(xué)看,60pM組
2、EB狀態(tài)優(yōu)于6nM組;60pM組EB第5天開始出現(xiàn)囊腔化趨勢(shì),第7天形成囊化腔;6nM組EB第7天才開始出現(xiàn)囊腔化趨勢(shì),且在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中一直沒形成囊化腔;
2.6nM胰島素組EB的Sox2、Fgf5、Pax6、Arx的表達(dá)量均明顯高于60pM組EB;
3.Sox2基因表達(dá)在2組EB第5天達(dá)到高峰,第11天同時(shí)降至最低;
4.Fgf5基因在2組EB前5天的表達(dá)量都很低,隨后出現(xiàn)表達(dá)增加,60pM組第7天到達(dá)
3、高峰,6nM組第7天明顯升高,第9天到高峰,至11天2組表達(dá)同時(shí)下降至同一水平;
5.Pax6基因在6nM組中從第3天開始上升,第7天到達(dá)高峰,11天下調(diào)至最低水平,而在60pM組中其表達(dá)均低于6nM組;
6.2組EB中Arx基因的表達(dá)從第7天開始明顯上升,第9天達(dá)到高峰,但6nM組的Arx表達(dá)明顯高于60pM組,至第11天2組EB中Arx表達(dá)回落至同一水平。
結(jié)論:
1.隨培養(yǎng)時(shí)間的不同,Sox
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