不同來源胰島素對(duì)BRL大鼠肝細(xì)胞脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的：
　　 糖尿病患者在臨床上絕大多數(shù)伴有血脂的紊亂,但其具體發(fā)生機(jī)制尚不十分清楚。近來的研究表明,固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)-固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)-胰島素誘導(dǎo)基因(INSIG)代謝通路在維持細(xì)胞內(nèi)的膽固醇及脂肪酸的代謝平衡中有重要作用。研究發(fā)現(xiàn),INSIG-2基因的啟動(dòng)子區(qū)域有一個(gè)1,25-(0H)2D3/LCA的作用元件,可直接作用于體內(nèi)維生素D受體(VDR)介導(dǎo)的INSIG-2 mR

2、NA的轉(zhuǎn)錄。胰島素可抑制肝臟中有活性的INSIG-2基因的表達(dá),從而刺激了SREBP-1c/SCAP復(fù)合體從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體的運(yùn)輸;胰島素通過SREBP-1c可強(qiáng)烈誘導(dǎo)INSIG-1的表達(dá)。重組人胰島素及胰島素類似物在臨床上應(yīng)用廣泛,除有良好的降糖作用外,以往的分子生物學(xué)研究主要集中在其致腫瘤安全性方面,而在脂質(zhì)代謝方面,重組人胰島素和胰島素類似物對(duì)SCAP-SREBP-INSIG通路的具體調(diào)控機(jī)制及是否存在不同尚無研究。
　　

3、 本研究旨在通過體外實(shí)驗(yàn),在分子水平上探索不同胰島素對(duì)肝細(xì)胞INSIG-1mRNA、INSIG-2mRNA、VDR mRNA、SREBP-1c mRNA的表達(dá)的影響及是否有不同,進(jìn)而探討胰島素調(diào)控脂質(zhì)代謝的可能機(jī)制,以及各脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的可能關(guān)系。
　　 材料與方法：
　　 用含不同濃度的重組人胰島素或胰島素類似物的培養(yǎng)液干預(yù)BRL大鼠肝細(xì)胞,并用RT-PCR技術(shù)觀察肝細(xì)胞INSIG-1mRNA、INSIG-2mRNA

4、、VDR mRNA、SREBP-1cmRNA在多個(gè)不同時(shí)間段內(nèi)的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.在重組人胰島素及多種胰島素類似物的干預(yù)下,BRL大鼠肝細(xì)胞INSIG-2 mRNA和VDR mRNA的表達(dá)均下調(diào)(P＜0.05),且兩者的表達(dá)變化一致。
　　 2.地特胰島素與其他胰島素相比,對(duì)于INSIG-2 mRNA和VDR mRNA的下調(diào)作用更明顯(P＜0.01)。
　　 3.與正常對(duì)照組比較,各種胰島素

5、均可上調(diào)BRL大鼠肝細(xì)胞INSIG-1mRNA和SREBP-1c mRNA的表達(dá)(P＜0.05)。
　　 4.地特胰島素與其他胰島素相比,對(duì)于INSIG-1mRNA和SREBP-1c mRNA的上調(diào)作用更明顯(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.不同來源胰島素均可下調(diào)BRL大鼠肝細(xì)胞INSIG-2 mRNA和VDRmRNA的表達(dá)及上調(diào)INSIG-1mRNA和SREBP-1c mRNA的表達(dá),以達(dá)到脂質(zhì)的平衡

6、。
　　 2.不同胰島素對(duì)INSIG-1、INSIG-2、VDR、SREBP-1c基因的表達(dá)作用存在差異,其中地特胰島素與其他胰島素相比,對(duì)于INSIG-2 mRNA和VDR mRNA的下調(diào)作用和對(duì)于INSIG-1mRNA和SREBP-1c mRNA的上調(diào)作用更明顯。
　　 3.地特胰島素對(duì)大鼠肝細(xì)胞INSIG-2 mRNA較其他胰島素有更顯著的下調(diào)作用,與前期實(shí)驗(yàn)研究得出的地特胰島素可相對(duì)下調(diào)3T3-L1脂肪細(xì)胞INS