超營養(yǎng)劑量硒對(duì)肉雞硒蛋白基因及胰島素信號(hào)相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、硒在維持胰腺正常功能方面發(fā)揮著重要作用，胰腺是雞硒缺乏最敏感的器官，缺硒可嚴(yán)重影響胰腺生長(zhǎng)及功能，如引起胰腺變性、壞死、萎縮和纖維化，但超營養(yǎng)劑量的硒對(duì)雞胰腺的生長(zhǎng)及分泌功能的影響尚不清楚。胰島素主要由胰腺分泌，而硒被認(rèn)為具有胰島素樣作用，硒可能通過對(duì)胰島素作用的靶組織中胰島素代謝產(chǎn)生影響而發(fā)揮其胰島素樣作用。硒在生物機(jī)體內(nèi)主要通過硒蛋白發(fā)揮作用，超營養(yǎng)劑量硒對(duì)雛雞胰島素代謝相關(guān)組織中硒蛋白基因及胰島素信號(hào)相關(guān)基因表達(dá)的影響還不清楚，本

2、實(shí)驗(yàn)旨在探究超營養(yǎng)硒對(duì)雛雞生長(zhǎng)性能、抗氧化參數(shù)、硒蛋白基因表達(dá)、胰島素代謝相關(guān)指標(biāo)及基因表達(dá)影響，初步探明超營養(yǎng)劑量硒添加條件下雛雞重要代謝組織胰腺、肌肉和肝臟中硒蛋白基因與胰島素信號(hào)相關(guān)基因表達(dá)發(fā)生了怎樣的變化，從而為進(jìn)一步研究這些差異表達(dá)的硒蛋白基因與胰島素代謝可能存在的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。研究可望為探明硒在胰島素功能維持及胰島素代謝中發(fā)揮的生物學(xué)機(jī)制提供線索。
　　本實(shí)驗(yàn)選用160只一日齡健康科寶肉雞，隨機(jī)分成2個(gè)處理組(n=80

3、)，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。分別飼喂對(duì)照日糧(Se，0.3 mg/kg)和高硒日糧(Se，3.0 mg/kg)，本實(shí)驗(yàn)采用玉米-大豆型日糧，經(jīng)過加工處理得到基礎(chǔ)日糧。試驗(yàn)期6周，期間觀察雛雞生長(zhǎng)情況，測(cè)定其生長(zhǎng)性能，分別在2、4、6周時(shí)，每個(gè)處理選4只雞宰殺，采集血樣和組織樣（肝臟、胰腺和肌肉），用于測(cè)定硒含量、抗氧化指標(biāo)、胰島素相關(guān)指標(biāo)、組織中硒蛋白基因及胰島素信號(hào)相關(guān)基因RT-qPCR檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
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4、.生長(zhǎng)性能及生理生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
　　高硒攝入顯著降低了肉雞的生長(zhǎng)性能，肉雞4周、6周及全期肉雞的日增重(Average day gain，ADG)和日采食量(Average day feed intake，ADFI)顯著下降(P＜0.05)，但各階段及全期料肉比(Feed conversation rate，F(xiàn)CR)未受影響(P＞0.05)。超營養(yǎng)硒日糧極顯著增加了肉雞各個(gè)生長(zhǎng)階段血清和肝臟中的硒含量(P＜0.01)，且肝臟中硒

5、沉積高于血。與正常硒添加組相比，高硒日糧組第4周血清谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-PX）活性提高了37％(P＜0.01)，丙二醛(Malondialdehyde，MDA)降低了35％(P＜0.05)。高硒提高了雛雞4周肝臟中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性及MDA的含量(P＜0.05)，而總抗氧化能力（Total antioxidant capacity，

6、T-AOC）降低了8％(P＜0.05)。在肌肉組織中高硒日糧分別提高了2、4、6周肌肉中GSH-PX活性達(dá)1.8，2.2和2.8倍(P＜0.01)，同時(shí)也提高了2周肌肉SOD活性(P＜0.05);2周胰腺中GSH-PX、T-AOC和MDA均顯著性增加(P＜0.05)。高硒顯著提高胰腺第2周和第4周SOD活性，在第4周時(shí)，較對(duì)照組提高2.7倍(P＜0.05)。測(cè)定了血清中胰島素(Insulin)、血糖(Glucose)、甘油三酯(Trig

7、lyceride，TG)及膽固醇(Total cholesterol，TCH)含量，發(fā)現(xiàn)高硒日糧顯著增加了2周肉雞血清胰島素含量，顯著性降低了血糖水平(P＜0.05)，隨著日齡增長(zhǎng)，差異逐漸減小。高硒日糧還顯著增加了2周和4周血清TG含量(P＜0.05)，和第6周血清TCH含量(P＜0.05)。
　　2.硒蛋白基因定量檢測(cè)結(jié)果
　　高硒日糧飼喂4周后上調(diào)了雛雞肝臟中2個(gè)硒蛋白基因(Seli和Selx)和胰腺中5個(gè)硒蛋白基因（

8、GPx3，TR1，Dio3，Selm和Seli）表達(dá);下調(diào)了肝臟中Dio1和Selt，肌肉中Diol，Seli和Selp，以及胰腺中Sephs2 mRNA表達(dá)量。
　　日糧添加高硒(3.0 mg/kg)與對(duì)照組(0.3 mg/kg)相比，上調(diào)了肝臟中7個(gè)硒蛋白基因（TR1，TR3，Selm, Seli, Sepx1，Sepn1 andSephs2），肌肉中有12個(gè)硒蛋白基因(GPxl，GPx2，TR1，TR3，Dio2，Selk,

9、 Selo，Selu，Seli，Sepn1，Selw，Sephs2)和胰腺中的Sephs2的表達(dá);與此同時(shí)，也降低了硒蛋白基因mRNA表達(dá)水平。這些基因包括肌肉中3個(gè)硒蛋白基因(Diol，Selm，Selp)，肝臟中4個(gè)硒蛋白基因（GPx1，Selu，Selk和Selw）和胰腺中使7個(gè)硒蛋白(Selm, GPx1，GPx3，GPx4, Dio3，Selk, Selp)，隨著高硒飼喂日齡增加，受影響的硒蛋白基因數(shù)量增加。
　　3.胰

10、島素信號(hào)相關(guān)基因定量結(jié)果
　　在4周齡時(shí)，與對(duì)照組比較，高硒日糧上調(diào)了肝臟中Hnf4A和Ucp;肌肉中Pdx1和胰腺中的Hnf4A和Irs1;下調(diào)了肌肉組織中的Irs1和slc2A;胰腺中的Hnf1A的表達(dá)。
　　高硒日糧飼喂雛雞6周齡，與對(duì)照組相比，上調(diào)了肌肉組織中4個(gè)胰島素信號(hào)相關(guān)基因(Foxo1，Hnf4A，Irs2和Pi3k)，肝臟中3個(gè)胰島素信號(hào)相關(guān)基因（GCG, Hnf4A，Slc2A2）和胰腺中2個(gè)胰島素信號(hào)相

11、關(guān)基因（Hnf4A和Irs2）的表達(dá);與此同時(shí)，下調(diào)了肌肉組織中有3個(gè)胰島素信號(hào)相關(guān)基因(Akt1，GCG和Ir)和胰腺中有5個(gè)胰島素信號(hào)相關(guān)基因(Akt1，F(xiàn)oxo2, Ins, Pi3k和Ucp)的表達(dá)。高硒飼喂時(shí)間越長(zhǎng)，受影響的基因越多。
　　結(jié)論:超營養(yǎng)劑量硒日糧攝入降低了雛雞的生長(zhǎng)性能，提高了雛雞血清和肝臟中硒的儲(chǔ)存。高硒對(duì)血液及組織中抗氧化酶活具有顯著的影響，同時(shí)增加了血清中胰島素、甘油三酯及膽固醇的含量并降低了血糖含