成纖維生長(zhǎng)因子5(FGF5)在絨山羊皮膚中的表達(dá)及多態(tài)分析.pdf

1、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子5（Fibroblast Growth Factor—5 FGF5）是皮膚毛囊周期性生長(zhǎng)的重要調(diào)控因子。用RT—PCR的方法已研究證明FGF5基因在絨山羊皮膚毛囊周期性生長(zhǎng)中毛囊興盛期和退行期均檢測(cè)到mRNA的表達(dá)；本研究通過觀察內(nèi)蒙古白絨山羊不同時(shí)期皮膚組織切片，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的片段，克隆基因片段并設(shè)計(jì)探針，最后通過原位雜交技術(shù)檢測(cè)該基因在皮膚組織內(nèi)定位表達(dá)情況。結(jié)果表明：從原位雜交的圖片上來(lái)看FGF5基因在絨

2、山羊皮膚毛囊周期性生長(zhǎng)中毛囊興盛期、退行期和休止期均有定位表達(dá)。 利用PCR—SSCP方法對(duì)同齡內(nèi)蒙古白絨山羊FGF5基因進(jìn)行了單核苷酸多態(tài)性分析。結(jié)果表明：FGF5基因在P2引物擴(kuò)增片段中存在PCR—SSCP多態(tài)性。經(jīng)PCR產(chǎn)物測(cè)序分析，該引物擴(kuò)增片段的第387位點(diǎn)上存在C→T突變，但氨基酸沒有發(fā)生改變都為甘氨酸。該引物還在301位點(diǎn)上均有T堿基插入現(xiàn)象，引起了編碼氨基酸的改變，由原來(lái)的CCT脯氨酸→TCC絲氨酸。對(duì)不同個(gè)體山

3、羊的基因型和基因頻率統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，該引物中內(nèi)蒙古白絨山羊普遍均以等位基因A為主，基因頻率處于Hardy—Weinberg不平衡狀態(tài)。不同個(gè)體的基因型與其它的絨厚毛長(zhǎng)進(jìn)行相關(guān)性分析結(jié)果表明：基因型對(duì)絨厚極顯著（P<0.01），基因型對(duì)毛長(zhǎng)不顯著（P>0.05）。 根據(jù)貓科動(dòng)物上發(fā)現(xiàn)的182bp和194bp兩個(gè)突變位點(diǎn)設(shè)計(jì)一對(duì)引物采用PCR—SSCP方法研究絨山羊上是否有多態(tài)性，結(jié)果表明：內(nèi)蒙古白絨山羊FGF5基因在該兩個(gè)位點(diǎn)上沒有