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文檔簡介
1、絨山羊是重要的毛用經(jīng)濟動物,其絨毛的生長發(fā)育受多種因素影響。Hoxc13已被證實可以直接調(diào)控兩類毛發(fā)組成蛋白(角蛋白與角蛋白關聯(lián)蛋白)的表達,且Hoxc13功能的獲得和缺失都會形成脫毛型小鼠。本論文主要研究了絨山羊毛囊發(fā)育不同階段,皮膚中Hoxc13的表達規(guī)律;同時研究了過表達Hoxc13基因?qū)w外培養(yǎng)的皮膚細胞中HFDRGs的影響;另外通過分析埋植/添加褪黑激素與對照組之間HFDRGs的表達變化情況,了解褪黑激素對HFDRGs的作用。
2、
本研究共得到以下幾點結(jié)論:
1、本研究克隆了絨山羊Hoxc13基因,序列長7.2 kb,包含2個外顯子、1個內(nèi)含子,基因登錄號EU839660,CDS長990 bp,共編碼330個氨基酸。通過分析3個綱17個目的28個脊椎動物Hoxc13基因及其推定的氨基酸序列,發(fā)現(xiàn)Hoxc13基因在非哺乳動物向哺乳動物進化過程中出現(xiàn)了1次基因插入,插入序列為富含甘氨酸的低復雜區(qū)域(Low-Complexity Region,LC
3、R),該區(qū)域的長度在哺乳動物中發(fā)生了分化(10-28個氨基酸的變異)。哺乳動物Hoxc13基因出現(xiàn)了適應性進化,可能與被毛的起源有關。
2、絨山羊皮膚中Hoxc13基因的表達量與胎兒時期皮膚厚度的變化趨勢相一致;在成年絨山羊皮膚中,Hoxc13基因的表達量與次級毛囊活性周期顯著相關(R=0.837,p<0.001);埋植褪黑激素可以提前絨山羊皮膚中Hoxc13的表達,且顯著上調(diào)8-10月份皮膚中Hoxc13的表達量。在體外,褪
4、黑激素對絨山羊皮膚細胞中Hoxc13基因的誘導表達效果不同,下調(diào)了成纖維細胞中Hoxc13的表達,卻上調(diào)了角質(zhì)化細胞中Hoxc13的表達量。
3、過表達Hoxc13基因可能導致角質(zhì)化細胞分化死亡,未能獲得穩(wěn)定表達Hoxc13基因的角質(zhì)化細胞克隆,但獲得了穩(wěn)定表達Hoxc13基因的成纖維細胞系;皮膚成纖維細胞過表達Hoxc13,可促進TgfβrII、Rorα2、Nanog、Wnt10b和PdgfrA的表達,抑制Bmp2、Msx2
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