Eph家族基因在細毛羊皮膚中的表達研究.pdf

1、毛囊作為皮膚的衍生物，是產(chǎn)生被毛的重要組織，它的性狀及組織結(jié)構(gòu)決定著動物被毛的品質(zhì)和產(chǎn)量。近年來的研究揭示，Eph家族基因在動物皮膚的毛囊發(fā)育中具有十分重要的作用，可能參與了毛囊的形成過程。本研究以敖漢細毛羊不同時期皮膚為材料，采用組織學(xué)、實時熒光定量PCR及免疫組織化學(xué)等技術(shù)，對EphA2及其配體Ephrin A2基因和EphA4及其配體Ephrin A3基因在皮膚毛囊中mRNA水平、蛋白水平的表達規(guī)律進行研究，以探究Eph家族基因在

2、毛囊形態(tài)發(fā)生、發(fā)育過程中的表達水平與分布規(guī)律，為細毛羊毛囊發(fā)育的分子調(diào)控機制提供理論基礎(chǔ)。
　　研究結(jié)果如下：
　　1.皮膚組織結(jié)構(gòu)研究顯示，毛囊結(jié)構(gòu)包括結(jié)締組織鞘、外根鞘、內(nèi)根鞘、毛干和毛球部。在胎齡90 d時，體側(cè)部發(fā)現(xiàn)初級毛囊及次級毛囊毛芽。在胎齡120 d時，毛囊發(fā)生角質(zhì)化，形成角質(zhì)化毛干，毛干穿出體表，再分化次級毛囊發(fā)生。出生后一個月時，穿出體表毛干進一步增多。敖漢細毛羊腹股溝部皮膚毛囊密度很低，未見再分化次級毛囊

3、和豎毛肌，但皮脂腺、汗腺較發(fā)達。與胎齡120 d時相比，出生后一個月時的毛囊纖維直徑顯著增大（P<0.05）。初級毛囊密度，在胎齡120 d時顯著低于胎齡90 d時（P<0.01），出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時（P<0.05）。次級毛囊密度，在胎齡120 d時顯著高于胎齡90 d時（P<0.01），出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時（P<0.01）；出生后一個月時和出生后1 d時差異不顯著（P>0.05）。
　　2.

4、實時熒光定量PCR結(jié)果顯示：EphA2基因和Ephrin A2基因mRNA相對表達量：在胎齡120 d時都顯著高于胎齡90 d時（P<0.01），出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時（P<0.01），出生后一個月時和出生后1 d時差異不顯著（P>0.05）。
　　EphA4基因 mRNA相對表達量：胎齡90 d時與胎齡120d時差異不顯著（P>0.05），出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時（P<0.01），出生后一個月時顯著

5、高于出生后1 d時（P<0.01）。
　　Ephrin A3基因 mRNA相對表達量：胎齡120 d時顯著高于胎齡90 d時（P<0.01），出生后1 d時顯著低于胎齡120 d時（P<0.01），出生后一個月時和出生后1 d時差異不顯著（P>0.05）。
　　3.免疫組化試驗結(jié)果顯示：EphA2、Ephrin A2、EphA4和Ephrin A3蛋白在胎齡90 d、胎齡120 d、出生后1 d和出生后一個月，4個時期的敖漢

6、細毛羊體側(cè)部皮膚中均呈現(xiàn)時空特異性的表達。
　　上述結(jié)果表明：在胎齡90 d以前初級毛囊已經(jīng)發(fā)生，出生后一個月時，仍有部分毛囊毛纖維未穿出體表。敖漢細毛羊腹股溝部皮膚與體側(cè)部皮膚相比，毛囊密度很低，但皮脂腺、汗腺較發(fā)達。
　　在胎齡120 d次級毛囊再分化大量發(fā)生時，EphA2、Ephrin A2和Ephrin A3基因的表達量同時顯著升高，推測它們在次級毛囊的再分化過程中可能具有重要作用。此時，發(fā)現(xiàn) EphA4基因在毛乳頭