解有機(jī)磷細(xì)菌的分離鑒定及其解磷特性研究.pdf

1、本研究用有機(jī)磷固體培養(yǎng)基，從合肥市王小郢污水處理廠的污泥中分離純化了10株細(xì)菌，將這10株細(xì)菌接種到有機(jī)磷固體平板上培養(yǎng)2天，有6株細(xì)菌在有機(jī)磷固體平板上生長(zhǎng)，且伴有明顯透明圈產(chǎn)生，表明這6株細(xì)菌具有降解卵磷脂的能力。觀察并測(cè)定這6株細(xì)菌的形態(tài)及生理生化性狀，初步鑒定菌株S1為微桿菌屬（Microbacterium），菌株S2為葡萄球菌屬（Staphylococcus），S3菌株為假單胞菌屬（Pseudomonas），菌株S4為不動(dòng)桿菌

2、屬（Acinetobacter），菌株S5為黃色單胞菌屬（Flavimonas），菌株S6為纖維單胞菌屬（Cellulomonas）。觀察并測(cè)定這6株細(xì)菌在有機(jī)磷固體培養(yǎng)基上的D/d值及在有機(jī)磷液體培養(yǎng)基中的解磷率，菌株S3在有機(jī)磷固體培養(yǎng)基上的D/d值為4.5，在有機(jī)磷液體培養(yǎng)基中的解磷率為66％。
　　 菌株S3為短桿狀，單端叢生鞭毛，無芽孢，革蘭氏染色陰性，大小為0.5μm×2.0μm，菌落表面光滑，邊緣平整，不透明，濕潤(rùn)

3、，呈淺黃色，有臭味。菌株S3生理生化性狀：好氧，氧化酶陽(yáng)性，接觸酶陽(yáng)性，明膠不液化，VP陰性，不水解淀粉。對(duì)其16SrDNA序列分析，結(jié)果表明菌株S3的16SrDNA基因序列與Pseudomonas alcaligenes AY65192516S rDNA基因序列相似性最高，同源性達(dá)97.4％。通過系統(tǒng)進(jìn)化樹分析并結(jié)合形態(tài)和生理生化特征，菌株S3屬于假單胞菌屬產(chǎn)堿假單胞菌（Pseudomonas alcaligenes）。
　　

4、 以菌株S3為對(duì)象，研究各種理化因子對(duì)其生長(zhǎng)的影響。菌株S3在液體培養(yǎng)基中的最適培養(yǎng)條件：最適培養(yǎng)溫度范圍為25～35℃，生長(zhǎng)量最高的培養(yǎng)溫度為30℃；最適裝液量為50ml/250ml，隨裝液量的增加，菌體的生長(zhǎng)逐漸受到抑制；最適初始pH范圍為8.0～9.5，耐受極限分別為4.0～4.4和10.5～11.0，在合適的pH范圍內(nèi)，pH對(duì)其生長(zhǎng)的影響不顯著，菌株S3對(duì)于環(huán)境的酸堿度具有較強(qiáng)的自適應(yīng)能力和較廣的'pH適應(yīng)范圍；Mg2+、Mn2

5、+、 Ca2+可以提高菌株S3的生長(zhǎng)量，F(xiàn)e2+對(duì)菌株S3的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，K+對(duì)其生長(zhǎng)影響不明顯；菌株S3以（NH4）2SO4為氮源生長(zhǎng)量最高，以亞硝酸鉀為氮源生長(zhǎng)量最低。正交試驗(yàn)獲得最佳培養(yǎng)條件為：裝液量100mL/250mL，（NH4）2SO40.5g·L-1，溫度30℃，三因素對(duì)菌株生長(zhǎng)影響的順序：裝液量>氮源>溫度
　　 對(duì)菌株S3在有機(jī)磷液體培養(yǎng)基中解磷能力進(jìn)行了研究。結(jié)果表明菌株S3在溫度為30℃時(shí)的解磷能力

6、最高，上清液中磷酸根離子含量達(dá)到9.363 mg/L；在pH值7.5時(shí)，溶液中磷酸根離子含量最高，在酸性環(huán)境中解磷能力不高，在pH7.5-9.5的堿性環(huán)境中解磷能力差異不顯著；菌株S3在以NH4+為氮源時(shí)表現(xiàn)出較強(qiáng)的解磷能力；裝液量50mL/250mL時(shí)，磷酸根含量達(dá)到8.017mg/L，隨著裝液量增加，上清液中磷酸根含量減少，解磷能力減弱。
　　 以合肥市景觀水為培養(yǎng)基，將菌株S1、S2、S3、S4、S5、S6接種到所采水樣中