大豆根際解磷菌分離及其定殖分析.pdf

1、土壤中磷元素缺乏使植物的生長受到嚴重影響，人為向土壤中施加化學(xué)磷肥，可在一定程度上緩解缺磷現(xiàn)象，但植物對化學(xué)磷肥的吸收和利用不足25％，造成資源浪費，并且殘留在土壤中的化學(xué)磷肥還會引起土壤板結(jié)，形成惡性循環(huán)。因此，當(dāng)前生物磷肥的研究倍受科學(xué)家們的關(guān)注。本研究利用PVK平板篩選結(jié)合搖瓶復(fù)篩，對東北地區(qū)大豆根際土壤樣本中的解磷菌進行了篩選及鑒定，并對解磷菌的應(yīng)用效果以及其在植物根際土壤中的定殖情況進行分析。
　　1、從東北各地區(qū)大豆田

2、選取土壤樣品，利用PVK平板初分離法結(jié)合NBRIP搖瓶復(fù)篩，成功篩選出高效解磷菌菌株。此外，還利用鉬藍比色法在搖瓶復(fù)篩階段對這些菌株進行了解磷能力的測定。
　　2、利用CTAB法提取細菌總DNA，以提取的細菌DNA為模板，用細菌通用引物進行PCR，將PCR產(chǎn)物純化后進行序列測定。測序結(jié)果顯示:肇東1號菌株、阿城1號菌株與海倫1號菌株與巨大芽孢桿菌序列相似度最高;北安4號菌株與枯草芽孢桿菌序列相似度最高。此外，還利用普通光學(xué)顯微鏡及

3、掃描電鏡對菌株進行了形態(tài)學(xué)鑒定。
　　3、在盆栽實驗中，測定了施入解磷菌前后的大豆根際土中的可溶性磷含量，結(jié)果顯示，施入解磷菌后的大豆根際土較施入解磷菌前的土壤中可溶性磷含量明顯增多;用同樣的方法測定施入解磷菌前后一些處理中大豆葉片中的磷含量也有一定的升高。
　　4、用處理過的細沙作為介質(zhì)，將一定量的難溶性的磷化物(Ca3(PO4)2)均勻混合于細沙中，加入配制好的培養(yǎng)液，將解磷菌接種在由難溶性磷化物作為唯一磷源的細沙培養(yǎng)基