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1、Cloninzandpressionanalysis4RrNHXlandRranaexoresslonanalysisoI1an~VHAcK刑V月五爿以一CgenesrelatedtosalttoleranceinwildRosarugosaDinHanSupervisedbyAssociateProfessorFengLiguoADissertationSubmittedtoYangzhouUniversityInPartialFul
2、fillmentoftheRequirementsforTheMasterDegreeofAgriculturalScienceDecember20132揚(yáng)州人學(xué)碩學(xué)位論文AbstractRosarugosaisadeciduousshrubwhichbelongstoRosagenusofRosaceaefamilyTheshrubshavingsplendidcoloranddelightfulfragrancearecultiva
3、tedinmanyvarietiesItisnotonlyaexcellentplantusedinlandscapegreeningandwaterandsoilconservationproject,butalsoavaluablematerialusedinPerfumeandfoodindustryWildRosarugosaoriginatesfromchinaandisoneofthestatesecondclassprot
4、ectedspeciesItmainlydistributesinJilinTumenRiverEstuary,thesouthcoastofLiaoningandthenorthcoastalareaofShandongBecauseofthesurvivalenvironment,wildRosarugosahasstrongsaltresistance,andbecomevaluablematerialofbreedingnewv
5、arietyItisreportedthatthevacuolarNa噯antiporterandvacuolarHATPproteaseplayimportantrolesinplantsalttoleranceVacuolarNa/Hantiporter(RrNHXl)andvacuolarHATPasesubunitc(RrVHA—c)geneofwildRosarugosafromweihaiofShandongprovince
6、wereclonedandexpressionofgenewasanalyzedinthisstudy,ithasimportantacademicsignificanceThemainresultsareasfollows:TotalRNAfromyoungleaveswasextractedusingtheCTABmethod,thenthefullsequenceofgeneRrNHXlandRrVHA—Cgenewhichrel
7、atedtothesaltresistancewereelonedbvRACEmethodTheresultforthetestshowsthatRrNHXtCDNAcontains2358nucleotideswitllanopenreadingframeof1629nucleotidesandwassubmittedtoGenBankwithaccessionnumberKC188664Thegeneencodesa543amino
8、acidproteinwithdeducedmassof6010KDTheproteinwascomposedofahydrophobicN—terminus,10transmembranehelixregionsand2nontransmembranehelixregions,andahydrophilicCterminusThethirdtransmembranehelixregioncontainsthebindingsiteof
9、amilorideTheRrNHXlbelongstothetypeofNHX_Ifamilylocatedinvacuolemembrance,whichfarfromthetypeofNHX—11familylocatedinmembranevesiclesandfurtherfromthetypeofSOS1familylocatedinplasmamembraneTheresultalsoshowsthatRrVHA—Cgene
10、contains781nucleotideswithanopenreadingframeof498nucleotidesandwassubmittedtoGenBankwithaccessionn啪berKF677023Rrl/HAcgeneencodesa543aminoacidproteinwithdeducedmassof167KDTheproteinwascomposedof5hydrophobicregionswhichcon
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