脲酶-波氏法測(cè)定飼料中尿素及無(wú)機(jī)氮類物質(zhì)的研究.pdf

1、隨著我國(guó)集約化養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模的擴(kuò)大，畜禽的存欄量迅速增長(zhǎng)，但與此同時(shí)也帶來(lái)了諸如畜禽糞便環(huán)境污染、動(dòng)物性食品安全、人畜爭(zhēng)糧等問(wèn)題，其中后者是限制畜禽養(yǎng)殖進(jìn)一步發(fā)展的主要瓶頸。據(jù)資料報(bào)道，我國(guó)2000年的蛋白質(zhì)飼料缺口為1190萬(wàn)噸，相當(dāng)于3216萬(wàn)噸餅粕或1.7萬(wàn)噸谷物的蛋白含量，這一趨勢(shì)近年來(lái)還在發(fā)展。而要解決這一問(wèn)題，一方面要大力推廣草食家畜(禽)的養(yǎng)殖，另一方面也要加大開(kāi)發(fā)其他蛋白類飼料的力度。當(dāng)前國(guó)內(nèi)已經(jīng)有企業(yè)開(kāi)始生產(chǎn)混有非蛋白氮物

2、質(zhì)的反芻動(dòng)物專用飼料，這些飼料一方面能夠以其低價(jià)格優(yōu)勢(shì)在市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中贏得客戶，另一方面也降低了養(yǎng)殖行業(yè)對(duì)于蛋白質(zhì)類飼料的依賴程度。不過(guò)目前國(guó)內(nèi)并沒(méi)有很好地建立起非蛋白氮飼料生產(chǎn)的監(jiān)管體系，導(dǎo)致目前市場(chǎng)上產(chǎn)品類型眾多、產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，還有一些生產(chǎn)廠家沒(méi)有對(duì)產(chǎn)品應(yīng)用做出詳細(xì)說(shuō)明致使在生產(chǎn)中出現(xiàn)了很多誤用、濫用的情況。
　　 尿素及硫酸銨等無(wú)機(jī)氮類物質(zhì)常被用來(lái)添加入反芻動(dòng)物等的飼料中作為蛋白質(zhì)補(bǔ)充料使用，一方面可以發(fā)揮反芻動(dòng)物利用非蛋

3、白氮類物質(zhì)的優(yōu)勢(shì)，另一方面能夠節(jié)約飼料成本。但也有一些不法廠商通過(guò)將此類物質(zhì)添加到魚(yú)粉等飼料原料或不能夠利用此類物質(zhì)的單胃動(dòng)物飼料中來(lái)替代其中的一些蛋白質(zhì)飼料，降低生產(chǎn)成本，以獲取不正當(dāng)利益。
　　 目前，有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)此類物質(zhì)的檢測(cè)主要是針對(duì)尿素，例如ISO66541991(E)和AOAC的動(dòng)物飼料中尿素含量的測(cè)定方法以及國(guó)家水產(chǎn)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心制定的魚(yú)粉中摻加尿素含量的測(cè)定(GB/T19164-2003)等國(guó)際國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)。這些標(biāo)準(zhǔn)

4、中都一致推薦使用對(duì)二甲基苯甲醛法作為飼料中尿素含量檢測(cè)的首選方法，不過(guò)從查閱到的資料中發(fā)現(xiàn)，該方法應(yīng)用的并不是很多，且文章中報(bào)道的內(nèi)容大多數(shù)是對(duì)這些標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的延伸。從各標(biāo)準(zhǔn)及文章中關(guān)于該方法的描述來(lái)看，該方法的特異性較差且提供的樣品前處理過(guò)程復(fù)雜。這或許是限制該方法在生產(chǎn)中應(yīng)用的一個(gè)主要原因。
　　 本研究通過(guò)將廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域的脲酶-波氏比色法進(jìn)行適當(dāng)改良，使其能夠適用于分別測(cè)定飼料中的尿素和其他無(wú)機(jī)氮類物質(zhì)的含量

5、。試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法在實(shí)際飼料樣品測(cè)定中表現(xiàn)出了較好的效果，具有簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、靈敏、特異等優(yōu)點(diǎn)。該反應(yīng)體系測(cè)定飼料樣品中尿素及其他無(wú)機(jī)氮類物質(zhì)含量時(shí)，反應(yīng)溶液中含氮量的最佳線性濃度范圍為0～40μg、方法的最低檢測(cè)限為0.095μgN，樣品中尿素最低檢測(cè)濃度為0.41mg/kg；反應(yīng)中飼料樣品的處理采用加水、酶解、離心的方式進(jìn)行；在實(shí)際飼料樣品的測(cè)定中該方法表現(xiàn)出了具有良好的準(zhǔn)確性、精密性和重復(fù)性，不同尿素濃度下，各樣品間的添加回收率均