高效液相色譜法測定飼料中甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑的方法研究.pdf

1、硝基咪唑類(nitriodazoles)藥物是一類具有5-硝基咪唑環(huán)結(jié)構(gòu)的藥物，主要用于預防和治療家禽的滴蟲病、豬的出血性下痢及厭氧菌感染，并可在畜禽飼料中添加作促生長用。獸醫(yī)臨床常用甲硝唑（metronidazole，MNZ）、地美硝唑(dimetridazole，DMZ)和異丙硝唑(ipronidazole，IPZ)等。但該類藥物具有潛在的致癌、致畸、致突變作用，動物組織殘留嚴重威脅食品安全。歐盟、美國等已相繼禁止硝基咪唑類藥物用作

2、飼料添加劑，且規(guī)定可食性動物組織中不得檢出該類藥物。我國也規(guī)定禁止在所有食品動物中以促生長為目的使用甲硝唑、地美硝唑及其鹽、酯及制劑。因此，在飼料、獸藥殘留監(jiān)控實踐中，尋求簡便、快速、準確的硝基咪唑類藥物檢測方法十分必要。高效液相色譜(HPLC)法仍是最實用、最簡便的方法。文獻報道的該類藥物HPLC檢測方法中，存在諸如僅針對單一藥物測定、采用含氯有機溶劑提?。ǘ拘源螅?、檢測限過高很難滿足檢測要求等不足。本文籍全國飼料標準化技術(shù)委員會農(nóng)業(yè)

3、行業(yè)標準制定項目資助，篩選、優(yōu)化并確定了一種簡單、快捷、重現(xiàn)性好，能同時測定飼料中甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑的HPLC方法。具體研究內(nèi)容如下:
　　1.色譜條件及樣品前處理方法確定優(yōu)化并確定了樣品前處理條件，包括樣品的提取條件和凈化條件;優(yōu)化并確定了色譜條件。飼料樣品前處理方法如下:選用乙酸乙酯提取，提取液于35℃水浴中氮吹濃縮至近干后，經(jīng)正己烷液液分配溶解于0.1 mol/L磷酸溶液中，經(jīng)MCX固相萃取柱凈化，過0.22μm濾膜

4、;HPLC測定飼料中甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑的色譜條件為:ZORBAX SB-C18柱(4.6×250 mm，5μm)，甲醇-水梯度洗脫，波長320 nm，柱溫30℃，流速0.8 mL/min。
　　2.分析方法驗證考察了上述所建方法的專屬性、線性、靈敏度、準確度和精密度等。結(jié)果顯示:該方法專屬性符合要求;甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑在兩種飼料中添加濃度0.02～10.0 mg/kg范圍內(nèi)線性良好;三種藥物在兩種飼料中檢測限均為0