多花相思離體培養(yǎng)與再生體系的建立.pdf

1、多花相思（Acaciafloribunda（Vent．）Willd．）自然分布于澳大利亞昆士蘭、新南威士和維多利亞等州，適應(yīng)性較強，有較高的觀賞價值。本論文以自然狀態(tài)下多花相思的種子為基本材料，從無菌體系的建立、繼代培養(yǎng)、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽等各個環(huán)節(jié)展開多花相思無菌體系的建立及快繁技術(shù)的研究；同時以多花相思種子苗下胚軸以上部分為材料，進行愈傷組織的誘導(dǎo)，并從愈傷組織分化出苗。主要研究結(jié)果如下： 1．多花相思無菌體系的建立。采用1

2、．84g／mL濃硫酸處理種子10min效果最好，發(fā)芽率可達90％。然后用75％酒精浸泡10s，0．1％升汞浸泡15min，無菌水沖洗7遍，可以使污染率控制在3％，最后接種到MS培養(yǎng)基中，生長狀況良好。 2．采用正交試驗設(shè)計，考慮不同植物生長調(diào)節(jié)劑對多花相思小苗增殖的影響，篩選出最佳一代培養(yǎng)基為MS+KT0．4mg／L+IBA0．5mg/L+BA0．5mg／L+蔗糖30g／L，30d后增殖數(shù)可以達到2．914；最佳二次繼代培養(yǎng)基為

3、MS培養(yǎng)基+KT0．3mg／L+BA1．0mg／L+IBA1．5mg／L+AC1．2g／L+蔗糖30g／L；30d后增殖數(shù)可以達到4．179；最佳三次及多次繼代培養(yǎng)基為MS+BA0．2mg／L+IBA0．3mg/L+蔗糖20g/L。30d后增殖數(shù)可以達到3．309。 3．多花相思小苗生根誘導(dǎo)。采用正交試驗設(shè)計，考慮不同種類和濃度生長素對多花相思小苗生根的影響，篩選出最佳生根培養(yǎng)基為MS+IBA0．3mg/L+IAA0．1mg/L

4、+蔗糖30g/L。 4．多花相思組培苗的煉苗和移栽。實驗結(jié)果表明：黃心土：泥炭土=2：1的效果最好，成活率達到85．5％。 5．多花相思愈傷組織體系的建立。以多花相思種子苗下胚軸以上部分為愈傷組織誘導(dǎo)材料，篩選出愈傷組織的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+BA1．0mg／L+KT0．6mg／L+IBA0．6mg/L+蔗糖30g/L。愈傷組織的最佳繼代培養(yǎng)基為MS+BA1．0mg／L+KT1．0mg／L+IBA0．6mg／L+蔗糖30

5、g／L。當(dāng)光照強度為1200Lx時，愈傷組織長勢最好。 6．多花相思愈傷組織培養(yǎng)再生植株。以多次繼代的愈傷組織為基本材料，在MS+TDZ0．01mg／L+NAA0．2mg/L+蔗糖30g/L培養(yǎng)基中，可使愈傷組織分化率達到89％，將分化愈傷組織轉(zhuǎn)接在MS+TDZ0．01mg／L+NAA0．2mg／L+蔗糖30g／L培養(yǎng)基上，再生率為98％。在1／2MS十mA0．5mg／L+NAA0．1mg／L+AC1．2g/L+20g／L蔗糖培