油桐和油茶離體器官再生體系的建立.pdf

1、油桐（Vernicia fordii）和油茶（Camellia oleifera）都是我國南方特有的木本油料樹種，具有重要的經(jīng)濟價值。油桐是重要的工業(yè)油料樹種，桐油是制造油漆、油墨和生物柴油的優(yōu)質(zhì)原料。油茶是優(yōu)質(zhì)的木本食用油料樹種，茶油的不飽和脂肪酸含量達到90％以上，具有抗氧化、清除自由基和預(yù)防心腦血管疾病等功效，是一種公認的優(yōu)質(zhì)健康食用油。油桐、油茶與核桃、烏桕并稱為中國四大木本油料樹種。本研究以油桐無菌苗的葉柄和下胚軸、油茶無菌苗

2、的子葉和下胚軸為材料誘導(dǎo)出不定芽，再進行不定芽的增殖培養(yǎng)、伸長培養(yǎng)、生根培養(yǎng)及煉苗移栽建立了再生體系，為以后油桐和油茶的遺傳轉(zhuǎn)化奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.油桐種胚的最佳消毒方法為0.1％的升汞溶液浸泡8 min，接種于1/2MS+1.0 mg/L GA3的培養(yǎng)基上，萌發(fā)率為85.42％。以油桐無菌苗葉柄為外植體，直接誘導(dǎo)不定芽的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+3.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L IAA，誘導(dǎo)率為91

3、.67％;最佳繼代增殖培養(yǎng)基為1/2MS+3.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L IBA+1.0 mg/LGA3，增殖系數(shù)為4.89;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.05 mg/L IBA，生根率為96.18％;煉苗移栽到泥炭土∶珍珠巖∶黃土=2∶1∶1的基質(zhì)中，成活率為93.33％。
　　2.以油桐無菌苗下胚軸為外植體，愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為WPM+5.0mg/L6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L NA

4、A，誘導(dǎo)率為100％;愈傷組織分化不定芽的最佳培養(yǎng)基為WPM+1.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L NAA+2.0 mg/L GA3，誘導(dǎo)率為82.46％;最佳增殖培養(yǎng)基為WPM+2.0 mg/L KT+0.05 mg/L IAA+2.0 mg/L GA3，增殖系數(shù)為6.8;最佳伸長培養(yǎng)基為WPM+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L GA3;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.1 mg/L IBA，生根率為97.12％;練苗

5、移栽到泥炭土∶珍珠巖∶黃土=2∶1∶1，成活率為91.67％。
　　3.油茶種胚的最佳消毒方法為先用75％的酒精浸泡30s，無菌水沖洗5次，再用0.1％升汞處理6min，接種到1/2MS基本培養(yǎng)基中，萌發(fā)率為81.11％。以無菌苗子葉和下胚軸為外植體誘導(dǎo)不定芽，最佳不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基分別為1/2MS+3.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L IAA+2.0 mg/L GA3和1/2MS+3.0 mg/L6-BA+0.05 mg/

6、L IAA+0.05 mg/L NAA+2.0 mg/L GA3，誘導(dǎo)率分別為87.28％和83.35％;最佳增殖培養(yǎng)基均為1/2MS+2.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L IBA+1.0 mg/LGA3，增殖系數(shù)分別為7.0和7.4;最佳伸長培養(yǎng)基為WPM+0.5 mg/L NAA+5.0mg/L GA3;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+1.0 mg/L IBA+2.0 mg/L NAA+35 g/L珍珠巖，生根率為91.02％;