高羊茅離體再生體系的建立和遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、Y796723分類(lèi)號(hào)：——密級(jí)：——單位代碼：!Q鯉Z學(xué)號(hào)：2QQ22428西北大學(xué)碩士學(xué)位論文作者：高亙美指導(dǎo)教師盆王勤專(zhuān)業(yè)技術(shù)職務(wù)塾撞學(xué)科(專(zhuān)業(yè))墊照生塑堂答辯日期20056學(xué)位授予日期二零零五年五月高羊茅離體再生體系的建立和遺傳轉(zhuǎn)化研究摘要近年來(lái)，照著人們對(duì)生活環(huán)境的日益關(guān)注，草坪業(yè)已作為一支新興產(chǎn)業(yè)麗悄然興起。草地早熟禾、葦狀羊茅、匍匐翦股穎、多年生黑麥草、一年生黑麥草、狗牙根、日本結(jié)縷草、紫羊茅等多種草坪草相繼在我國(guó)西北、東北

2、及西南等地大量引進(jìn)種植，主要應(yīng)用于城市綠化、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)地的建~墁或甩作牧草?，F(xiàn)代生物技術(shù)在近20多年里取得了飛速的發(fā)展，并被廣泛用于包括草坪草在內(nèi)的植物品種改良和人工培養(yǎng)。目前草坪草病害發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重，已成為影響草坪草質(zhì)量的一個(gè)重要因素；這些病害大多由真菌；l起。主要包括銹病、葉斑病、黑斑病等。通過(guò)基因工程技術(shù)將具有抗逆、抗病、抗蟲(chóng)等功能的基因有目的、有針對(duì)性地導(dǎo)入草坪草愈傷組織或原生質(zhì)體，可以獲得改良的轉(zhuǎn)基因植株，是提高草坪草抗逆、抗病和

3、抗蟲(chóng)性的有效途徑，已經(jīng)成為草坪學(xué)研究領(lǐng)域的前沿。高羊茅(Festucaarundinacea)，又稱(chēng)葦狀羊茅，具有抗干旱、耐瘠薄、抗病性強(qiáng)、適應(yīng)性廣等特點(diǎn)，不僅是一種優(yōu)良的草坪草種，還是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高的多年生冷季型禾本科牧草。但是，隨著其種植年代的延長(zhǎng)和種植面積的擴(kuò)大，高羊茅所具有的許片粗糙、夏季生長(zhǎng)緩慢，易遭雜草侵害、沒(méi)有匍訇莖等缺點(diǎn)越來(lái)越迫切地需要通過(guò)使用現(xiàn)代生物技術(shù)手段進(jìn)行改良。本研究以頌歌商羊茅成熟種子為材料，滅菌后接種于含不

4、同濃度24D(2，4二氯苯氧乙酸)的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，分析了240濃度對(duì)出愈時(shí)間、出愈率以及胚性愈傷組織形成的影響，發(fā)現(xiàn)90mejL2，4D效果最佳，愈傷組織的誘導(dǎo)率可達(dá)6863％，胚性愈傷組織的發(fā)生率為980％。將生長(zhǎng)狀態(tài)較好的胚性愈傷組織接種到含不同濃度KT(激動(dòng)素)的MS培養(yǎng)基上，進(jìn)行叢生芽和根的分化，最終再生出粗壯的綠色植株。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，在含02mULKT的MS培養(yǎng)基中，分化效果最好，分化頻率可達(dá)到4583％。同