油(木奈)離體再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化的初步研究.pdf

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文油（木奈）離體再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化的初步研究姓名：宋剛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：果樹學(xué)指導(dǎo)教師：林順權(quán)呂柳新2001.5.1福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文一況有所差異。最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS100ragL“6BAI0ragL‘IAA，子葉縱切片(表面刻傷)和子葉橫切片(靠近子葉柄，表面刻傷)的再生芽頻率分別達60O％和633％，平均再生芽數(shù)分別達321和302。上胚軸橫切段(順插于培養(yǎng)基)和上胚軸縱切片(切面朝下放置)的

2、再生芽頻率分別達763％和527％，平均再生芽數(shù)分別達152和314。4發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化油櫬誘導(dǎo)毛狀根發(fā)根農(nóng)桿菌M菌株和R1601菌株對莖段的致根能力強于R1000和A菌株。莖節(jié)基段作為轉(zhuǎn)化受體遠優(yōu)于莖節(jié)上段、莖節(jié)中段或整株。M和R1601菌株以直接接種法侵染莖節(jié)基段，莖節(jié)基段順插于培養(yǎng)基時，毛狀根的誘導(dǎo)率達574％和583％，平均毛狀根數(shù)達329和271；莖節(jié)基段倒插于培養(yǎng)基時，毛狀根的誘導(dǎo)率達556％和625％，平均毛狀根數(shù)達3o

3、o和253。M和R1601菌株以共感染法侵染莖節(jié)基段，毛狀根的誘導(dǎo)率達196％和178％，平均毛狀根數(shù)達320和294。本研究中由油椽誘導(dǎo)出的毛狀根未充分表現(xiàn)出典型的毛狀根特征，且毛狀根未能進一步發(fā)生分化。5根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)ACO基因轉(zhuǎn)化油櫬pBIFI和pBl08經(jīng)雙酶切和PCR擴增，證明了ACO基因分別已以正向和反向的方式克隆到了中間表達載體pBll21上。經(jīng)PCR鑒定pBl08和pBIFl也已經(jīng)整合到受體菌LBA4404、EHAl05