煙粉虱田間種群抗藥性監(jiān)測及BtGluCla1基因組結(jié)構(gòu)的分析.pdf

1、煙粉虱（Bemisia tabaci）已經(jīng)成為世界性的重要害蟲，在棉花和蔬菜生產(chǎn)上造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。煙粉虱的田間藥劑防治已非常困難，為了明確我國東南沿海地區(qū)煙粉虱田間種群的抗藥性概況并篩選有效藥劑，對江蘇、廣東和福建的煙粉虱種群進(jìn)行了抗性監(jiān)測。阿維菌素是防治煙粉虱最高效的藥劑之一，昆蟲谷氨酸受體是阿維菌素的主要作用靶標(biāo)。因此，本研究克隆了煙粉虱谷氨酸受體的全長cDNA，并對其基因組結(jié)構(gòu)和RNA可變剪接進(jìn)行了分析。
　　 1.

2、煙粉虱田間種群抗藥性監(jiān)測
　　 為了明確我國東南沿海地區(qū)煙粉虱田間種群抗藥性發(fā)展的現(xiàn)狀，對采自江蘇、廣東和福建省10個(gè)田間種群進(jìn)行了抗藥性監(jiān)測。監(jiān)測藥劑包括吡蟲啉、噻蟲嗪、阿維菌素、氟蟲腈、多殺菌素、毒死蜱和高效氯氰菊酯。以室內(nèi)飼養(yǎng)的B型煙粉虱NJ-S作為對照，江蘇、廣東和福建的煙粉虱種群均對新煙堿類殺蟲劑產(chǎn)生了中高水平的抗性，其中江蘇鹽城種群對吡蟲啉和噻蟲嗪的抗性均超過1000倍；除江蘇鹽城種群對氟蟲腈具有中等抗性水平（25倍

3、），其他所有檢測的田間種群對氟蟲腈、阿維菌素、多殺菌素、毒死蜱和高效氯氰菊酯均為敏感性下降至低水平抗性（<10倍）。以SUD-S敏感品系作為對照，所有檢測的田間種群對毒死蜱和高效氯氰菊酯都具有中高水平的抗性。
　　 2.煙粉虱谷氨酸受體BtGluCla1基因組結(jié)構(gòu)及可變剪接
　　 昆蟲谷氨酸受體門控氯離子通道是阿維菌素的主要作用靶標(biāo)。本文在前期工作的基礎(chǔ)上，根據(jù)煙粉虱谷氨酸受體BtGluCla1基因的cDNA全長序列，擴(kuò)

4、增獲得其基因組DNA全長（30 kb）。BtGluCla1基因的編碼區(qū)被10個(gè)內(nèi)含子分隔，最短的是第四個(gè)內(nèi)含子（475 bp），最長的是第三個(gè)內(nèi)含子（5.8 kb）。對10個(gè)cDNA全長進(jìn)行克隆和測序，獲得了5個(gè)不同的轉(zhuǎn)錄本。通過對不同轉(zhuǎn)錄本cDNA序列和基因組DNA序列進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn)BtGluCla1基因在第二、第九和第十個(gè)外顯子處存在可變剪接。煙粉虱BtGluCla1通過可變剪接增加了其表達(dá)產(chǎn)物的多樣性和復(fù)雜性，該研究結(jié)果對于研究煙