DNA甲基化在荷葉鐵線蕨性器官分化及體細胞胚胎發(fā)生中的作用.pdf

1、研究發(fā)現(xiàn)適量、適時的外源鈣處理可促進荷葉鐵線蕨配子體雌性性器官的分化及頸卵器數(shù)量的增多，透射電鏡觀測結果顯示，經外源鈣處理后的配子體胞內鈣離子含量明顯高于未經外源鈣處理的配子體，鈣離子主要分布于細胞膜邊緣，這表明外源鈣在配子體性器官形成和分化中起到了促進和調節(jié)作用。研究中還發(fā)現(xiàn)，經外源鈣處理的配子體的部分后代可以產生多孢子體，它們即可通過不同位置的葉緣細胞進行無配子生殖形成單倍的孢子體，同時又可以在性器官形成區(qū)，通過有性生殖形成二倍的孢

2、子體，而其體細胞胚形成及發(fā)育都處于生殖隔離狀態(tài)。
　　 在基因水平上，運用MSAP技術，探討DNA甲基化在荷葉鐵線蕨配子體性器官分化及無配子生殖的胚胎發(fā)育中的作用。MSAP分析結果顯示，荷葉鐵線蕨基因組中約有26-30％的CCGG位點發(fā)生了胞嘧啶甲基化。1）經外源鈣處理的同源配子體所形成的無性器官分化、有性器官形成與經外源鈣處理后可產生多頸卵器的配子體:配子體性器官形成前后及多性器官形成時，甲基化比例均呈上升的趨勢，在多性器官形

3、成時達到最高，甲基化率與性器官數(shù)量呈明顯線性相關，這與HPLC分析結果一致。產生多性器官的配子體其基因組超甲基化率與去甲基化率均明顯增高?；厥詹町悧l帶中與鈣離子信號傳導相關的WAK及WRKY轉錄因子同源性較高的較多。2）無配子生殖產生多孢子體的胚胎發(fā)育過程中，無胚組織時DNA總甲基為19.2％，胚性細胞團時DNA總甲基化水平下調至17.9％，胚芽時DNA總甲基化水平上調至20.1％，芽點時又下調至19.5％。超甲基化率最高的階段是無胚組