口蹄疫滅活疫苗中VP1基因分析方法的建立及應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、應(yīng)用口蹄疫滅活疫苗中加入酒精凍融離心破乳純化抗原技術(shù)，對口蹄疫白油乳化滅活疫苗病毒中的RNA進行提取，并與提取的制苗病毒、二乙烯亞胺滅活病毒的RNA，就VP1基因進行了逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)擴增、核酸序列測定，利用DNAStar軟件包中的SepMan程序進行序列拼接，將所得序列進行同源性比較分析，結(jié)果顯示3種來源的VP1基因片段長度均為639bp，與預(yù)期目標相符，核苷酸序列顯示，3種方法處理的病毒VP1同源性為100％，說明滅活劑BEI和

2、乳化工藝沒有全部破壞口蹄疫病毒VP1基因核酸。由此，建立了一種檢測、分析口蹄疫滅活疫苗毒株VP1基因的核酸序列的新方法。 通過以上建立的方法，對國內(nèi)三個不同廠家的口蹄疫滅活疫苗中的VP1基因與國內(nèi)外口蹄疫病毒參考序列進行同源性、差異性比較分析，繪出遺傳發(fā)育樹圖譜。結(jié)果顯示，有2個廠家疫苗0型病毒株為泛亞拓撲型，1個廠家為古典中國拓撲型。2個泛亞拓撲型疫苗株之間的同源性為96.2％，他們與國際上流行毒株O/LY/2000、O/MO

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