棉花葉斑病病原真菌鑒定及室內(nèi)藥劑篩選.pdf

1、葉斑病是葉組織受局部侵染，導(dǎo)致各種形狀斑點(diǎn)病的總稱，是經(jīng)病原物侵害后主要在葉片上發(fā)生的各種局部壞死性病斑。葉斑病是近年棉花生產(chǎn)栽培中發(fā)生較嚴(yán)重的一種病害，主要侵染植物的葉片，初期在葉片上形成淺褐色水漬狀斑點(diǎn)，稍后斑點(diǎn)變褐，后期病斑淺灰色或灰白色，葉片變黃卷曲，提前脫落，從而引起棉花產(chǎn)量及質(zhì)量的下降。國內(nèi)對(duì)棉花葉斑病的發(fā)病癥狀僅有過記載，還沒有相關(guān)的系統(tǒng)研究。本研究本文對(duì)引起葉斑病的病原真菌的種類及其生物學(xué)特性和致病性進(jìn)行了研究，以及防治

2、藥劑的篩選，從而為棉花的抗葉斑病育種及病害的防治提供理論依據(jù)。
　　 本研究于2008年5月至2008年8月從江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所和大豐市植物保護(hù)植物檢疫站的棉花試驗(yàn)田里采集典型病樣，根據(jù)柯赫氏法則進(jìn)行病原真菌分離鑒定，并進(jìn)行了室內(nèi)藥劑篩選。結(jié)果如下：
　　 1．從病葉上分離、純化獲得的117個(gè)真菌菌株進(jìn)行致病性鑒定，其中26株可引起棉花葉斑病。對(duì)這26株真菌進(jìn)行了菌種鑒定包括形態(tài)學(xué)鑒定和分子鑒定。
　　

3、 通過對(duì)生長(zhǎng)量的測(cè)定，菌落形態(tài)，分生孢子和分生孢子梗等形態(tài)學(xué)觀察進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定；通過PCR 擴(kuò)增真菌核糖體基因轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）序列并測(cè)序，并將序列在GenBank 上進(jìn)行同源性比對(duì)(BLAST）和構(gòu)建系統(tǒng)系統(tǒng)發(fā)育樹等方法進(jìn)行分子鑒定，鑒定出這26株真菌分屬鏈格孢屬(Alternaria)、鐮孢屬(Fusarium)、黑孢屬(Nigrospora)、刺盤孢屬(Colletotrichum)、匍柄霉屬（(StempHylium)等5個(gè)

4、屬。其中鏈格孢屬的菌株有14個(gè)，占總數(shù)的54％，其余4個(gè)屬的菌株數(shù)目少，分別僅占總數(shù)的7.7％-15.4％。
　　 2．對(duì)上述5個(gè)屬的26個(gè)菌株進(jìn)行致病性試驗(yàn)，對(duì)各個(gè)屬真菌的侵染癥狀特點(diǎn)進(jìn)行詳細(xì)的觀察和記錄。根據(jù)科赫氏法則從接種發(fā)病植株葉片上分離病菌，其形態(tài)特征與從自然發(fā)病植株上分離的相同，證實(shí)這些菌株就是棉花葉斑病的致病菌，其中鏈格孢屬是棉花葉斑病的主要致病菌屬3．室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)研究表明，25％丙環(huán)唑乳油、10％世高可濕性粉