稻瘟菌一個菌落生長緩慢突變體的研究.pdf

1、由稻瘟病菌(Magnaporthegrisea,無性世代為Pyricularia oryzae)引起的稻瘟病是水稻上危害最為嚴重的真菌病害之一,每年都給水稻生產帶來重大的經濟損失.稻瘟菌作為一種模式病原真菌,對其生物學及分子生物學方面都得到了廣泛深入的研究.稻瘟菌致病分子機制的研究不僅為病害的防治提供理論基礎,也為其原真菌的研究提供借鑒作用.該研究從稻瘟病菌野生型菌株P131的REMI轉化體庫中篩選并獲得的一個菌落生長緩慢型突變體K13

2、04,通過遺傳雜交分析,確定其表型的改變是由于外源質粒pUCATPH的插入引起的,該研究對突變體K1304的一些生物學性狀與野生型菌株P131進行了比較,結果發(fā)現K1304的菌落生長速度為P131的60﹪,其產孢量為P131的1/3.突變體K1304的在洋蔥皮上的萌發(fā)、附著胞形成、侵染釘的產生以及侵染性菌絲的擴展均要滯后于野生型菌株P131,但最終形成的比率基本一致,因此,二者對水稻致病性差異不明顯.為了進一步克隆稻瘟菌菌落生長相關基因

3、,以插入質粒pUCATPH為探針,對K1304進行基因組Southern blot,表明該質粒在突變體K1304中為一個位點兩個拷貝串聯(lián)重復插入,通過質粒外的酶HindⅢ拯救得到質粒KH3,將拯救的側翼序列與已公布的稻瘟菌基因組全序列進行比較,經分析質粒插入在contig2.288上的6604位點,用包含該插入位點的基因構建互補載體,進行互補驗證,并未恢復該基因的功能.根據Southern blot及該contig上的酶切位點分析,可能