正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選維藥老鼠瓜生物堿提取工藝的研究

1、<p>　　正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選維藥老鼠瓜生物堿提取工藝的研究</p><p>　　作者：美麗萬(wàn)&#12539;阿不都熱依木，張曉玲 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 老鼠瓜；,,總生物堿；,,提取工藝</p><p>　　摘要：目的優(yōu)選老鼠瓜中總生物堿的提取工藝。方法以總生物堿的得率為指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)的方法考察離子交換樹(shù)脂的上樣液濃度、 pH值、流

2、速對(duì)總生物堿提取率的影響。結(jié)果最佳提取工藝為A1B1C1，即上樣液濃度為2.589 μg/ml，pH值為2.5，流速為1 ml/min。結(jié)論 優(yōu)選得到的工藝使生物堿的提取效率高，穩(wěn)定性好。 </p><p>　　關(guān)鍵詞：老鼠瓜； 總生物堿； 提取工藝</p><p>　　Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction process for

3、 alkaloids in Capparis spinosa.MethodsThe extraction process was optimized by the orthogonal design．ResultsThe optimum extraction condition was A1B1C1 ,that is，the concentration of the sample solution was 2.589 μg/ml w

4、ith pH 2.5;the flow rate was 1ml/min.ConclusionThe optimized process is stable and highly efficient.</p><p>　　Key words：Capparis spinosa; Alkaloids; Extraction Technology</p><p>　　老鼠瓜Cappari

5、s spinosa L.又名刺山柑、槌果藤、野西瓜，是白花菜科植物刺山柑的果實(shí)。老鼠瓜在維吾爾醫(yī)藥中應(yīng)用歷史悠久，臨床用于痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脾胃寒痛、浮腫等疾病的治療，療效顯著。維吾爾醫(yī)學(xué)認(rèn)為，該藥具有清除體內(nèi)異常粘液、消腫止痛、祛風(fēng)、散寒、除濕、暢通阻滯等功效，還具有舒張血管和止血作用，抑制布氏桿菌和結(jié)核菌的作用［1，2］。在老鼠瓜中主要有黃酮類(lèi)、生物堿類(lèi)、萜類(lèi)、糖類(lèi)、脂肪酸類(lèi)等成分。目前尚無(wú)對(duì)生物堿進(jìn)行系統(tǒng)研究的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用正

6、交實(shí)驗(yàn)法篩選了用陽(yáng)離子交換樹(shù)脂提取總生物堿的最佳工藝條件。</p><p><b>　　1 儀器與材料 </b></p><p>　　Shimadzu UV2550型紫外分光光度計(jì)（島津公司），pHB3型精密數(shù)顯酸度計(jì)，F(xiàn)A2004N型電子分析天平。732型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂（上海三浦化工儀器有限公司）。磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、溴麝香草酚藍(lán),氯仿、濃鹽酸，以上試劑均

7、為分析純，水蘇堿（自制，純度&gt;98%）。所用藥材經(jīng)鑒定為白花菜科植物老鼠瓜Capparis spinosa L.的干燥果實(shí)。</p><p><b>　　2 方法與結(jié)果</b></p><p>　　2.1 緩沖溶液的配制</p><p>　　2.1.1 pH=7.6緩沖液取0.1 mol/L磷酸二氫鉀溶液100 ml,加

8、0.1 mol/L氫氧化鈉溶液84.4 ml,蒸餾水15.2 ml ,混勻用pH B3型酸度計(jì)校正pH為7.6。</p><p>　　2.1.2 2×44mol/L溴麝香草酚藍(lán)pH 7.6緩沖液稱(chēng)取溴麝香草酚藍(lán)0.025 g溶于上述200 ml pH 7.6的緩沖液中。</p><p>　　2.2 對(duì)照品溶液的制備用微量天平稱(chēng)取水蘇堿10.00 g，用甲醇定容在10 ml

9、容量瓶中，即配成1 mg/ml的溶液。</p><p>　　2.3 線性關(guān)系的考察 用微量進(jìn)樣器取5，10，20，30，40，60，80 μl溶液，分別置分液漏斗中，加溴麝香草酚藍(lán)pH 7.6的緩沖液6.00 ml，氯仿6.00 ml，劇烈振動(dòng)2 min，靜置2 h，分取下層液（黃色）備用，以未加水蘇堿試管為空白，進(jìn)行掃描，在429 nm處有最大吸收，于429 nm處，測(cè)吸收度值得標(biāo)準(zhǔn)曲線。可得水蘇堿

10、線性范圍為0~13 μg/ml,回歸方程Y=0.009 35X+0.003 312, r=0.999 8。</p><p>　　2.4 上樣液的制備 取1 kg老鼠瓜根（粉碎并過(guò)8目篩），用0.1%的鹽酸浸泡1夜，裝入滲漉筒中滲漉，稀釋至一定濃度，即制得上樣液。</p><p>　　2.5 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)篩選老鼠瓜總生物堿提取工藝</p><p>　　2.5.1

11、 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)［3,4］ 選用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)表，以總生物堿的得率為指標(biāo)，選取離子交換樹(shù)脂的上樣液濃度、 pH值、流速考察其對(duì)總生物堿提取率的影響。因素水平見(jiàn)表1。 </p><p>　　表1 因素水平（略）</p><p>　　2.5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)，結(jié)果與方差分析見(jiàn)表2～3。</p><p>　　表2 L9（34）正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）&l

12、t;/p><p>　　表3 方差分析（略）</p><p><b>　　*P＜0.01</b></p><p><b>　　3 討論</b></p><p>　　由表2可知，因素對(duì)指標(biāo)影響大小次序?yàn)锳→C→B，即上樣液濃度對(duì)吸附率影響最大，其次是流速與pH值，從而得出結(jié)論：各因素的最優(yōu)組合為A1B

13、1C1，即上樣液濃度為2.589 μg/ml, pH值為2.5，流速為1 ml/min。有表3可知，上樣液濃度與流速對(duì)生物堿的吸附率有顯著影響，而所選用pH值對(duì)生物堿的吸附率影響不大，即上樣液濃度與流速是生物堿吸附的關(guān)鍵因素。通過(guò)直觀分析及方差分析，最理想的工藝條件為A1B1C1，而所選用的pH值對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響不大。從節(jié)約時(shí)間考慮，在實(shí)際提取中，可以適當(dāng)增加流速。這一方法條件易于控制，操作過(guò)程簡(jiǎn)單，是一種比較理想的老鼠瓜生物堿提取方法。&

14、lt;/p><p><b>　　參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　?。?］ 新疆植物志編輯委員會(huì).新疆植物志，第2卷，第2分冊(cè)［M］.烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版社，1995：35.</p><p>　?。?］ 新疆生物土壤沙漠研究所. 新疆藥用植物志，第1冊(cè)［M］.烏魯木齊：新疆人民出版社，1977：74.</p><p