正交試驗(yàn)法優(yōu)選芪膠膏的水提取工藝研究

1、正交試驗(yàn)法優(yōu)選芪膠膏的水提取工藝研究張燕1，曹陽(yáng)2，黃彬2，向薇1，胡敏1，雷果平2，韓平1(1四川省南充市中心醫(yī)院，2四川省南充市食品藥品檢驗(yàn)所，四川南充637000)摘要摘要目的目的優(yōu)選芪膠膏中水提取的最佳工藝。方法方法以黃芪甲苷和水浸出物為考察指標(biāo)，采用高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測(cè)法，以正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選芪膠膏水提工藝。結(jié)果優(yōu)選的提取工藝為8倍水，煎煮3次，每次1小時(shí)。結(jié)論結(jié)論采用該工藝提取芪膠膏中黃芪甲苷、收率較高且穩(wěn)定。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞

2、正交設(shè)計(jì)正交設(shè)計(jì)；黃芪甲苷；高效液相色譜；黃芪甲苷；高效液相色譜蒸發(fā)光散射檢測(cè)法；芪膠膏蒸發(fā)光散射檢測(cè)法；芪膠膏Abatract:ObjectiveTooptimizethewaterextractiontechnologyofQijiaoGao.MethodsIndertoastragalosidewaterextractsasindexusingHPLCELSDmethodthethogonaldesignoptimizationo

3、fextractiontechnologyofQijiaoGao.ResultsTheoptimalwaterextractionprocessofQijiaoGaowasadding8tinesamountofwaterdecoctingfthreetimes1houreschtime.ConclusionAstragalosideinthewaterextractionofQijiaoGaoishighstablebythisest

4、ractionprocess.Keywds：thogonaldesignastragalosideHPLCELSDQijiaoGao1芪膠膏是我院何進(jìn)主任中醫(yī)師的一個(gè)經(jīng)驗(yàn)方，由黃芪、阿膠、當(dāng)歸等藥組成，具有補(bǔ)氣血，調(diào)陰陽(yáng)。用于氣短、乏力、神疲、面色淡白或萎黃、頭暈眼花、心悸、自汗、懶言、失眠、手足麻木、月經(jīng)延期、量少色淡或閉經(jīng)等癥，氣血兩虛、陰陽(yáng)失調(diào)慢性疲勞綜合征[1]。處方中含有皂苷、氨基酸類及黃酮類有效成分。君藥黃芪含有三萜皂苷、黃

5、酮類、多糖類、氨基酸和微量元素等多種成分，但其主要成分黃芪甲苷活性較強(qiáng)，易溶于水、甲醇、乙醇、丙醇[2]。在考證了水煮提取工藝合理性的基礎(chǔ)上，本文以黃芪甲苷含量及水浸出物為指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法設(shè)計(jì)篩選出芪膠膏的最佳工藝條件，報(bào)道如下。1、儀器與試藥1.1儀器電子天平：麥多利斯電子天平，CP225D型。高效液相色譜儀：Wates26952420。1.2試藥黃芪甲苷（中國(guó)藥品生物制品檢定所），甲醇、乙醇、正丁醇、氨試液均為分析純，乙腈為色譜

6、純，重蒸餾水。2、方法與結(jié)果2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用正交試驗(yàn)法，選取加水量，煎煮時(shí)間，煎煮次數(shù)為考察因素，并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，每個(gè)因素選擇了3個(gè)水平，用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)，以水浸出物、黃芪甲苷收率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，篩選最佳工藝條件（收膏率、黃芪甲苷權(quán)重系數(shù)分別為0.50.5）。因素水平見表1表1黃芪、黨參、枸杞等水提工藝正交試驗(yàn)因素水平水平A加水量倍B提取時(shí)間hC提取次數(shù)次1611281.52310232.2試驗(yàn)方法2.2.1樣品液的制備按芪膠

7、膏處方稱取適量的藥材，按正交表設(shè)計(jì)安排的方案加水煎煮，得煎液，濃縮至100mL，得樣品液。2.2.2水浸出物測(cè)定精密吸取樣品液20mL，照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XA項(xiàng)基金項(xiàng)目：四川省中醫(yī)藥管理局科技立項(xiàng)課題（201076）作者簡(jiǎn)介：張燕，學(xué)士，副主任中藥師，從事醫(yī)院中藥學(xué)工作，Tel:08172258694，Email:zhangyanyongdi@。通訊作者：曹陽(yáng)，學(xué)士，副主任中藥師，從事中藥檢驗(yàn)工作，Tel:1529820

8、6683Email:896377643@系。②精密度試驗(yàn)：精密吸取含量為同一對(duì)照品溶液10l，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果為6.04726.04756.04666.04726.04796.0455，黃芪甲苷峰峰面積的RSD為0.2%(n=6)，表明儀器精密度良好。③穩(wěn)定性試驗(yàn)：取4號(hào)試驗(yàn)的煎煮液，按供試品溶液的制備，分別在02481224h時(shí)進(jìn)樣10l，測(cè)定黃芪甲苷峰峰面積的對(duì)數(shù)值為6.27616.27616.27396.26016.26006.

9、2600黃芪甲苷峰峰面積的RSD為1.945%(n=6)，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。④重復(fù)性試驗(yàn)：取4號(hào)試驗(yàn)的煎煮液，按供試品溶液的制備6份，每份精密量取25mL，分別按供試品溶液制備方法制備溶液，進(jìn)樣量為10L，測(cè)定黃芪甲苷的收率。結(jié)果6份樣品中黃芪甲苷含量為0.077080.076680.075080.074930.074870.07559平均為0.0757mg?mL1RSD為1.95%（n=6），表明方法重復(fù)性較好。⑤加樣回收

10、試驗(yàn)：取4號(hào)試驗(yàn)的煎煮液6份，每份約25mL，精密稱定分置100mL三角瓶中，分別精密加入對(duì)照品(110781200613，中國(guó)藥品生物制品檢定所)適量，按供試品溶液制備方法制備溶液，進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見表3。表3黃芪甲苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=6）2.3試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選方法及結(jié)果見表4，方差分析結(jié)果見表5?？梢蕴崛〉淖罴压に嚍锳2B3C3，各因素對(duì)提取工藝的影響大小順序?yàn)镃AB，經(jīng)方差分析，提取時(shí)間對(duì)提取效果無(wú)顯著性影響，考慮到

11、降低成本、節(jié)能降耗、節(jié)省工時(shí)，將B3調(diào)為B1，由此得最佳提取工藝條件為A2B1C3，即8倍水，提取3次，每次1h。表4黃芪、黨參、枸杞等水提工藝正交試驗(yàn)結(jié)果供試品取樣量ml供試品含量mg加入量mg加入量與供試品含量總和的實(shí)際測(cè)定數(shù)mg回收率%251.88511.46831.433396.33251.88511.46831.417395.24251.88511.88781.857497.39251.88511.88781.9695103.

12、33251.88512.25492.3664104.11251.88512.25492.239098.46平均加樣回收率=99.14%RSD=3.7%NO.ABCD水浸出物%黃芪甲苷含量%綜合評(píng)分16倍1h1次128.39.6049.2826倍1.5h2次240.617.3177.5336倍2h3次345.818.9686.2048倍1h2次338.325.9791.058倍1.5h3次143.619.0184.0068倍2h1次235