天灸對lewis肺癌

1、<p>　申請代碼：C03050309</p><p>　受理部門：</p><p>　收件日期：</p><p>　受理編號：</p><p><b>　　國家自然科學基金</b></p><p><b>　　申 請 書</b></p><p&

2、gt;<b>　　資助類別：面上項目</b></p><p>　　亞類說明：自由申請項目</p><p><b>　　附注說明： </b></p><p>　　項目名稱：天灸對Lewis肺癌化療小鼠腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因表達及其免疫功能的影響</p><p>　　申 請 者：王勇

3、 電話： 053182614117 </p><p>　　依托單位：山東中醫(yī)藥大學 </p><p>　　通訊地址：濟南市經(jīng)十路53號 </p><p>　　郵政編碼：250014 單位電話：0531-2622196 </p><p>　　電子郵件：wangyong820318@yahoo.com </p>

4、<p>　　申報日期： 2006年5月20日</p><p>　　國家自然科學基金委員會</p><p>　　基本信息1YThcng7</p><p>　　項目組主要成員（注: 項目組主要成員不包括項目申請者，國家杰出青年科學基金類項目不填寫此欄。）</p><p>　　說明: 高級、中級、初級、博士后、博

5、士生、碩士生人員數(shù)由申請者負責填報（含申請者），總人數(shù)自動生成。</p><p>　　經(jīng)費申請表 （金額單位：萬元）</p><p><b>　　報告正文</b></p><p>　　（一）立項依據(jù)與研究內(nèi)容：</p><p>

6、;　　1、項目的立項依據(jù)（附主要的參考文獻目錄）：</p><p>　　肺癌的發(fā)病率在我國居常見腫瘤的前列，而且絕大多數(shù)肺癌患者就診時腫瘤 已達晚期，大部分病人失去了手術的機會。目前，化療是治療腫瘤的重要方法，約 70-80%的肺癌患者接受化療[1]?；煖p輕病情的同時也對正常組織細胞、臟器 的生理功能有一定程度的破壞作用,并抑制機體的免疫功能和骨髓造血功能等, 從而影響化療的繼續(xù)進行。因此,防治化療毒性反應是癌

7、癥治療的重要課題。</p><p>　　天灸是將具有刺激性的藥物貼敷在穴位上，使局部皮膚充血、發(fā)泡，甚至化 膿，有如灸瘡，故曰天灸。天灸通過刺激相應的腧穴或患處，調(diào)理臟腑，行氣活 血，調(diào)和陰陽，達到治療疾病目的的一種外治法。因為其可以引起皮膚局部起泡 所以也叫做“發(fā)泡灸”；相對于火灸、艾灸來講，因為不需要熱源，所以也叫做 “冷灸”；利用藥物本身對皮膚的刺激性就可以達到灸的效果，所以也叫做“自 灸”。天灸是傳統(tǒng)醫(yī)學

8、中較為獨特的外治法，有數(shù)千年的歷史，一直沿用至今， 現(xiàn)也稱為穴位藥物貼敷療法。它將中醫(yī)透皮給藥與經(jīng)絡穴位相結合，通過藥物刺 激經(jīng)絡、腧穴，對機體產(chǎn)生內(nèi)在的調(diào)節(jié)作用，從而達到治療疾病的目的?，F(xiàn)代研 究認為，天灸對皮膚產(chǎn)生刺激，擴張毛細血管，改善局部血液循環(huán)；刺激皮膚的 神經(jīng)感受器，通過神經(jīng)反射達到提高機體免疫力的作用。另一方面由于天灸集艾 灸、中藥于一體，可以使腧穴局部自動加熱有利于藥物的吸收，藥物的有效成份 經(jīng)皮膚表面的角質(zhì)層、毛囊皮脂

9、腺及汗管等滲透吸收進血液、淋巴液、內(nèi)分泌液 中，發(fā)揮一定的藥理作用。 </p><p>　　天灸療法越來越受到學者和專家們的重視，尤其是近十幾年來，在理論探討 和臨床應用等方面，均有突破性的創(chuàng)新，并開始用于疑難雜癥的治療。例如趙氏[2] 觀察天灸治療非感染性尿道綜合征，與西藥組比較，天灸組痊愈 13(40.6%)好轉(zhuǎn) 14(43.7%)無效 5(15.7%)總有效率 84.3%；對照組痊愈 2（6%）好轉(zhuǎn) 9(3

10、3%)無效 19(61%)總有效率 39%。兩組比較差異有顯著性（P<0.01）。說明天灸在治療 尿道綜合癥方面有明顯的優(yōu)勢。發(fā)泡療法用于治療慢性氣管炎[3]和支氣管哮喘[9]有大 量報導，還有用于三叉神經(jīng)痛[4]、過敏性鼻炎[5][6]、乳腺纖維囊腫[7]、腮腺炎、風濕性關 節(jié)炎、硬皮病[8]、肩周炎[10]、肱骨外上髁炎[11]、慢性乙型肝炎[12]、獲得性寒冷性蕁麻疹、 額竇炎、梅核氣、慢性潰瘍性結腸炎、強直性脊椎炎[13]

11、、胃脘痛[14]均獲得滿意的療效，臨床例證不勝枚舉。在基礎理論研究方面，據(jù)文獻報道，天灸可調(diào)節(jié)化療 大鼠下丘腦、垂體中β-內(nèi)啡肽（β-Ep）水平[15]，改善環(huán)磷酰胺大鼠的造血功能和 免疫功能，提高荷瘤小鼠的T淋巴細胞的應答能力和NK細胞[1</p><p>　　本研究選擇肺癌作為研究對象，一是因為肺癌是我國最常見的腫瘤之一，積極開展中西醫(yī)結合防治肺癌研究具有較大的現(xiàn)實意義；二是約 70-80%的肺癌患者接受化療

12、?；煖p輕病情的同時也對正常組織細胞、臟器的生理功能有一定程度的破壞作用,并抑制機體的免疫功能和骨髓造血功能等, 從而影響化療的繼續(xù)進行。因此,防治化療毒性反應是癌癥治療的重要課題，而天灸正是防治化療毒性反應的臨床和基礎行之有效的方法。本實驗通過研究移植性 Lewis肺癌小鼠經(jīng)天灸治療和順鉑化療后機體的免疫功能和腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的表達了解天灸在肺癌治療過程中的增效減毒作用.本實驗采用 MTT 法檢測 Lewis 肺癌化療小鼠脾臟 NK

13、細胞活性，采用放射免 疫分析法檢測 Lewis 肺癌化療小鼠外周血白細胞介素-2（IL-2）水平，研究天灸 對小鼠免疫功能的影響。此研究的意義在于為天灸在臨床治療肺癌過程中的增效減毒作用提供理論依據(jù)，為中西醫(yī)結合治療肺癌方面進行一些有益的嘗試。</p><p><b>　　參考文獻：</b></p><p>　　[1] 張小東譯;《腫瘤治療學》.人民衛(wèi)生出版社,200

14、1.4,421-428</p><p>　　[2]趙立巖,李南玲,天灸治療非感染性尿道綜合征 32 例臨床觀察,中國中西 醫(yī)結合雜志,2003，23(11):822. </p><p>　　[3] 左愛欣,三伏天灸治療慢性支氣管炎 150 例,河北中醫(yī),1997，19(2):37.</p><p>　　[4] 周念興,天灸療法治療三叉神經(jīng)痛臨床觀察,實用中醫(yī)內(nèi)科雜志

15、,1995， 9(2):34. </p><p>　　[5] 夏 翠 霞 , 三 伏 天 灸 治 療 過 敏 性 鼻 炎 360 例 , 遼 寧 中 醫(yī) 雜 志,1996,23(4):184. </p><p>　　[6] 史正耀,大蒜天灸治療過敏性鼻炎 120 例,陜西中醫(yī),1997，18(1):31.</p><p>　　[7] 汪慧敏,貼敷加天灸治療乳腺纖維囊

16、腫,浙江中醫(yī)雜志,1997，32(8):374. </p><p>　　[8] 劉玉環(huán),張仁尊,崔淑杰,天灸治療硬皮病,針灸臨床雜志,1997， 13(3):39-40. </p><p>　　[9] 王建新,天灸療法防治支氣管哮喘 72 例臨床小結,現(xiàn)代中醫(yī),1997， 10(3):161-163.</p><p>　　[10] 章進,太淵穴天灸方治療肩周炎 48

17、 例,中醫(yī)外治雜志,1998，7(6):14-15.</p><p>　　[11] 高素秋,天灸治療肱骨外上髁炎 100 例,江蘇中醫(yī),1999，20(6):39. </p><p>　　[12] 陳海英,林咸明,劉勇,天灸結合穴位注射治療慢性乙型肝炎療效與 HB， DNA 含量之間的關系,中國針灸,1999，19(12):729-730. </p><p>　　[

18、13] 楊平梅,天灸發(fā)泡法治療風濕痹癥,針刺研究,2000，25(2):151-152.</p><p>　　[14] 袁堅榮,劉炳權,天灸治療虛寒性胃痛 365 例臨床觀察,針灸臨床雜 志,2001，17(8):52. </p><p>　　[15] 孫德利,方劍喬,陳華德,天灸對環(huán)磷酰胺大鼠β-內(nèi)啡肽含量的影響,中國中醫(yī)藥科技,20018(5):279-280. </p>

19、<p>　　[16] 韓毳,李學武,劉震,天灸抗小鼠移植性腫瘤作用及對免疫功能的影響,天津中醫(yī),200118(5):30-31. [17] 孫德利,陳漢平,吳煥淦,天灸對小鼠造血功能的影響及其機理的探討,針 刺研究,1999，24(3):206-211.</p><p>　　2.項目的研究內(nèi)容、研究目標以及擬解決的關鍵問題。</p><p><b>　　2.1研究內(nèi)容

20、：</b></p><p>　　（1）天灸對 Lewis 肺癌化療小鼠的減毒作用。</p><p>　?。?）天灸對 Lewis 肺癌化療小鼠脾 NK 細胞活性及血清 IL-2 水平的研究。</p><p>　　（3）天灸對 Lewis 肺癌化療小鼠的癌細胞生長、轉(zhuǎn)移及 nm23-M1 基因表達的研究。</p><p><b

21、>　　2.2研究目標：</b></p><p>　　通過天灸腎俞穴，觀察其對Lewis肺癌小鼠體重變化、飲食情況、脾臟NK細胞活性、血清IL-2水平、腫瘤組織形態(tài)學、腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因（nm23-M1）的蛋白表達、nm23-M1基因的 mRNA 表達的影響，為開拓天灸防治化療反應提供基礎研究，為臨床應用提供科學的實驗數(shù)據(jù)。</p><p>　　2.3擬解決的關鍵問題：<

22、;/p><p>　?。?）腎俞穴在小鼠身上的定位。</p><p>　?。?）小鼠脾臟NK細胞活性、小鼠血清IL-2水平的測定。</p><p>　　（3）腫瘤組織形態(tài)學的觀察。</p><p>　　（4）腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的蛋白表達。</p><p>　?。?）nm23-M1基因的mRNA表達</p><

23、;p>　　3.擬采取的研究方案及可行性分析：</p><p><b>　　3.1研究方案：</b></p><p>　?。?）參照林文注主編的《實驗針灸學》大鼠的腎俞穴的定位。</p><p>　?。?）用MTT法和用放射免疫分析法：MTT法：①制備脾細胞：貼敷治療結束后隔日取材, 摘眼球取血，脫頸處死小鼠，75% 乙醇溶液浸泡消毒，無菌

24、取脾，置于少量冷不完全 1640 培養(yǎng)液中（按 10.4g 加 1000ml 雙蒸水、加入終濃度為 20mM 的 HEPES、16mM 的 NaHCO3、1mM 的丙酮酸鈉, 配成不完全 1640 培養(yǎng)基,過濾除菌；），研磨，200 目篩網(wǎng)過濾，濾液移入 50ml 離心管， 1500r/min 4℃離心 10 min。棄上清，以無菌 Tris-NH4Cl 溶液（Tris， 以雙蒸水配成 0.17M 溶液，用鹽酸調(diào) PH 至 7.2-7.

25、4；NH4Cl，以雙蒸水配成 0.16M 溶液，4℃保存?zhèn)溆?。臨用時二者以體積比 1:9 混合成工作液。）作用 10min 破壞 紅細胞，同上法離心后棄上清，冷不完全 1640 培養(yǎng)液重懸，洗滌 2 次，洗滌后 用完全1640培養(yǎng)液（不完全1640培養(yǎng)液臨用時加入100 u/ml的青霉素和100 μ g/ml 的鏈霉素、2mM 的 L-谷氨酰胺，配成含 10%滅活胎牛血清的完全 1640 培養(yǎng) 基。）重懸并調(diào)細胞濃</p>

26、<p>　?。?）HE染色，光鏡觀察：小鼠的腫瘤組織，切成 2mm 厚，放入 10%福爾馬林溶液內(nèi)固定。用低溫石蠟 包埋，4祄 連續(xù)切片，①切片常規(guī)脫蠟至水;②蘇木素染色 10m; ③1%鹽酸酒精分 化; ④流水沖洗 2h 藍化; ⑤脫水 70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇各 5m，95%乙醇Ⅰ 15m; ⑥入伊紅酒精溶液 5m;95%乙醇Ⅱ5m;100%乙醇Ⅰ5m;100%乙醇Ⅱ5m; ⑦透 明:二甲苯Ⅰ15m;二甲苯Ⅱ1

27、5m; ⑧中性樹膠封片，室溫晾干，光鏡下觀察。</p><p>　?。?）用免疫組織化學法：①切片常規(guī)脫蠟至水;②3%H2O2 室溫滅活內(nèi)源性過氧化物酶 10min,蒸餾水洗 3 次;③微波抗原修復:切片浸入 1mmol/LEDTA（PH8.0）液中,微 波爐中加熱至 100℃,5min,冷卻后再加熱至 100℃,5min,冷卻;④滴加抗原修復 液,室溫 10min, PBS 沖洗 3 次;⑤血清封閉,室溫 20

28、min;⑥滴加一抗 1：100 稀釋 的一抗 nm23-M1，30μl，4℃過夜。PBS 洗 5min×3 次。同時用 PBS 代替一抗作 陰性對照;⑦滴加生物素化山羊抗兔 IgG,37℃,20min, PBS 洗 5min×3 次;⑧滴加 試劑 SABC,37℃20min, PBS 洗 5min×4 次;⑨DAB 顯色, 室溫 5-30m，光鏡下控制 時間。⑩常規(guī)脫水,透明, 中性樹膠封片。計算機圖象分析

29、 nm23-M1 表達的面積 與整個視野的面積比。</p><p>　?。?）采用實時熒光定量RT-PCR方法：①從組織中提取總 RNA。 腫瘤組織加 Trizol 后（100mg 組織/1ml Trizol），用槍頭充分攪動以使液 體粘稠，室溫放置 5 分鐘，使其充分裂解。4℃ 12000g 離心 15 分鐘，取上清。 按 200μl 氯仿/mlTrizol 加入氯仿（預冷），充分搖勻 15 秒，室溫放置 15

30、 分鐘。4℃ 12000g 離心 15 分鐘。 吸取上層水相，至另一個預冷的離心管中。 按 0.5ml 異丙醇/ml Trizol 加入異丙醇（預冷）混勻，室溫放置 5-10min。 4℃ 12000g 離心 10min，棄上清，RNA 沉于管底。 按 1ml 75%乙醇/ml Trizol 加入 75%乙醇（預冷），溫和震蕩離心管，懸浮 沉淀。 4℃ 7500g 離心 5min，盡量棄上清。室溫晾干 5-10min。用 50μl RN

31、ase-free H2O,溶解 RNA 樣品，55-60℃ 10min。-80℃保存待測。②用分光光度法測定所提取 RNA 的濃度 分光光度計先用 1ml 水校正零點。比色杯使用前用濃鹽酸:甲醇（1:1）浸泡 1 小</p><p><b>　　3.2可行性分析：</b></p><p>　?。?）腎俞是足太陽膀胱經(jīng)的穴位，是腎氣輸注于體表的部位，具有較好的培補腎元的

32、功效，先天得充則后天得養(yǎng)，對于提高機體的防治化療毒性反應有很好的作用。</p><p>　?。?）本課題組成員學歷、年齡結構合理，具有較扎實的理論基礎和熟練的操作技能。</p><p>　?。?）本課題組對天灸的理論知識和臨床應用具有扎實的基礎，本實驗室能熟練的操作MTT法和用放射免疫分析法、HE染色，光鏡觀察、用免疫組織化學法、實時熒光定量RT-PCR法。</p><

33、p>　?。?）實驗動物 C57BL/6J 近交系小鼠，7～8 周齡，體重 17～21g，60 只，雌雄各半，清潔 級。動物由中國醫(yī)學科學院動物研究中心提供。</p><p>　　因此，本實驗項目可行性強，可按期保質(zhì)完成。</p><p>　　4. 本項目的特色與創(chuàng)新之處。</p><p>　　本項目的特色在于：采用現(xiàn)代科學技術將天灸腎俞穴在抗腫瘤化療中的增效減

34、毒作用機制、加強化療對 Lewis 肺癌小鼠癌細胞生長的抑制作用、對化療小鼠免疫功能有調(diào)節(jié)作用、對化療小鼠 nm23-M1 基因表達的促進作用比較客觀的表示出來。</p><p>　　本項目的創(chuàng)新在于：（1）首次開展天灸對肺癌化療小鼠腫瘤組織的 nm23-M1 基因蛋白含量的研究。（2）首次開展天灸對肺癌化療小鼠腫瘤組織的 nm23-M1 基因 mRNA 表達的研 究。 本實驗以中醫(yī)天灸療法為研究目標，運用現(xiàn)代免

35、疫學、分子生物學技術等現(xiàn) 代科學手段，開展了天灸“腎俞”穴對抗腫瘤化療增效減毒機制的實驗研究，更深入探討了天灸的治病機理并取得了重要的研究成果。目前這方面的研究達到分 子水平、基因水平的研究較少，我們運用基因?qū)W技術，將“天灸療法”的實驗研 究提高到新的水平。豐富了中醫(yī)天灸理論。隨著進一步研究，將天灸與化療藥物 作用有機結合，將開發(fā)出有效的化療藥物減毒增效劑和減毒增效方法。</p><p>　　5.年度研究計劃及預

36、期研究結果。</p><p>　　5.1年度研究計劃：</p><p>　　2006.7－2006.8 完成試驗材料和試劑的準備，查閱資料，查新檢索。</p><p>　　2006.9－2006.10 完成小鼠脾 NK 細胞活性及血清 IL-2 水平的測定。</p><p>　　2006.11－2007.1 完成腫瘤組織形態(tài)學的觀察

37、、腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的蛋白表達和nm23-M1基因的mRNA表達。</p><p>　　2007.2－2007.5 課題總結、鑒定并申報成果。</p><p>　　5.2 預期研究結果：</p><p>　?。?）天灸療法可以使小鼠血清 IL-2 含量升高，脾臟 NK 細胞活性增強，天灸組的 NK 細胞活性最強</p><p>　?。?）天

38、灸對化療小鼠 nm23-M1 基因表達有促進作用。</p><p>　　（3）天灸療法對 Lewis 肺癌化療小鼠有減毒作用：抑制化療肺癌小鼠體重減輕，食欲降低，飲食量減少。</p><p>　　（4）所獲研究成果，擬在國家級刊物發(fā)表學術論文5－6篇，及時進行成果鑒定，并申報科技進步獎。</p><p>　　（二）研究基礎與工作條件</p><p

39、>　　1. 工作基礎</p><p>　　1.1 研究工作積累</p><p>　　實踐積累：2000多年的實踐證明，天灸對虛弱疾病患者（本實驗為移植性 Lewis肺癌小鼠）機體的恢復有很好的效果。</p><p>　　理論積累：通過對國內(nèi)有關天灸治療研究情況進行檢索，掌握了該領域的研究現(xiàn)狀，從而選擇恰當?shù)那腥朦c進行研究。</p><

40、;p>　　技術積累：本實驗室已經(jīng)完全掌握了天灸技術的操作，掌握了分子生物學、現(xiàn)代免疫學技術，為完成本實驗打下了良好的實驗技術。</p><p>　　已取得的研究工作成績</p><p>　　已經(jīng)初步經(jīng)實驗得知天灸腎俞可以提高大鼠的造血功能，試驗結果表明可以提高大鼠自身的免疫能力。</p><p>　　2. 工作條件</p><p>

41、;　　山東中醫(yī)藥大學、山東省醫(yī)學科學院、山東省中醫(yī)藥研究所具備了與本次實驗相關的儀器，中國醫(yī)學科學院動物研究中心提供實驗動物 C57BL/6J 近交系小鼠，7～8 周齡，體重 17～21g，60 只，雌雄各半，清潔 級。本校實驗室動物中心有良好的SPF級動物飼養(yǎng)設備和條件。設備和設施完全滿足本項目的實驗所需。</p><p>　　3. 申請人簡歷</p><p>　　王勇，男，1972

42、年3月出生。1995年畢業(yè)于山東中醫(yī)藥大學針灸專業(yè)，獲碩士學位。1998年畢業(yè)于山東中醫(yī)藥大學針灸專業(yè)，獲博士學位，主任醫(yī)師，一直從事中西醫(yī)結合防治腫瘤的工作。近期發(fā)表的于本課題有關的論文有：</p><p>　　1. 王勇. 天灸的歷史沿革. 山東中醫(yī)藥大學學報 2003；10（1）：48 </p><p>　　2. 王勇. 天灸的臨床應用綜述. 中國針灸雜志2005；

43、21（1）：4</p><p>　　在本項研究中負責課題設計、組織實施、實驗數(shù)據(jù)收集、整理、統(tǒng)計等工作。</p><p>　　程勇，男，1964年12月11日生。1990年畢業(yè)于大連醫(yī)科大學腫瘤病理專業(yè)，獲醫(yī)學碩士學位，2000年畢業(yè)于山東中醫(yī)藥大學中西醫(yī)結合腫瘤專業(yè)，獲醫(yī)學博士學位，主任醫(yī)師，一直從事中西醫(yī)結合防治腫瘤的研究，近年來發(fā)表論文10余篇。近期發(fā)表的與本課題相關的論文有：<

44、;/p><p>　　1.程勇.　中西醫(yī)結合防治腫瘤的理論探討.　中國中醫(yī)學雜志　2000；5（4）：23</p><p>　　2.程勇.　天灸對肺癌一組移植小鼠脾臟NK細胞活性、小鼠血清IL-2水平的影像.　2005；6（15）：45</p><p>　　在本項實驗中負責天灸的實施和小鼠脾臟NK細胞活性、小鼠血清IL-2水平的測定和腫瘤組織形態(tài)學的觀察。</p&g

45、t;<p>　　郭俊國，男，1972年3月24日出生。1994年畢業(yè)于山東中醫(yī)藥大學中藥專業(yè)，獲藥學碩</p><p>　　士學位，現(xiàn)任山東省中醫(yī)藥研究所實驗師，近期發(fā)表學術論文1篇。</p><p>　　在本項實驗中負責小鼠的飼養(yǎng)及體內(nèi)試驗。</p><p>　　張加余，男，1969年5月23日出生。2004年業(yè)于山東中醫(yī)藥大學中藥專業(yè)，獲藥學博士&

46、lt;/p><p>　　學位，現(xiàn)任山東中醫(yī)藥大學副教授，近期發(fā)表論文2篇。</p><p>　　在本項實驗中負責動物造模及實驗。</p><p>　　馬本緒，男，1965年1月2日出生。2000年畢業(yè)于山東省醫(yī)學科學院，獲博士學位，現(xiàn)任</p><p>　　山東省醫(yī)學科學院副教授，近期發(fā)表的與本課題有關的論文有：</p><p

47、>　　馬本緒.　人類基因組計劃的展望.　中西醫(yī)結合臨床雜志　2002；5（1）：5</p><p>　　在本實驗中負責腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的蛋白表達和nm23-M1基因的mRNA表達</p><p>　　簽字和蓋章頁(此頁自動生成,打印后簽字蓋章) </p><p>　　申 請 者：王勇 依托單位：山東中醫(yī)藥大學 &

48、lt;/p><p>　　項目名稱：天灸對Lewis肺癌化療小鼠腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因表達及其免疫功能的影響 </p><p>　　資助類別：面上項目 亞類說明：自由申請項目 </p><p><b>　　附注說明： </b></p><p><b>　　申請者承諾：</b>

49、;</p><p>　　我保證申請書內(nèi)容的真實性。如果獲得基金資助，我將履行項目負責人職責，嚴格遵守國家自然科學基金委員會的有關規(guī)定，切實保證研究工作時間，認真開展工作，按時報送有關材料。若填報失實和違反規(guī)定，本人將承擔全部責任。</p><p>　　簽字： </p><p>　　項目組主要成員承諾：</p><p&g

50、t;　　我保證有關申報內(nèi)容的真實性。如果獲得基金資助，我將嚴格遵守國家自然科學基金委員會的有關規(guī)定，切實保證研究工作時間，加強合作、信息資源共享，認真開展工作，及時向項目負責人報送有關材料。若個人信息失實、執(zhí)行項目中違反規(guī)定，本人將承擔相關責任。</p><p>　　依托單位及合作單位承諾：</p><p>　　已按填報說明對申請人的資格和申請書內(nèi)容進行了審核。申請項目如獲資助，我單位保證

51、對研究計劃實施所需要的人力、物力和工作時間等條件給予保障，嚴格遵守國家自然科學基金委員會有關規(guī)定，督促項目負責人和項目組成員以及本單位項目管理部門按照國家自然科學基金委員會的規(guī)定及時報送有關材料。</p><p>　　依托單位公章 合作單位公章1 合作單位公章2 </p><p>　　日期：