獸用抗寄生蟲藥物殘留高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜篩選法研究.pdf

1、動(dòng)物抗寄生蟲藥是指對(duì)動(dòng)物體內(nèi)或體外的寄生蟲起殺滅或驅(qū)除作用的藥物，根據(jù)其藥物作用對(duì)象，抗寄生蟲藥可以分為驅(qū)線蟲藥、驅(qū)吸蟲藥、驅(qū)絳蟲藥、驅(qū)原蟲藥及驅(qū)外寄生蟲藥等多種類。在抗寄生蟲藥發(fā)揮良好驅(qū)寄生蟲和（或）殺寄生蟲的藥理作用的同時(shí)，也給食品安全帶來了威脅。動(dòng)物抗寄生蟲藥物的不當(dāng)使用帶來的食品中殘留對(duì)人體造成直接的或通過環(huán)境和食物鏈的作用間接的產(chǎn)生急、慢性毒性作用，此外還會(huì)引起寄生蟲耐藥性增強(qiáng)、影響?zhàn)B殖業(yè)的發(fā)展等后果。因此包括我國的許多國家和

2、地區(qū)都針對(duì)部分抗寄生蟲藥物制定了最高殘留限量或者禁用。然而開展殘留分析研究和制訂獸藥殘留檢測方法，加強(qiáng)動(dòng)物源性食品獸藥殘留監(jiān)控，是食品安全控制中重要的一環(huán)。目前，獸藥殘留監(jiān)控手段向著快速、簡便、高通量、高效率的趨勢進(jìn)行，逐漸發(fā)展為先篩選再定量確證的監(jiān)控程序。而目前新近報(bào)道的動(dòng)物源性食品抗寄生蟲藥物殘留的檢測方法中，尚沒有篩選方法的報(bào)道，定量確證方法的報(bào)道中涉及的藥物數(shù)量方面，也僅有三十多種，尚不夠全面;在監(jiān)控基質(zhì)方面也僅包括肝臟、牛奶等

3、單一種類的基質(zhì)，沒有做到全面監(jiān)控。因此，本研究針對(duì)動(dòng)物性食品中動(dòng)物抗寄生蟲藥物殘留，順應(yīng)殘留分析高通量、高效率的發(fā)展趨勢，建立了動(dòng)物源性食品中抗寄生蟲藥物殘留檢測的篩選檢測方法，采用QuEChERS前處理技術(shù)，節(jié)省樣品前處理時(shí)間，提高監(jiān)控分析檢測效率，為抗寄生蟲藥物的殘留監(jiān)控提供技術(shù)支持和理論依據(jù)，完善了動(dòng)物源性食品中抗寄生蟲藥物的殘留監(jiān)控體系，并為動(dòng)物源性食品安全評(píng)價(jià)提供指導(dǎo)和參考。
　　 本研究建立了豬、雞、牛、羊的肌肉、肝

4、臟、腎臟，雞蛋，牛奶，蜂蜜，魚肉中多種類動(dòng)物抗寄生蟲藥物及代謝物的樣品前處理方法和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜篩選檢測方法。樣品采用改良的QuEChERS前處理技術(shù)，采用乙腈和乙酸乙酯重復(fù)提取，提取液采用分散固相萃取法凈化，通過對(duì)幾種常用吸附劑(PSA，NH2，GCB，ODS)吸附雜質(zhì)和藥物能力的考察，最終選擇了各項(xiàng)條件最優(yōu)的ODS吸附劑，凈化后取上清液，加入1mL DMSO于40℃條件下氮?dú)鉂饪s至1mL，HPLC-MS/MS上樣檢測;采用C

5、18反相色譜柱分離，流動(dòng)相中的水相為12.5mM甲酸銨水溶液，有機(jī)相為12.5mM甲酸銨-甲醇∶乙腈(50∶50，v∶v)溶液，梯度洗脫，保證所有藥物在40min內(nèi)保留時(shí)間分離良好;在最優(yōu)的質(zhì)譜參數(shù)條件下，根據(jù)優(yōu)化出的各藥物的定性定量離子，MRM模式下正、負(fù)離子掃描監(jiān)測。結(jié)果顯示:各類抗寄生蟲藥物在組織和產(chǎn)品中的最低檢測限為0.5-10μg/Kg，最低定量限為1-20μg/Kg;針對(duì)以MRL為VL的藥物，98％以上的藥物的CCβ在2倍V

6、L以內(nèi);針對(duì)所有藥物，約60％藥物的CCβ在3倍VL以內(nèi)。經(jīng)對(duì)照，各藥物的檢測限和定量限均低于歐盟最新規(guī)定的最高殘留限量，符合篩選方法對(duì)靈敏度的要求。在動(dòng)物組織及產(chǎn)品中，阿維菌素類藥物的回收率為32.9％-60.1％，變異系數(shù)≤20.6％;苯并咪唑類藥物回收率為44.3％-83.6％，變異系數(shù)≤21％;聚醚類離子載體抗生素藥物的回收率為29.6％-60.0％，變異系數(shù)≤19.9％;化學(xué)合成抗球蟲藥物的回收率為34.2％-71.0％，變異

7、系數(shù)≤22.0％;殺蟲劑類藥物的回收率為29.5％-76.9％，變異系數(shù)≤26％;其他抗寄生蟲藥物的回收率為32.0％-75.2％，變異系數(shù)≤20.9％。方法考核結(jié)果表明該方法符合獸藥多殘留篩選的要求，可用于動(dòng)物性食品中抗寄生蟲藥物及殺蟲劑殘留的篩選。
　　 本研究首次建立了雞、牛、羊、豬的肌肉、肝臟、腎臟，雞蛋，牛奶，蜂蜜，魚肉中多種類常用動(dòng)物抗寄生蟲藥物的樣品前處理方法和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜篩選檢測方法。本研究涉及的樣品基