常見(jiàn)病毒 ppt課件

1、1,第三節(jié)　常見(jiàn)病毒,,,,,,,,,,,,,,,,2,流感病毒,3,,流感病毒(influenza virus)是流感的病原體。分甲、乙、丙三型引起人和動(dòng)物流感,4,一、生物學(xué)性狀,形態(tài)與結(jié)構(gòu) 呈球形，直徑80~120nm，由核衣殼和包膜構(gòu)成。,5,6,包膜:內(nèi)層基質(zhì)蛋白（M1） 外層----脂質(zhì)雙層 糖蛋白突起（HA、NA） M2組成核衣殼:由病毒

2、RNA（分7或8個(gè)節(jié)段） RNA 多聚酶、 核蛋白（NP）,7,包膜內(nèi)層,M1蛋白:位于包膜的內(nèi)層。增加包膜硬度和厚度。保護(hù)核酸、維持病毒外形。Ag穩(wěn)定，具型特異性。相應(yīng)抗體無(wú)保護(hù)作用。,8,包膜外層,脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)M2蛋白:是膜通道蛋白。表面有兩種刺突血凝素(HA)神經(jīng)氨酸酶(NA) HA和NA抗原性易變異。,9,（1）血凝素(HA),糖蛋白三棱柱狀突起,10

3、,作用：①紅細(xì)胞凝集作用：凝集人、雞、 豚鼠等的紅細(xì)胞②介導(dǎo)吸附和穿入宿主細(xì)胞③免疫原性→相應(yīng)抗體（血凝抑制抗體）抑制血凝現(xiàn)象--血凝抑制試驗(yàn)中和病毒，屬主要的保護(hù)性抗體。④劃分亞型的主要依據(jù),11,（2）神經(jīng)氨酸酶(NA),糖蛋白，蘑菇狀突起 作用①促進(jìn)病毒釋放：具酶活性→水解宿主細(xì) 胞表面N－乙酰神經(jīng)氨酸。②促進(jìn)病毒擴(kuò)散：液化細(xì)胞表面的粘液。③NAAg→Ab，抑制NA的水解活性

4、，無(wú)中和 作用。④劃分亞型的主要依據(jù),,,,,,,12,核心,,單負(fù)股RNA(7～8節(jié)段),核蛋白,核糖核蛋白(RNP）,RNA多聚酶蛋白,核蛋白抗原穩(wěn)定，具型特異性。,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,1,2,4,3,5,6,7,8,,,,,,,RNA多聚酶蛋白,,RNP,,,,,核衣殼，螺旋對(duì)稱,

5、13,(二)分型與變異,14,2、變異,甲型易變異，兩種變異形式 ①抗原漂移 ②抗原轉(zhuǎn)換,15,抗原漂移,由于基因組自發(fā)的點(diǎn)突變導(dǎo)致的抗原小幅度變異，稱抗原漂移，屬量變，引起流感的中、小流行。,,,16,抗原轉(zhuǎn)換,由于基因組發(fā)生重新排列導(dǎo)致的抗原較大幅度的變異，稱為抗原轉(zhuǎn)變，屬質(zhì)變，產(chǎn)生新的亞種，往往引起流感大流行甚至世界性大流行。,17,培養(yǎng)特性： （1）雞胚羊膜腔（初次分離）或尿囊腔接種（傳代） ； （2）人胚腎或猴腎

6、細(xì)胞培養(yǎng) ；（3）動(dòng)物接種——以雪貂最敏感。,抵抗力： 較弱，56℃30min滅活，室溫下感染性很快消失，對(duì)其他理化因素均敏感。,,18,1.典型流感： 畏寒、發(fā)熱、頭痛、肌肉酸痛、咳嗽、乏力、咽痛、鼻炎等?？捎心c胃不適。少數(shù)病人繼發(fā)細(xì)菌性肺炎。,二、致病性,19,2.流感病毒性肺炎：少數(shù)患者，早期與典型流感相同，但1-2天后癥狀迅速加重。并常發(fā)生呼吸困難，病死率較高。,二、致病性,20,二、致病性,主要傳染源：

7、病人、病畜 隱性感染者主要傳播途徑：經(jīng)飛沫。潛伏期：1~4d。病程：一般5~7d。,,21,三、免疫性：細(xì)胞免疫、體液免疫,感染后可獲得對(duì)同型病毒牢固的免疫力，主要依賴于呼吸道局部的SIgA，其中抗HA抗體最為重要。,抗HA抗體阻止病毒吸附和穿入抗NA抗體限制病毒釋放和擴(kuò)散,細(xì)胞免疫：亞型間交叉免疫,22,四、微生物學(xué)檢查,1、分離病毒 雞胚羊膜腔?！　?、血清學(xué)診斷

8、 取雙份血清測(cè)定血凝抑制抗體效價(jià)效價(jià)增長(zhǎng)4倍或4倍以上有診斷價(jià)值?！　?、快速診斷 免疫熒光法、分子生物學(xué)方法。,23,五、防治原則,1、建立流感監(jiān)測(cè)站，及時(shí)發(fā)現(xiàn)與隔離病人；2、預(yù)防接種、環(huán)境消毒；3、中藥與化學(xué)療劑防治。,24,乙型肝炎病毒,Hapatitis B Virus,1963年Blumberg在多次輸血的血友病患者中發(fā)現(xiàn)澳抗，1970年Dane在電鏡下看到具有傳染性的42nm病毒顆粒HBV在亞洲廣泛流行，在

9、中國(guó)約10%人口攜帶該病毒，全球約3.5億,25,一、生物學(xué)性狀,屬嗜肝DNA病毒科1、形態(tài)結(jié)構(gòu)：電鏡下可見(jiàn)三種形態(tài)（1）大球形顆粒（Dane顆粒）：為完整的HBV（2）小球形顆粒：Ø22nm，為HBV外衣殼成分（3）管形顆粒： Ø22nm，長(zhǎng)50~700nm,26,1、大球型顆粒,為完整的、有傳染性的HBV顆粒，又稱Dane顆粒。直徑42nm，具雙層衣殼：外衣殼相當(dāng)于一般病毒的包膜，由脂質(zhì)雙層和蛋白質(zhì)構(gòu)成

10、，含HBsAg；內(nèi)衣殼為20面體對(duì)稱的核心結(jié)構(gòu)，相當(dāng)于一般病毒的衣殼，含HBcAg和HBeAg；其內(nèi)部含HBV的DNA和DNA多聚酶。,27,28,2、小球形顆粒,直徑22nm，大量存在于血流中，不含DNA和DNA聚合酶, 由過(guò)剩的病毒 衣殼裝配而成。,29,3、管型顆粒,實(shí)際為一串聚合的小球型顆粒。,30,一、生物學(xué)性狀,2、HBV的DNA（1）長(zhǎng)股（負(fù)股，L-）（2）短股（正股，S+）：為L(zhǎng)股的50%~100%，5'

11、;端固定，與L-5'端重疊互補(bǔ)。3'可變。,整個(gè)DNA包含4個(gè)開(kāi)放讀碼區(qū)段（ORF）、4個(gè)啟動(dòng)子和2個(gè)增強(qiáng)子。,31,ORF四個(gè)區(qū)及其編碼的抗原,包括有：,,,,,編碼DNA多聚酶,編碼HBxAg,S區(qū),C區(qū),P區(qū),X區(qū),S基因:編碼HBsAg前S1基因:編碼Pre S1 Ag前S2基因:編碼Pre S2 Ag,C基因:編碼HBcAg；前C基因：與C基因共同編碼HBeAg,32,3.5Kb mRNA: 編碼HBcA

12、g,HBeAg, DNA聚合酶 復(fù)制模板--前基因組RNA2.4Kb mRNA: 編碼S蛋白。 2.1Kb mRNA: 編碼S1和S2蛋白。0.7Kb mRNA: 編碼X蛋白,3、HBV的復(fù)制,33,一、生物學(xué)性狀,4、抗原成分（1）外衣殼抗原：HBsAg、前S1抗原、 前S2抗原。（2）內(nèi)衣殼抗原：HBcAg、HBeAg。,34,1、表面抗原(HBsAg),存在于大球形顆粒外衣殼、小球

13、形顆粒及管型顆粒中，HBV感染的主要標(biāo)志。由HBsAg刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗－HBs抗體，對(duì)機(jī)體有保護(hù)性,35,2、PreS1、PreS2 吸附作用 抗原性強(qiáng) 抗—PreS1和抗—PreS2可阻斷病毒與細(xì)胞的結(jié)合,36,3、核心抗原(HBcAg),存在于Dane顆粒核心部位的表面，為內(nèi)衣殼成分血中不易檢測(cè)到受感染的肝細(xì)胞表面可表達(dá)有HBcAgHBc-抗體IgM陽(yáng)性，提示HBV處于復(fù)制狀態(tài)。,37,4、e抗原(HBeAg),存在于

14、HBV內(nèi)衣殼中，亦可在HBV復(fù)制時(shí)期，由病毒轉(zhuǎn)錄、游離于血清中HBeAg可作為體內(nèi)HBV復(fù)制及血清具有強(qiáng)傳染性的一個(gè)指標(biāo)抗HBe對(duì)HBV感染有一定的保護(hù)作用。,38,一、生物學(xué)性狀,5、培養(yǎng)特性 黑猩猩是HBV動(dòng)物模型；鴨是廣泛應(yīng)用；原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)。6、抵抗力：較強(qiáng) 耐熱、干燥、低溫和紫外線，對(duì)70%乙醇不敏感，殺滅HBV可選用50mg/L環(huán)氧乙烷、2%戊二醛、0.5%過(guò)氧乙酸、5%次氯酸鈉等

15、。,39,二、致病性與免疫性,1、傳染源為病人和攜帶者2、傳播途徑 ★經(jīng)血傳播 ★母嬰傳播,40,二、致病性與免疫性,3、致病機(jī)制 與HBV在機(jī)體內(nèi)持續(xù)增殖和機(jī)體由此產(chǎn)生免疫病理?yè)p害有關(guān)。（1）抗體介導(dǎo)的免疫病理?yè)p傷：（2）細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病理?yè)p傷：（3）免疫復(fù)合物引起的病理?yè)p傷：,,41,（1）抗體介導(dǎo)的免疫病理?yè)p傷：

16、 LSP：ADCC,,3、致病機(jī)制,42,（2）細(xì)胞介導(dǎo)的免疫病理?yè)p傷 ：,CTL：分泌穿孔素、淋巴毒素等直接殺傷靶細(xì)胞 遲發(fā)型超敏反應(yīng)：,43,（3）免疫復(fù)合物引起的病理?yè)p傷：,腎小球 補(bǔ)體--Ⅲ型超敏反應(yīng)HBsAg 關(guān)節(jié)+抗-HBs 肝內(nèi) → 栓塞→壞死→重癥肝炎,,,,,,44,二、致病性與免疫性,乙肝臨

17、床表現(xiàn)呈多樣性——急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎、無(wú)癥狀攜帶、肝外組織損傷等。與原發(fā)性肝癌有一定關(guān)系。,,,45,二、致病性與免疫性,4、病后主要依賴抗-HBs和抗Pre-S的保護(hù)。,,46,三、微生物學(xué)檢查,HBV感染的血清學(xué)標(biāo)志物HBsAg、Pre-S1、Pre-S2、HBV DNA、 HBeAg、抗-HBs、抗-HBc （IgM 、IgG ）、抗- HBe抗Pre-S1、抗Pre-S2（IgM）、抗-HBe、抗Pre-S2（

18、IgG）檢測(cè)方法：ELISA、PCR、RPHA、RIA等。,意義,HBV抗原抗體檢測(cè)意義與應(yīng)用,47,乙型肝炎抗原抗體的檢測(cè)：目前主要用血清學(xué)方法檢測(cè)兩對(duì)半,① HBsAg，抗HBs② HBeAg，抗HBe③ 抗HBcIgM 抗HBcIgG,其中以HBsAg的檢測(cè)最重要，作為篩選血源必須檢測(cè)的指標(biāo)。,48,HBV微生物學(xué)檢查的意義：,(1)篩選血源(2)流行病學(xué)調(diào)查(3)乙肝疫苗接種后免疫效果的測(cè)定(4)診斷乙肝病(5

19、)判斷預(yù)后(6)判斷傳染性,49,四、防治原則,1、一般措施：加強(qiáng)血液及血制品管理、篩選供 血員—減低血液途徑傳播加強(qiáng)婚前檢查及性教育嚴(yán)格消毒制度—防止醫(yī)源性感染,50,2、特異性預(yù)防 人工被動(dòng)免疫：HBIG （1）母親HBsAg陽(yáng)性的新生兒 （2）與乙肝密切接觸者人工主動(dòng)免疫：乙肝疫苗 （1）新生兒： （2）易感嬰幼兒和兒童 （3）高危人群： （4）HBsAg陰性者,51,肝炎病

20、毒的主要特性,52,,（1）電鏡下HBV表現(xiàn)為哪三種形態(tài)？（2）什么是Dane顆粒？（3）HBV的抗原組成有哪些？（4）HBV的傳播途徑有哪些？（5）HBV的抗原抗體檢測(cè)有何意義？,53,Dane顆粒： Ø42nm，有雙層衣殼。外衣殼相當(dāng)包膜，內(nèi)衣殼呈20面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，內(nèi)有DNA和DNA多聚酶。,54,55,急性肝炎,HBxAg誘導(dǎo)肝細(xì)胞表達(dá)MHC-I、II類(lèi)抗原，并把肝細(xì)胞內(nèi)的HBV的各種抗原遞呈給T細(xì)胞，引起細(xì)胞

21、免疫，造成免疫損傷。同時(shí)HBsAg、HBeAg、HBcAg和HBxAg等，成為T(mén)細(xì)胞攻擊的靶子，導(dǎo)致肝細(xì)胞溶解。,56,急性肝炎,急性肝炎潛伏期前驅(qū)期 — 1-2周，疲乏不適，低熱，胃腸道癥狀，右腹部不適，疼痛，肝大黃疸期 — 以上癥狀加重，但發(fā)熱減退，黃疸（鞏膜黃染、濃茶樣尿），可持續(xù)1個(gè)月，轉(zhuǎn)氨酶升高，肝功異?；謴?fù)期 — 癥狀減退，肝功正常,57,,,58,慢性遷延性乙型肝炎,封閉肝細(xì)胞，阻礙特異性CTL對(duì)相應(yīng)抗原的識(shí)別及對(duì)

22、靶細(xì)胞的破壞，以致使感染持續(xù)存以。肝細(xì)胞外寄生的HBV及其釋放，引起肝細(xì)胞反復(fù)感染，使病程呈慢性過(guò)程。淋巴細(xì)胞帶有HBV導(dǎo)致IL2、rIFN、穿孔素等產(chǎn)生水平低，影響其HBV的清除。,59,暴發(fā)型乙型肝炎（FHB）,HBV的基因突變，導(dǎo)致HBeAg不能合成。此時(shí)，肝細(xì)胞上的HBcAg是T細(xì)胞的重要靶抗原。沒(méi)有游離的HBeAg與T細(xì)胞結(jié)合，不能阻止并封閉T細(xì)胞對(duì)肝細(xì)胞上的HBcAg的免疫應(yīng)答。病人因T細(xì)胞與肝細(xì)胞上HBcAg結(jié)合而對(duì)

23、肝細(xì)胞發(fā)生強(qiáng)烈的攻擊，導(dǎo)致FHB。,60,與HBV攜帶有關(guān)的因素,1、宿主免疫細(xì)胞缺乏清除HBV能力（1）HBV的基因變異；（2）HBV在淋巴細(xì)胞寄生，損害免疫細(xì)胞功能。 外周血單個(gè)核細(xì)胞可檢出HBV-DNA及HBsAg；B細(xì)胞、造血干細(xì)胞有preS1受體；PCR法可在胰、腎、小腸壁細(xì)胞中檢出HBV-DNA，并可轉(zhuǎn)錄；乙肝病人血清IL-2低于正常人。,61,與HBV攜帶有關(guān)的因素,1、宿主免疫細(xì)胞缺乏清除HBV能力；,

24、2、宿主遺傳特性；,3、宿主免疫耐受； HBsAg能與人血清白蛋白結(jié)合呈自身抗原狀態(tài)引起免疫耐受，未成熟的淋巴細(xì)胞與HBV接觸也易呈免疫耐受狀態(tài)。,62,與HBV攜帶有關(guān)的因素,1、宿主免疫細(xì)胞缺乏清除HBV能力；,2、宿主遺傳特性；,3、宿主免疫耐受；,4、HBsAg激活TS，抑制免疫應(yīng)答；,4、HBsAg激活TS，抑制免疫應(yīng)答；,63,HBV與原發(fā)性肝細(xì)胞癌（PHC）,大量HBV攜帶者的HBV感染流行區(qū)均為原發(fā)性肝

25、癌高發(fā)區(qū)；約90%的肝癌病人血清中有HBsAg或抗HBs等HBV感染的證據(jù)；HBV慢性攜帶狀態(tài)者發(fā)生肝癌的危險(xiǎn)性約為非攜帶者的200倍；X基因的反式激活作用。,64,乙肝病毒各種標(biāo)志物的臨床意義,HBsAg 感染的標(biāo)志； 陽(yáng)性禁止獻(xiàn)血； 所生新生兒應(yīng)立即接種疫苗?？?HBs 為保護(hù)性抗體，說(shuō)明感染已恢復(fù)

26、 并具有免疫力，無(wú)傳染性。,乙肝病毒各種標(biāo)志物的臨床意義,HBsAg 感染的標(biāo)志； 陽(yáng)性禁止獻(xiàn)血； 所生新生兒應(yīng)立即接種疫苗?？?HBs 為保護(hù)性抗體，說(shuō)明感染已恢復(fù) 并具有免疫力，無(wú)傳染性。,65,乙肝病毒各種標(biāo)志物的臨床意義,HBcAg 體內(nèi)有HBV復(fù)制的標(biāo)志。

27、 用特殊方法可從血清中檢出?？?HBc 表明感染或感染過(guò)HBV， ⑴ 如滴度＞1：1000，常為正在感染的標(biāo)志；低滴度為以往感染。 ⑵ IgM常作為急性肝炎的早期病原標(biāo)志；總Ab和IgG則表示感染過(guò)HBV。,66,HBeAg 病毒體內(nèi)復(fù)制并有傳染性的標(biāo)志，先于HBsAg消失。若與HBsAg持續(xù)陽(yáng)性則提示轉(zhuǎn)為慢性。

28、HBsAg和HBeAg均陽(yáng)性的孕婦所生嬰兒90%以上可成為攜帶者?？?Hbe 表示體內(nèi)HBV復(fù)制減弱，傳染性減小，病情趨向好轉(zhuǎn)。,乙肝病毒各種標(biāo)志物的臨床意義,67,Pre-S 、PHSA-r 可作為HBV復(fù)制及有傳染性的標(biāo)志?？筆re-S1、抗Pre-S2 前者在潛伏期即可檢出，較抗-HBc出現(xiàn)早；后者多在急性期出現(xiàn)。它們持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，IgG類(lèi)抗體出

29、現(xiàn)提示HBV被清除和疾病恢復(fù)。,乙肝病毒各種標(biāo)志物的臨床意義,68,HBV DNAP HBV復(fù)制及有傳染性的標(biāo)志。HBV DNA 為病原學(xué)標(biāo)志，同時(shí)反映HBV存在和復(fù)制及有傳染性。,乙肝病毒各種標(biāo)志物的臨床意義,69,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

30、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,Symptoms,HBeAg,anti-HBe,Total anti-HBc,IgM anti-HBc,anti-HBs,HBsAg,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,100,Typical Serologic Course,Weeks after Exposure,Titre,Acute Hepatitis B Virus Infection with Reco

31、very,70,,,IgM anti-HBc,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,Total anti-HBc,HBsAg,Acute(6 months),HBeAg,Chronic(Years),anti-HBe,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,Years,Weeks af