實驗動物與生物安全

1、,1,東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生物安全事件回放,2010年12月間，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院有關(guān)教師，從哈爾濱市郊區(qū)一家養(yǎng)殖場購入4只山羊，未按國家及黑龍江省實驗動物管理規(guī)定要求養(yǎng)殖場出具檢疫合格證明，并在以上述4只山羊進行5次動物實驗前，未按規(guī)定對實驗山羊進行現(xiàn)場檢疫，同時在指導(dǎo)學(xué)生實驗過程中未能切實按照標(biāo)準(zhǔn)的實驗規(guī)范，嚴(yán)格要求學(xué)生遵守操作規(guī)程，進行有效防護，共涉及4名教師、2名實驗員、110名學(xué)生。由于上述違規(guī)行為，導(dǎo)致2011年3月至5月，學(xué)

2、校27名學(xué)生及1名教師陸續(xù)確診感染布病。經(jīng)專家組認(rèn)定該事故是一起因?qū)W校相關(guān)責(zé)任人在實驗教學(xué)中違反有關(guān)規(guī)定造成的重大教學(xué)責(zé)任事故，學(xué)校對事故承擔(dān)全部責(zé)任。,,2,第一節(jié) 生物安全的基本概念,一、生物安全的定義所謂生物安全（biosafety）一般指針對現(xiàn)代生物技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用的同時可能造成的對自然界生態(tài)環(huán)境、動物和人體健康產(chǎn)生的潛在危害所采取的一系列有效預(yù)防和控制措施。廣義的生物安全是國家安全問題的組成部分，是指與生物有關(guān)的各種因素

3、對社會、經(jīng)濟、自然界生態(tài)環(huán)境及人類健康及所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險。包括人類的健康安全、人類賴以生存的農(nóng)業(yè)生物安全以及與人類生存有關(guān)的環(huán)境生物安全3個方面。狹義的生物安全是指在各學(xué)科領(lǐng)域中現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的不利影響。,,3,二、動物實驗中的生物安全問題實驗動物在生產(chǎn)、使用過程中，存在以下幾方面的生物安全問題。1.實驗動物的一些烈性傳染病的流行和傳播可造成大批動物的死亡，危及動物

4、的健康；實驗動物帶有的一些人獸共患病病原微生物可感染人，危害人的健康。此外，用來做實驗研究的野生動物、家畜、家禽也可能攜帶對人類產(chǎn)生嚴(yán)重威脅的人畜共患病病原體。2.動物實驗過程中使用的一些有毒有害化學(xué)品、藥品、消毒劑、殺蟲劑、農(nóng)藥等，流入環(huán)境，造成環(huán)境污染，最終影響自然界和人類健康。3.實驗動物的皮毛及排泄物對某些過敏體質(zhì)的人是致敏原，可引起過敏性鼻炎、支氣管哮喘、皮疹等。4.由重組DNA技術(shù)發(fā)展形成的遺傳工程細(xì)菌和動物可能造成以

5、目前科學(xué)水平和知識所無法預(yù)見的危害，如重組DNA操作過程中大量使用的抗藥性標(biāo)記基因氨芐青霉素抗性基因和新霉素抗性基因?qū)氲郊?xì)菌和動物中。在上述生物安全問題中，由動物感染人獸共患病而引起有關(guān)人員感染的安全問題最為直接，后果最為嚴(yán)重，因而最受到人們的普遍重視。,,4,三、生物安全的相關(guān)術(shù)語1.實驗室生物安全（laboratory biosafety）是指從事生命科學(xué)研究和教學(xué)的實驗室為避免各種生物危害而采取包括建立規(guī)范的管理體系、配備必

6、要的物理、生物防護設(shè)施和設(shè)備等綜合措施。2.生物安全實驗室（biosafety laboratory, BSL）是指專門從事病原微生物的實驗室，為避免病原微生物對工作人員、公眾的危害以及對環(huán)境的污染，保證試驗研究的科學(xué)性或保護被試驗因子免受污染，通過防護屏障和管理措施，達到生物安全要求的生物實驗室。實驗室的生物安全水平可以分為：基礎(chǔ)實驗室- 一級生物安全水平基礎(chǔ)實驗室- 二級生物安全水平防護實驗室-三級生物安全水平最高防護實

7、驗室-四級生物安全水平。,,5,3．實驗動物生物安全實驗室（Animal Biosafety Laboratory, ABSL）將不同級別的病原微生物感染動物，進行動物試驗研究，用于動物傳染病或動物模型的臨床診斷、治療、預(yù)防，以及未知病原體的鑒定研究等工作，需要在相應(yīng)級別的ABSL中進行，如一、二、三、四類病原微生物的動物實驗應(yīng)在ABSL-4、3、2、1中進行。級別越高，硬件防護設(shè)施和軟件管理要求就越嚴(yán)。,動物生物安全實驗室操作和安全

8、設(shè)施,,6,四、國內(nèi)外生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)（一）國外實驗室生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)１．世界衛(wèi)生組織：《實驗室生物安全手冊》（2004年第三版）２．美國疾病預(yù)防控制中心《微生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全準(zhǔn)則》（1999年第四版）３．歐洲經(jīng)濟共同體委員會指令93/88（二）我國實驗室生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)1. 病原微生物實驗室生物安全管理條例及配套文件國務(wù)院第424號國務(wù)院令：《病原微生物實驗室生物安全管理條例》（2004年11月1

9、2日）農(nóng)業(yè)部：《動物病原微生物分類名錄》、《致病性動物病原微生物菌（毒）種或者樣本運輸包裝規(guī)范》和《高致病性動物病原微生物實驗室生物安全管理審批辦法》。衛(wèi)生部：包括《人間傳染的病原微生物名錄》和《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》。,,7,2. 醫(yī)療廢物管理條例及配套文件國務(wù)院第380號令《醫(yī)療廢物管理條例》（2003年6月4日）衛(wèi)生部和國家環(huán)境保護總局：《醫(yī)療廢物分類目錄》、《醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法

10、》。衛(wèi)生部：《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》（2003年8月14日）國家環(huán)保總局：《醫(yī)療廢物專用包裝物、容器標(biāo)準(zhǔn)和警示標(biāo)識規(guī)定》(環(huán)發(fā)[2003]188號)和《醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)范》（試行）（環(huán)發(fā)[2003]206號）。3.中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《實驗室生物安全通用要求》（GB 19489—2008） 4.建設(shè)部：《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》（GB 50346－2004）5.農(nóng)業(yè)部：《獸醫(yī)實驗室生物安全管理規(guī)范

11、》（2003年10月15日）,,8,一、廢棄物廢棄墊料醫(yī)療及實驗廢棄物3. 廢液 廢棄物管理的總體原則是對從實驗室廢棄物的產(chǎn)生、分類收集、警示標(biāo)記、密閉包裝與運輸、貯存、集中統(tǒng)一無害化處置的整個流程實行全過程嚴(yán)格控制，確保使感染性、有毒有害廢物得到有效安全處理。,第二節(jié) 實驗動物生物危害的種類及控制,,9,二、動物糞便三、動物尸體四、野生動物和昆蟲五、動物致敏原六、有害氣體,,10,第三節(jié) 動物飼養(yǎng)和實驗人員的安全防

12、護,一、動物實驗前人員的安全教育我國的實驗動物法規(guī)規(guī)定，從事實驗動物和動物實驗工作的人員必須經(jīng)過培訓(xùn)，了解和掌握相關(guān)的法規(guī)條例及操作規(guī)范、實驗動物知識、動物實驗基本技術(shù)，其中也包括了安全意識教育，了解和掌握生物危害的防護知識。動物實驗前人員的安全教育可形式多樣，如參加實驗動物從業(yè)人員的崗位培訓(xùn)、選修《醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)》課程，對初入實驗動物室的實驗人員進行現(xiàn)場介紹、指導(dǎo)等。生物安全的許多內(nèi)容包含在實驗動物室的各種管理制度中，因此實驗人員

13、熟悉并嚴(yán)格遵守這些規(guī)章制度是生物安全的保證。,,11,二、動物實驗中的個人安全防護 (一)個人防護用品的穿戴最基本的防護就是要穿著合適的防護工作服和戴口罩、帽子和手套，避免身體與動物直接接觸。不同級別的環(huán)境要求著裝也不同。當(dāng)進行特殊實驗時應(yīng)根據(jù)需要選擇相應(yīng)特殊防護裝置，如ABSL-3除要求穿特制的無菌隔離服外，在處理病原體時還須戴防護面罩，離開時淋??；ABSL-4要求穿具有生命維持系統(tǒng)的正壓防護服，離開時淋浴。隔離服穿著方法。

14、,,12,（二）健康檢查及疫苗接種直接接觸實驗動物的工作人員定期組織體格檢查。對患有傳染性疾病，不宜承擔(dān)所做工作的人員，應(yīng)當(dāng)及時調(diào)換工作。進行已知的傳染性實驗，要在實驗前對工作人員進行特異性血清抗體檢測并留存，以后要進行定期特異抗體檢測，以便了解工作人員是否在工作中受到了感染。進行強傳染性病原體研究的人員，有條件者要進行藥物和血清抗體預(yù)防治療或備用，有疫苗的要進行預(yù)防免疫。建議長期飼養(yǎng)犬飼養(yǎng)人員預(yù)防接種狂犬疫苗，飼養(yǎng)靈長類動物

15、飼養(yǎng)人員預(yù)防接種甲型肝炎疫苗，并定期進行結(jié)核菌素試驗。,,13,三、意外損傷的防護 1.動物咬、抓傷被SPF大小鼠抓傷皮膚較表淺時，可在傷處局部皮膚區(qū)涂抹紅汞即可；如被大小鼠咬傷出血，可先擠出傷口處血液，再用0.3%雙氧水棉球消毒傷口，用干棉球擦干后再外貼創(chuàng)可貼。被普通級豚鼠、兔抓傷時，先清洗局部皮膚，再在傷處局部皮膚區(qū)涂抹紅汞即可。被普通級比格犬咬傷時，視咬傷時傷口的大小和深淺、出血的多少而定。傷口較小，出血較少的傷口可先擠出

16、傷口處血液，再用0.3%雙氧水棉球消毒傷口，用干棉球擦干后再外貼創(chuàng)可貼；傷口較大、出血較多時，應(yīng)送醫(yī)院進行治療。,,14,對被非標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物如草犬、貓、羊、豬等咬傷時，除了進行上述創(chuàng)口處理外，應(yīng)詳細(xì)了解供應(yīng)商的誠信程度、該批犬的來源和疫苗接種情況，確信原始個體檔案的真實可靠。如無法對上述資料的真實性作出判斷時，視咬傷程度決定是否應(yīng)注射狂犬疫苗。應(yīng)對咬人非標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物進行至少二周的密切觀察，觀察的內(nèi)容包括一般狀態(tài)、精神行為、攝食和飲

17、水、大小便等。如有疑似狂犬病或其它重要人獸共患病癥狀時，應(yīng)立即捕殺，局部消毒，動物尸體焚燒處理。被咬人應(yīng)送醫(yī)院進行緊急處理。,,15,2.注射針頭、手術(shù)刀、銳利的器械損傷如果這些銳器已接觸動物組織或血液，處理方法同動物咬傷；如果未接觸動物則消毒包扎即可。創(chuàng)口較大、出血較多時，應(yīng)送醫(yī)院進行治療。3. 有毒有害、感染性材料污染身體有毒有害試劑污染皮膚時，應(yīng)用適量自來水沖刷，用肥皂洗滌即可。當(dāng)感染性病原體污染皮膚時，皮膚局部用碘酒消毒，

18、再用75%酒精去碘消毒。當(dāng)有毒有害、感染性材料濺入眼睛時，應(yīng)立即用洗眼機沖洗眼睛，用抗菌素眼藥水滴眼，并視情況送醫(yī)院作進一步檢查和治療,一、病毒性疾病（一）狂犬病【病原體】狂犬病毒【傳染病學(xué)】傳染源，傳播途徑，易感動物和人群【臨床表現(xiàn)】1. 潛伏期2. 前驅(qū)期3. 興奮期4. 昏迷期【預(yù)防措施】犬普遍接種疫苗可疑犬隔離檢疫人被咬傷后傷口處理注射狂犬疫苗和狂犬病毒抗血清從正規(guī)犬飼養(yǎng)場購買實驗犬,,16,第三節(jié)

19、 重要的人獸共患病,WHO：咬傷程度的分級和處理意見,,17,（二）淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎【病原體】淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒【流行病學(xué)】傳染源：野生小鼠、倉鼠傳播途徑：接觸動物通過呼吸道、消化道傳播；污染細(xì)胞培養(yǎng)易感動物和人群：【臨床表現(xiàn)】 流感樣癥狀，無菌性腦膜炎【預(yù)防措施】加強飼養(yǎng)管理；做好個人防護。,,18,（三）流行性出血熱【病原體】漢坦病毒【流行病學(xué)】傳染源：帶毒野生褐家鼠或?qū)嶒灤笫髠鞑ネ緩剑簹?/p>

20、溶膠吸入或咬傷易感動物和人群：普遍易感【臨床表現(xiàn)】全身表現(xiàn)：三痛、三紅；急性腎功能不全?！绢A(yù)防措施】加強飼養(yǎng)管理，消滅動物房周圍野鼠；從正規(guī)實驗動物公司購買動物；做好個人防護。,,19,（四）B病毒病【病原體】猴皰疹病毒（B病毒）【流行病學(xué)】傳染源：帶毒野生猴傳播途徑：咬傷，污染針頭刺傷或?qū)嶒炇腋腥疽赘腥巳海猴曫B(yǎng)人員和實驗人員【臨床表現(xiàn)】 局部形成水皰，侵犯神經(jīng)系統(tǒng)引起腦脊髓炎?！绢A(yù)防措施】購入無

21、B病毒感染猴群；做好個人防護；發(fā)現(xiàn)可疑病猴及時隔離；咬傷后傷口處理。,,20,二、細(xì)菌性疾?。ㄒ唬┥抽T氏菌病【病原體】腸道沙門氏菌屬【流行病學(xué)】帶菌動物、消化道傳播【臨床表現(xiàn)】急性胃腸炎癥狀【預(yù)防措施】加強飼養(yǎng)管理，及時更換墊料、清除糞便；加強個人防護，動物實驗結(jié)束后洗手。,,21,（二）布魯氏病【病原體】布魯氏桿菌【流行病學(xué)】傳染源：羊、牛、豬、犬、鹿等分泌物、排泄物、流產(chǎn)胎兒附屬物及羊水等傳播途徑：接觸及