實驗室生物安全

1、培訓(xùn)人：XXX,1,實驗室生物安全培訓(xùn),2,目 錄,3,4,5,,（一）、實驗室感染事件（二）、氣溶膠與實驗室感染,一、實驗室生物安全危害,6,（一）、實驗室感染事件,前車之鑒,1、美國CDC醫(yī)務(wù)人員感染HIV數(shù)據(jù)統(tǒng)計,7,2、我國實驗室感染SARS事件,中國CDC實驗人員感染非典病毒事故　 2004年4月中國CDC病毒所腹瀉病毒室兩名研究生在做病毒實驗時感染sars 病毒。 事故調(diào)查：事故起因系該所實驗人

2、員多次違規(guī)將未完全滅活的sars病毒從P3實驗室?guī)С鲋疗胀▽嶒炇也僮鞫稹?處理措施:中國疾控中心主任李立明引咎辭職。 臺灣實驗人員感染非典病毒事故　 2003年12月臺灣一位實驗人員在 P3 實驗室做病毒實驗時，因清理廢棄物操作疏忽，安全程序處理不當(dāng)而感染病毒。,（一）、實驗室感染事件,8,親切握手--熱烈交談--粗心與意外--,實驗室感染途徑,穿白褂到處走戴手套隨意開手柄

3、 臺面/器皿不清潔 不做善后工作 清潔區(qū)與污染區(qū)不分,針刺、器皿破碎、離心、穿拖鞋,空氣傳播,手口傳播,無知最危險--,9,（二）、氣溶膠與實驗室感染,對3921例實驗室相關(guān)感染統(tǒng)計分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，已知原因的實驗室感染只占全部感染的18％，不明原因的實驗室感染卻高達(dá)82％。 對不明原因的實驗室感染的研究表明，大多數(shù)可能是

4、病原微生物形成的感染性氣溶膠在空氣擴散，實驗室內(nèi)工作人員吸入了污染的空氣感染發(fā)病的。,10,11,12,生物氣溶膠無色無味、無孔不入，不易發(fā)現(xiàn)，實驗人員在自然呼吸中不知不覺吸入而造成感染。若治療控制不及時會造成嚴(yán)重后果。呼吸道傳播的傳染病的微生物特別是高致病性病毒常常發(fā)生變異，尤其是其抗原性、致病性都可能發(fā)生改變，在空氣中存活力增強?？梢赃h(yuǎn)距離或較遠(yuǎn)距離傳播，這是其與其他傳播途徑的顯著區(qū)別，也是氣溶膠傳播難以預(yù)防的另一重要原因。

5、,氣溶膠的特點,13,可產(chǎn)生各種嚴(yán)重程度微生物氣溶膠的實驗室操作,14,15,16,微生物氣溶膠的控制,實驗室空氣傳播與感染主要有三個過程：一是微生物氣溶膠的產(chǎn)生二是微生物氣溶膠的擴散三是微生物氣溶膠人體暴露和吸入因此，要控制或減少實驗室空氣傳播和感染，要有相應(yīng)得生物安全措施，以控制實驗室微生物氣溶膠感染的三個過程。,17,微生物氣溶膠的控制,安全操作規(guī)范和改進(jìn)操作過程和操作技術(shù)，盡量避免操作失誤。例如：用冷卻接種環(huán)

6、沾取菌液進(jìn)行接種------氣溶膠減少效果可達(dá)91%。,18,使用生物安全柜,各種產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作盡量在生物安全柜內(nèi)操作。正確使用生物安全柜，以有效地減少實驗室獲得性感染和由于氣溶膠暴露而導(dǎo)致的培養(yǎng)物的交叉感染，并能保護環(huán)境。,19,個人防護與實驗室通風(fēng)系統(tǒng),實驗室工作人員在進(jìn)行微生物檢驗時，應(yīng)進(jìn)行個人防護。操作時應(yīng)穿戴防護服、口罩、面罩、帽子和手套。對實驗室以外區(qū)域應(yīng)形成一個相對密閉的系統(tǒng)，對實驗室內(nèi)部則是一個氣流定向流

7、動的系統(tǒng)，清潔區(qū)、緩沖區(qū)、低污染區(qū)、嚴(yán)重污染區(qū)，每個區(qū)域之間保持一定壓差，防止空氣倒流。,20,做完的標(biāo)本可以這樣處理！,21,（一）防護設(shè)備設(shè)施（二）個人防護用品（三）醫(yī)療垃圾處置,二、實驗室生物安全防護,22,安全防護的基本要求,在實驗室工作時，必須穿著合適的工作服或防護服。在進(jìn)行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。在處理完感染性實驗材料后

8、，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。為了防止眼睛或面部受到噴濺物的污染、碰撞或人工紫外線輻射的傷害，必須戴合適的安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護設(shè)備。,23,安全防護的基本要求,嚴(yán)禁穿著實驗室防護服離開實驗室工作區(qū)域。不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋。禁止在實驗室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。,24,（一）防護設(shè)備設(shè)施,生物

9、安全柜壓力蒸汽滅菌器可移動紫外燈紅外加熱滅菌器酒精燈洗眼沖淋裝置,25,26,生物安全柜,主要的保護屏障，防止生物有害氣溶膠逃逸.保護操作人員-負(fù)壓保護周邊環(huán)境-HEPA可以保護樣品-層流,27,生物安全柜,實驗室操作都可能產(chǎn)生感染性氣溶膠。 直徑小于5μm的氣溶膠、直徑為5～100μm的微小液滴亦可能產(chǎn)生吸入或交叉污染工作臺面的其他材料。 正確使用生物安全柜—將有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實驗室感染以及培養(yǎng)物

10、交叉污染。,28,CLASS II 二級生物安全柜,層流負(fù)壓柜 CLASSII級生物安全柜適用于1、2、3級生物安全水平的實驗。它們可以安全的保護樣品、人員和環(huán)境。CLASS II 級生物安全柜根據(jù)結(jié)構(gòu)以及氣流分配的不同，主要是外排氣流，分為： A型 （30%排在實驗室內(nèi) ） B型 B1 （70%接管道外排） B2 （100%接管道外排）

11、 B3 （30% 接管道外排） HEPA（高效微粒子空氣，能99.99%地去除0.3微米以上顆粒),29,在生物安全柜上工作,理想的工作臺擺放原則（清潔→污染區(qū)） 在工作臺面上的實驗操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行,30,在生物安全柜上操作,避免使用明火，用適當(dāng)?shù)臏缇胧┍苊馐褂酶蓴_安全柜內(nèi)層流的實驗手段如使用中有遺灑，所有物品被拿走前必須經(jīng)去污染處理安全柜必須處于操作狀態(tài)時，才能徹

12、底消毒內(nèi)壁,明火： 在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中應(yīng)避免使用明火。 --使用明火會對氣流產(chǎn)生影響 --特別在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時，也易造成危險 --在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應(yīng)使用明火。,31,安全柜的維護保養(yǎng),用消毒劑清潔所有內(nèi)壁，待其干燥 定期抬起工作面清潔下面的區(qū)域；洗 凈抹布 每天關(guān)機后，打開安全柜內(nèi)部的紫外 燈消毒

13、60分鐘 安全柜每年需要進(jìn)行性能檢測 第三方機構(gòu)（個體防護能力、樣品保 護能力、交叉污染防護能力）,32,淋浴裝置和應(yīng)急消毒噴淋裝置,1、 規(guī)定：--BSL-2實驗室在必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。--BSL-3實驗室應(yīng)設(shè)置淋浴裝置（清潔區(qū)），必要時在半污染區(qū) 設(shè)置應(yīng)急消毒噴淋裝置。 2、要求：保持管道的通暢、必須告知工作人員應(yīng)急消毒。噴淋裝置的擺放位置、培訓(xùn)其操作方法。應(yīng)急消毒噴淋裝置 。在使用中可

14、用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗時間至少需要20分鐘。如果為化學(xué)物品濺出污染，用大量急水沖洗。當(dāng)使用緊急淋浴裝置后必須立刻填寫事故報告單并立即報告主管領(lǐng)導(dǎo) 。,33,（二）個人防護用品,護目鏡 口罩、帽子 防護衣 ( 實驗服、隔離衣) 手套 鞋套,34,個體防護的配備原則,BSL－1實驗室：工作人員在實驗時應(yīng)穿工作服，戴醫(yī)用口罩。工作人員手上有皮膚破損或皮疹時應(yīng)戴手套。,35,個體防護的配備原則,BSL－2實驗室

15、：除符合BSL－1的要求外，還應(yīng)該符合下列條件：在實驗室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內(nèi)。不得穿著外出。用過的工作服應(yīng)先消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。,36,37,正確使用手套,1、手套的選擇：生物安全實驗室一般使用

16、乳膠橡膠或聚腈類 或聚氯乙烯手套用于對強酸、強堿、有機溶劑和生物危害物質(zhì)的防護 。 2、手套的檢查：在使用手套前應(yīng)該檢查手套是否退色、穿孔（漏損）或有裂縫?？梢?通過充氣試驗，將其 浸入水中觀察是否有 汽泡來檢查手套的質(zhì) 量。 3、手套的使用： a） 一般情況下，佩戴一副手套即可（B

17、SL-1實驗室）， b）若在生物安全柜中操作感染性物質(zhì)時（BSL-2和BSL-3實驗室）應(yīng)該佩戴兩副手套。,乳膠手套,聚脂手套,38,正確使用手套,c） 在操作過程中，外層手套被污染，立即用消毒劑噴灑手套 并脫下后丟棄在生物安全柜中的高壓滅菌袋中并立即戴上新手 套繼續(xù)實驗。 d）戴好手套后應(yīng)完全遮住手及腕部，如必要可覆蓋實驗服袖。 4、手套的清洗和更換： a)使用一次性手套，不可再次

18、使用。用后立即進(jìn)行 高壓滅菌消毒然后丟棄。 b)不得戴著手套離開實驗室區(qū)域。,39,戴手套注意要點:,1)在實驗室工作中要一直保持戴手套狀態(tài)并選擇正確類型和尺寸的手套；2)將手插入手套后將手套口遮蓋實驗服袖;手套的手要遠(yuǎn)離面部。,40,脫手套過程及注意要點:,用一手捏起另一近手腕部處的手套外緣,將手套從手上脫下并將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi)；用戴著手套的手拿住該手套；用脫去手套的手指插入另一手套腕部處內(nèi)面；脫下該手套使其內(nèi)面向

19、外并形成一個由兩個手套組成的袋狀；丟棄在高溫消毒袋中并進(jìn)行消毒處理。,41,（三）醫(yī)療垃圾處置,黃色垃圾袋——醫(yī)療垃圾黑色垃圾袋——生活垃圾紅色垃圾袋——放射性垃圾黃色銳器盒——損傷性垃圾,42,醫(yī)療廢物分類,感 染 性 廢 物病 理 性 廢 物損 傷 性 廢 物藥 物 性 廢 物化 學(xué) 性 廢 物,43,感染性廢物,特征：攜帶病原微生物具有引發(fā)感染性疾病傳播危險的醫(yī)療廢物。常見：1、被病人血液。體液。排泄物污染的物品

20、，包括：棉球、棉簽、引流面條、紗布及其他各種敷料；一次性使用衛(wèi)生用品、一次性使用醫(yī)療用品；一次性醫(yī)療器械；廢棄的被服；其它被病人血液、體液、排泄物污染的物品。2、醫(yī)療機構(gòu)收治的隔離傳染病病人或者疑似傳染病病人產(chǎn)生的生活垃圾。3、病原體的培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌種保存液。4、各種廢棄的醫(yī)學(xué)標(biāo)本。5、廢棄的血液、血清。,44,病理性廢物,特征：診療過程中產(chǎn)生的人體廢棄物和醫(yī)學(xué)實驗動物尸體等。常見：1、手術(shù)及其它診療過程中產(chǎn)生的廢棄的人體組織、器官

21、等。2、醫(yī)學(xué)實驗動物的組織、尸體。3、病理切片后廢棄的人體組織、病理臘塊等。,45,損傷性廢物,特征：能夠刺傷或者割傷人體的廢棄的醫(yī)用銳器。常見：1、醫(yī)用針頭、縫合針。2、各類醫(yī)用銳器，包括：解剖刀、手術(shù)刀、備皮刀、手術(shù)鋸等。3、載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿等。,46,藥物性廢物,特征：過期、淘汰、變質(zhì)或者被污染的廢棄的藥品。常見：1、廢棄的一般性藥物，如：抗生素、非處方類藥品等。2、廢棄的細(xì)胞毒性藥物和遺傳毒性藥物，包括:致癌性藥物

22、，如環(huán)孢霉素、環(huán)磷酰胺等；可疑致癌性藥物，如:順鉑、絲裂霉素、阿霉素等；免疫抑制劑等。3、廢棄的疫苗、血液制品等。,47,化學(xué)性廢物,特征：具有毒性、腐蝕性、易燃易爆性的廢棄的化學(xué)物品。常見：1、醫(yī)學(xué)影像室、實驗室廢棄的化學(xué)試劑。2、廢棄的過氧乙酸、戊二醛等化學(xué)消毒劑。3、廢棄的汞血壓計、汞溫度計。,48,醫(yī)療廢物嚴(yán)格按照分類分別置于黃色有警示標(biāo)識的防滲漏、防破裂、防穿孔的專用垃圾袋/盒中，并貼好標(biāo)簽。,49,醫(yī)療垃圾由衛(wèi)生員收集，并

23、填寫相應(yīng)醫(yī)療垃圾收集處置登記本，再由指定的人員轉(zhuǎn)運至醫(yī)院醫(yī)療垃圾儲存處。微生物培養(yǎng)基、鑒定藥敏卡、菌毒株等醫(yī)療垃圾移交前需進(jìn)行預(yù)處理（高壓滅菌）血液、血清以及體液等標(biāo)本移交前需用有效氯2000mg/L的消毒液浸泡30分鐘以上。針頭、玻片等損傷性垃圾要放入黃色銳器盒中。,醫(yī)療垃圾的收集處置,50,51,三、手衛(wèi)生,52,手衛(wèi)生,手的清潔與消毒是控制醫(yī)院感染最重要、最簡便的措施之一。全球洗手日 每年10月15日,53,手

24、衛(wèi)生,無生命的環(huán)境是病原體的儲存庫！,54,沾滿各種病原菌的雙手,55,手衛(wèi)生的重要性,接 觸 病菌 洗手,,,菌,,,,,,,56,,57,,,58,什么時間洗手?,直接接觸病人前后摘手套后（戴手套不能代替洗手）不論是否戴手套，進(jìn)行侵襲性操作前,,59,接觸體液或排泄物、粘膜、非完整皮膚或傷口敷料后 護理病人從污染部位移到清潔部位時接觸緊鄰病人的物品后（包括醫(yī)療設(shè)備）

25、,,什么時間洗手?,60,61,,,第一步：掌心相對，手指并攏相互摩擦,手衛(wèi)生技術(shù),62,,,第二步：手心對手背沿指縫相互搓擦,手衛(wèi)生技術(shù),63,,,第三步：掌心相對，雙手交叉沿指縫相互摩擦,手衛(wèi)生技術(shù),64,,,第四步：雙手指交鎖，指背在對側(cè)掌心,手衛(wèi)生技術(shù),65,,,第五步：一手握另一手大拇指旋轉(zhuǎn)搓擦，交換進(jìn)行,手衛(wèi)生技術(shù),66,,,第六步 指尖在對側(cè)掌心前后擦洗,手衛(wèi)生技術(shù),67,,,第六步 指尖在對側(cè)掌心前后擦洗,