檢驗醫(yī)學進展血細胞分析校準指南

1、血細胞分析校準指南,,血細胞分析儀技術,一、Backman-Coulter公司(VCS)二、Sysmex(多通道阻抗+射頻，流式+核酸熒光染色)三、Abbott（MAPSS）四、Bayer(光散射+染色)五、Abx(DHSS),血液分析儀全面質(zhì)控,一、分析前質(zhì)量管理1、上崗培訓2、選擇合適的工作環(huán)境3、儀器的鑒定與評價4、儀器的校準與管理5、標本的采集與運送6、受檢者生理影響,二、分析中質(zhì)量管理1、試劑的合理使用

2、2、標本要求3、室內(nèi)質(zhì)控4、病例因素對結(jié)果的影響5、回顧性質(zhì)量控制,血液分析儀全面質(zhì)控,三、分析后質(zhì)量管理1、WBC直方圖2、分析各參數(shù)之間的關系3、與臨床資料結(jié)合分析4、定期征求臨床對本室結(jié)果評價,血液分析儀全面質(zhì)控,血液分析儀性能評價,血液分析儀性能評價,方法學評價參考文件,血液分析儀性能評價,血液分析儀性能評價內(nèi)容,1.稀釋效應（線性范圍）2.精密度（批內(nèi)、批間和總精密度）3.攜帶污染率4.可比

3、性5.準確度6.抗干擾能力7.標本老化,血液分析儀性能評價方法,1. CLSI EP6-P2. CLSI EP5-A2 批準指南第二版3. CLSI EP9-A2 批準指南 EP15-A4.干擾能力--------CLSI EP7-A2,術語與定義,血細胞分析校準指南,血液分析儀（Hematology analyzer）,主要用于檢測人體血液標本，是能對血液中有形成分進行

4、定性、定量分析，并提供相關信息的儀器。,校準（Calibriation）,在規(guī)定的條件下，為確定測量儀器或測量系統(tǒng)所指示的量值，或?qū)嵨锪烤呋騾⒖嘉镔|(zhì)所代表的量值，與對應的由標準所復現(xiàn)的量值之間的關系的一組操作。,血細胞分析校準指南,術語與定義,準確性（accuracy）,一個測量值與可接受的參考值之間的一致程度。,重復性（repeatability）,在相同測量條件下，對同一被測量物進行連續(xù)多次測量所得結(jié)果之間的一致性。,偏移（b

5、isa）,試驗結(jié)果的期望值與可接受的參考值之間的差異。,2、對每一臺血液分析儀定期進行校準。,血細胞分析校準指南,校準總則,1、實驗室需建立適合本實驗室使用的血細胞分析校準程序并寫成文件。 內(nèi)容包括： ①校準物的來源、名稱、溯源性、及其保存方法； ②校準的具體方法和步驟； ③何時要求進行校準、由何人負責實施等。,4、血液分析儀進行校準后，以為了監(jiān)測儀器的檢測結(jié)果是否發(fā)生漂移，應開展室內(nèi)質(zhì)量控制。,血細胞分析

6、校準指南,校準總則,3、同一臺血液分析儀使用不同吸樣模式時，應分別進行校準。,血細胞分析校準指南,校準前的性能要求,1．背景計數(shù)：應符合儀器說明書標示的性能要求。,2．攜帶污染率：應符合儀器說明書標示的性能要求。,3．精密度：應符合儀器說明書標示的性能要求，同時 應滿足臨床需要。,4．線性要求：應符合儀器說明書標示的性能要求，同 時應滿足臨床需要。,血細胞分析校準指南,校準的環(huán)境條件,1、環(huán)

7、境溫度在18℃-25 ℃范圍內(nèi)（在開展日常檢測工作時溫度亦應控制在范圍內(nèi)）,2、不管是校準，還是日常檢測均因注意電源、濕度、防震、防磁等環(huán)境條件的影響。,校準物,一、校準物的來源,2．校準實驗室提供的定值新鮮血 (要求直接或間接地溯源至參考方法),1．制造商推薦使用的校準物,血細胞分析校準指南,血細胞分析校準指南,校準物,二、校準物的選擇,1．使用配套檢測系統(tǒng)的實驗室，可以使用制造商推薦使用的校準物，也可使用新鮮血作為校準物。,

8、2．使用非配套檢測系統(tǒng)的實驗室，只能使用新鮮血進行儀器的校準。,1．直接溯源至國際標準的定值方法： 可使用血細胞分析的參考方法定值，但要求建立參考方法的難度較大，在臨床實驗室難以實施。,血細胞分析校準指南,校準物,新鮮血作為校準物的定值,規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)：使用配套試劑，用配套校準物定期進行儀器校準，規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制，參加室間質(zhì)量評價成績優(yōu)良，人員經(jīng)過培訓。,血細胞分析校準指南,2．間接溯源至國際標準的定值方法：,校準物,

9、新鮮血作為校準物的定值,取新鮮血用二級標準檢測系統(tǒng) 或規(guī)范操作的檢測系統(tǒng) 對其進行定值，用定值的新鮮血作為常規(guī)校準物。要求在8小時內(nèi)（溫度條件為18℃-25℃）完成定值及儀器的校準。,二級標準檢測系統(tǒng)：直接溯源至參考方法，具備較完善的質(zhì)量保證措施，與國外具有權威性的參考實驗室定期進行比對的檢測系統(tǒng)。,非指南內(nèi)容,血細胞分析校準指南,校準項目,WBC,RBC,Hb,Plt,Hct/MCV,校準方法,血細胞分析校準指南,1、按儀器說明書規(guī)定

10、的程序進行校準，如說明書規(guī)定的程序不完善時，也可按照如下程序進行校準。,2、儀器的準備：用清潔劑對儀器內(nèi)部各通道及測試室處理30分鐘。確認儀器的背景計數(shù)、精密度在說明書規(guī)定的范圍內(nèi)時，才可進行校準，否則須查找原因，必要時請維修人員進行檢修。,血細胞分析校準指南,3、校準物的準備3.1 使用制造商提供的配套校準物①將校準物從冰箱內(nèi)（2-8℃）取出后，要求在室溫（18-25℃）條件下放置15分鐘，使其溫度恢復至室溫。②檢查校

11、準物是否超出效期，是否有變質(zhì)或污染。③輕輕地將校準物反復顛倒混勻，并置于兩手掌間慢慢搓動，使校準物充分混勻。④打開瓶塞時，應墊上紗布或軟紙，使濺出的血液被吸收。⑤將兩瓶校準物合在一起，混勻后再分裝于2個瓶內(nèi)。,3.2 使用新鮮血作為校準物時①用EDTA-K2為抗凝劑的真空采血管取健康人新鮮血，將新鮮血分裝于3個管內(nèi)。②取其中1管，用二級標準檢測系統(tǒng)或規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)連續(xù)檢測11次，計算第2-11次檢測結(jié)果的均值，以此

12、均值為新鮮血的定值。③其他2管新鮮血作為定值的校準物，用于儀器的校準及結(jié)果的驗證。,血細胞分析校準指南,4、對校準物進行檢測取1瓶校準物，連續(xù)檢測11次，第1次檢測結(jié)果不用，以防止攜帶污染。,5、儀器若無自動校準的功能，則將第2-11次的各項檢測結(jié)果用手工記錄在工作表格中，計算出均值，均值的小數(shù)點后數(shù)字保留位數(shù)較日常報告結(jié)果多一位。有自動校準功能的儀器可直接得出均值。,血細胞分析校準指南,6、均值與校準物定值比較以判別是否需

13、要調(diào)整儀器 6.1計算各參數(shù)的均值與定值相差的百分數(shù)（不計正負號），計算公式： （均值-定值）/定值×100% 與下表的標準進行比較。,血細胞分析校準指南,6.2 判定：各參數(shù)均值與定值的差異全部等于或小于表中的第一列數(shù)值時，儀器不需進行校準，記錄檢測數(shù)據(jù)即可； 若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時，需請維修人員核查原因并進行處理； 若各參數(shù)均值與定值的差異在表中第一列與第二列數(shù)

14、值之間時，需對儀器進行調(diào)整，調(diào)整方法可按說明書的要求進行。 若儀器無自動校準功能，則將定值除以所測均值，求出校準系數(shù)，將儀器原來的系數(shù)乘以校準系數(shù)即為校準后的系數(shù)，將校準后的系數(shù)辦事入儀器更換原來的系數(shù)。,血細胞分析校準指南,7、校準結(jié)果的驗證 將第2管未用的校準物充分混勻，在儀器上重得檢測11次，去除第1次結(jié)果，計算第2-11次檢測結(jié)果的均值，再次與表中的數(shù)值對照。如各參數(shù)的差異全部等于或小于第一列數(shù)值，

15、證明校準合格。如達不到要求，須請維修人員進行檢修。,血細胞分析校準指南,①血液分析儀在投入使用前（新安裝或舊儀器重新啟用）；②更換部件進行維修后，可能對檢測結(jié)果的準確性有影響；③儀器搬動后，需要確認檢測結(jié)果的可靠性；④室內(nèi)質(zhì)量控制顯示系統(tǒng)的檢測結(jié)果有漂移時（排除儀器故障和試劑的影響因素后）；⑤比對結(jié)果超出允許范圍；⑥實驗室認為需要進行校準的其他情況。,血細胞分析校準指南,復校時間間隔,1、對于開展常規(guī)檢測的實驗室，要求每半